高核苷酸酵母水解物(High nucleotide yeast hydrolyzate,HNYH)是一種新型營養(yǎng)健康、安全綠色的食品添加劑。研究發(fā)現(xiàn),其富含大量的核酸、核苷酸(AMP、CMP、GMP、UMP、IMP)、寡肽、消化酶、游離氨基酸及豐富的B族維生素及酵母細(xì)胞壁多糖多種營養(yǎng)成分。具有多種生物學(xué)活性,在脂類、糖類、能量代謝、蛋白質(zhì)生物合成中起著重要的作用,有抗氧化、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、維持機(jī)體胃腸道平衡等功能。HNYH在醫(yī)藥、保健品、調(diào)味品等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,在食品領(lǐng)域有豐富的研究意義和市場(chǎng)價(jià)值。本論文研究了其系統(tǒng)生物學(xué)評(píng)價(jià),包括物性評(píng)價(jià),對(duì)食品領(lǐng)域的加工適用性及智能感官評(píng)價(jià);構(gòu)建了細(xì)胞評(píng)價(jià)模型,研究其清除自由基能力、抗氧化特性和抗炎能力。探索酵母核苷酸在功能食品領(lǐng)域的作用機(jī)制,并以此為基礎(chǔ)開發(fā)一款提高免疫力的代餐粉,主要內(nèi)容有:1.參照國標(biāo)法測(cè)定了三種酵母水解物的營養(yǎng)成分,比較分析了酵母水解物中五種核苷酸含量及粉體特性;發(fā)現(xiàn)HNYH中核苷酸含量達(dá)到13.6%,是Ⅱ型酵母水解物的63倍,安琪FA31酵母肽的17倍,并且HNYH粉體流動(dòng)性最好。運(yùn)用電子鼻檢測(cè)水解物的復(fù)雜嗅味和揮發(fā)性成分,獲取樣品的氣味指紋圖譜,對(duì)不同酵母水解物實(shí)現(xiàn)了有效區(qū)分和判別;運(yùn)用電子舌對(duì)樣品進(jìn)行模式識(shí)別和定性定量分析,獲取樣品的酸、咸、鮮、苦、澀、甜味以及豐富度、尖銳度、苦回味等,得出對(duì)樣品味覺特征的總體評(píng)價(jià),為其產(chǎn)品的開發(fā)提供可靠數(shù)據(jù)支撐;使用電鏡觀察不同樣品的微觀結(jié)構(gòu),并對(duì)樣品中不同成分進(jìn)行定性和半定量分析,完成對(duì)原料整體全面智能感官評(píng)價(jià)。2.本試驗(yàn)采用化學(xué)法測(cè)定了HNYH清除DPPH自由基、羥自由基和總還原能力;建立了游離脂肪酸(Free fatty acid,FFA)誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞氧化應(yīng)激模型,細(xì)胞體外培養(yǎng)試驗(yàn)。結(jié)果表明,HNYH可以緩解FFA誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng),保護(hù)作用與HNYH濃度呈正相關(guān),能顯著提高總抗氧化能力和抗氧化酶類活力,顯著降低MDA含量。HNYH添加量為1 mg/mL時(shí),ROS水平接近對(duì)照組水平,說明其具有顯著的抗氧化作用。RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組抗氧化酶基因NQO1、Nrf2和HO-1mRNA表達(dá)水平顯著增加,keap1mRNA表達(dá)水平降低。HepG2細(xì)胞核內(nèi)Nrf2的蛋白含量升高,胞漿中其蛋白含量降低,闡明了HNYH能夠激活Nrf2通路減輕FFA誘導(dǎo)的HepG2氧化應(yīng)激損傷作用。3.用脂多糖(1μg/mL)刺激生長良好的RAW264.7細(xì)胞24h建立體外細(xì)胞炎癥模型。結(jié)果表明,HNYH能明顯降低LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞炎癥因子NO,TNF-α,IL-1β和IL-6及其相關(guān)mRNA的表達(dá),降低iNOS及細(xì)胞核內(nèi)NF-κBp65蛋白水平表達(dá),并呈現(xiàn)濃度依賴關(guān)系。證實(shí)了HNYH對(duì)LPS致RAW264.7細(xì)胞炎癥的保護(hù)作用,作用機(jī)制與iNOS蛋白表達(dá)和NF-κB通路有關(guān),通過抑制NF-κB活化和核轉(zhuǎn)運(yùn),進(jìn)而保護(hù)機(jī)體免受炎性損傷。4.配制酵母肽餐包,并用電子鼻、電子舌對(duì)餐包的氣味和味覺進(jìn)行理性分析,獲取氣味指紋圖譜和味覺綜合評(píng)價(jià),采用小鼠巨噬細(xì)胞炎癥模型對(duì)酵母肽餐包進(jìn)行功能性評(píng)價(jià),結(jié)果表明,酵母肽餐包能夠抑制LPS作用于RAW264.7細(xì)胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。
【學(xué)位單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：TS202.3
【部分圖文】：

最終濾液保持在 18 mL 左右。向離心管中加入 2 mL 6mol/LHcl 溶液水浴 2 h，冷卻后加入 2 mL 6 mol/LNaOH 溶液搖勻，25mL 容量瓶定容，吸品液補(bǔ)蒸餾水至 1 mL，加 1 mL 5%苯酚及 5 mL 濃硫酸搖勻，冷卻 20 min，4 值。特性測(cè)定驗(yàn)利用 BT-1001 型智能粉體物性測(cè)試儀（圖 2.1）、Microtrac-S3500 激光粒度.2），測(cè)定各原料的粉體物性，包括休止角、崩潰角、差角、平板角、振實(shí)密、壓縮度、分散度、均齊度、流動(dòng)性指數(shù)、噴流性指數(shù)及粉體粒度分布，并評(píng)價(jià)。

最終濾液保持在 18 mL 左右。向離心管中加入 2 mL 6mol/LHcl 溶液水浴 2 h，冷卻后加入 2 mL 6 mol/LNaOH 溶液搖勻，25mL 容量瓶定容，吸品液補(bǔ)蒸餾水至 1 mL，加 1 mL 5%苯酚及 5 mL 濃硫酸搖勻，冷卻 20 min，4 值。特性測(cè)定驗(yàn)利用 BT-1001 型智能粉體物性測(cè)試儀（圖 2.1）、Microtrac-S3500 激光粒度.2），測(cè)定各原料的粉體物性，包括休止角、崩潰角、差角、平板角、振實(shí)密、壓縮度、分散度、均齊度、流動(dòng)性指數(shù)、噴流性指數(shù)及粉體粒度分布，并評(píng)價(jià)。

圖 2.3 電子鼻設(shè)備Figure 2.3 Electronic nose device覺分析日本國 Insent 公司的 TS500z 電子舌系統(tǒng)，包含 6 個(gè)化學(xué)傳感咸、鮮)和 1 個(gè)參比電極以及 Alphasoft V11 控制及化學(xué)計(jì)量學(xué)
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本文編號(hào)：2856563