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火龍果果皮多糖的結(jié)構(gòu)、活性及其在制備亞麻籽油脂粉末中的應(yīng)用研究

發(fā)布時間:2020-10-20 16:34
   本實驗分離純化了火龍果果皮中的多糖,并對其具體結(jié)構(gòu)信息和生物活性進(jìn)行初步探究;為解決亞麻籽油易氧化敗壞并最大程度保護(hù)其生物活性的問題,選取了多糖中具有抗氧化、抗凝血和ACE酶抑制活性的酸性組分(PPP-3),將其結(jié)合甾醇和谷維素設(shè)計了一種新型能有效延緩亞麻籽油氧化敗壞且具有靶向緩釋作用的油脂粉末,并對其理化性質(zhì)和體外模擬消化過程進(jìn)行了研究。1.以火龍果果皮為原料,經(jīng)過水提醇沉、脫色素、脫蛋白、層析柱純化得到了三種火龍果果皮多糖(PPP-1、PPP-3、PPP-4)。利用紫外分光光度計(UV)、凝膠滲透色譜(GPC)、傅里葉紅外光譜(FT-IR)、甲基化分析(GC-MS)以及核磁分析對多糖結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步研究。結(jié)果表明三種多糖平均分子量分別為9.2kDa、552.0、936.9kDa,其單糖組成分別為 PPP-1:Man、Rha、GlcA、GaIA、Glc、Gal、Xyl,其摩爾比為 15.5:2.2:2.4:2.7:42.7:25.5:8.7,PPP-3:Man、Rha、GlcA、GalA、Gal、Xyl,其摩爾比為 20.4:21.9:3.3:48.8:2.2:3.1,PPP-4:Man、Rha、GlcA、GalA、Gal、Xyl,其摩爾比為13.1:13.8:2.4:66.3:1.6:2.5。結(jié)合各紅外、甲基化和核磁分析結(jié)果得出了 PPP-1、PPP-3和PPP-4的可能結(jié)構(gòu)。PPP-1可能是由→4)-Galp-(1→4)-Glcp-(1→4)-Manp-(1→4)-Glcp-(1→構(gòu)成主鏈的;而→4)-α-D-GalpA-(1 → 2)-α-L-Rhap-(1 →3,6)-α-L-Manp-(1→可能是多糖組分PPP-3的主鏈結(jié)構(gòu);多糖組分PPP-4的主鏈可能是由→2,4)-Rhap-(1→4)-GalpA-(1 →3,6)-Manp-(1→4)-GalpA-(1 →構(gòu)成。2.以總還原力、羥自由基以及DPPH的清除率為多糖抗氧化性評定的指標(biāo)。結(jié)果表明三種多糖都具有一定抗氧化的生物活性,且PPP-1的總還原力和DPPH清除率的活性要高于其它倆者。以活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)以及凝血酶原時間(PT)為指標(biāo)探究了三種多糖的體外抗凝血活性,結(jié)果表明PPP-1幾乎不具有抗凝血活性,而酸性糖組分PPP-3和PPP-4均表現(xiàn)出良好的抗凝血活性,分別能夠延長PT凝血時間72.88%和71.29%。用高效液相色譜法對三種多糖的ACE酶抑制活性進(jìn)行了測定,結(jié)果表明只有PPP-3在全濃度范圍內(nèi)表現(xiàn)出ACE酶的抑制活性,當(dāng)多糖濃度為1 mg/mL時最高抑制率可以達(dá)到48.2%。其它倆種多糖在濃度較低時則表現(xiàn)為ACE酶的促進(jìn)作用,只有高濃度時才表現(xiàn)為抑制作用。3.根據(jù)甾留醇和谷維素在亞麻籽油中的結(jié)晶行為選擇甾醇:谷維素為4:6的比例來改變亞麻籽油內(nèi)部結(jié)構(gòu),以乳清蛋白和提取的酸性火龍果果皮多糖(PPP-3)作為外殼,吐溫80做乳化劑,谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶做固化劑制得三種油脂粉末PE-0、PE-1和SE-1。對這三種油脂粉末進(jìn)行含水量、包埋率、流動性、分層系數(shù)、復(fù)溶后平均粒徑和Zeta電位、高溫保藏酸價以及過氧化值(POV值)的測定,結(jié)果表明經(jīng)甾醇和谷維素改變內(nèi)部結(jié)構(gòu)蛋白加火龍果果皮多糖(PPP-3)作為外殼的油脂粉末SE-1在各種理化性質(zhì)測定中性能均高于其余倆種,并且能有效延緩亞麻籽油在貯藏期間的氧化敗壞。對PE-0、PE-1和SE-1進(jìn)行了體外模擬消化實驗,經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)SE-1能夠有效抵抗模擬胃酸消化,并且在模擬腸道消化過程中也表現(xiàn)出一定的抗性,SE-1具有靶向緩釋的作用。
【學(xué)位單位】:浙江工商大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:TS209
【部分圖文】:

洗脫曲線,火龍果,粗多糖,果皮


2.4結(jié)果與討論??2.4.1紫外光譜分析??火龍果果皮粗多糖紫外光譜掃描檢測結(jié)果如圖2-2所示。在波長為260?nm??和280?rnn處沒有明顯的吸收峰,說明已除盡核酸和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)[68]。??0-2?1??吸?i??光??庠?1??0.1?I?,??\??>?\??〇r〇?■?W。ā??—????????????????200,0?250,0?500.0?350.0?400.0?nm??波長??圖2-2火龍果果皮粗多糖紫外光譜圖??Figui*e?2-2?UV?spectra?of?pitaya?peel?crude?polysaccharides??2.4.2多糖的分離純化??將火龍果果皮粗多糖先用DEAE-Celkilose?52柱分離,依次用純水、0.1、0.2、??和0.3?mol/LNaC丨溶液洗脫,用苯酚-硫酸法跟蹤檢測,測得的洗脫曲線如圖??17??

標(biāo)準(zhǔn)曲線,粗多糖,洗脫,火龍果


?1??濃度(mg/mL)??圖24葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線??Figure?2-4?Standard?curve?of?determination?of?glucose??由圖2-4可得線性回歸方程y=0.641x+0.1219,R:=0.9951。根據(jù)相同的方法??對lmg/mL的粗多糖溶液進(jìn)行吸光度測定,得到表2-3,根據(jù)表可知火龍果果皮??粗多糖中的總糖含量為82.85%±2.63%。??18??

標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)曲線,葡萄糖,總糖含量


所以不再收集和進(jìn)行進(jìn)一步的研宄。??150.4??一??10?,PPP-1?PPP-3?廠?? ̄?nfiMjamAngfluai?〇.2—??i5?tl?,?「l?r'PPP'i??Q?iiLai??m^niill?irviiiffr/?Ttii.riiia-jiiiMiNiwiirifHi?fflnffir......niimr?1?ii?〇??管數(shù)??圖2-3粗多糖在DEAE-Cellulose52柱的洗脫??Figure?2-3?Elution?crude?polysaccharides?on?DEAE-cellulose?52?column??2.4.3粗糖中總糖含量的測定??,M??本實驗采用苯酚-硫酸法對總糖含量進(jìn)行測定,測得標(biāo)準(zhǔn)曲線如下圖所示:??08
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本文編號:2848904

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