釀酒酵母菌在葡萄酒的生產(chǎn)過程中扮演著重要角色,我國葡萄酒產(chǎn)業(yè)正蓬勃發(fā)展,亟待培育出優(yōu)良的釀酒菌株來釀造具有我國地域特色、具有獨特風(fēng)味的葡萄酒。木研究從山東、河北、天津、新疆以及內(nèi)蒙古等地區(qū)的部分釀酒葡萄種植基地采集樣品,從中分離純化得到97株酵母菌株。對97株酵母菌進(jìn)行生長速率、耐受性和生長特性的篩選、鑒定以及用優(yōu)良菌株與商業(yè)酵母對照進(jìn)行小罐釀酒試驗。1.酵母菌株分離純化 將采集的葡萄果樣、發(fā)酵醪液、葡萄園土壤、皮渣等樣品分別梯度稀釋至10-5～10-7,涂布于孟加拉紅培養(yǎng)基上培養(yǎng),在YEPD固體培養(yǎng)基上反復(fù)劃線培養(yǎng),純化三代以上后分別命名,4℃保藏。2.菌株的篩選 分離出的97株酵母菌進(jìn)行發(fā)酵力、耐受性、產(chǎn)酯能力、產(chǎn)酒精能力、產(chǎn)硫化氫特性的篩選,最終篩選出5株優(yōu)良釀酒酵母菌株KX3、KT3、ST3、XG 1.5和GT112。五株酵母菌均能在12h內(nèi)開始發(fā)酵;均能耐受16%的高濃度乙醇;均能耐受400 mg/L以上SO2濃度;菌株ST3、XG1.5和GT112能耐受60%的高糖濃度,菌株KX3和KT3能耐受50%的高糖濃度;菌株ST3、XG1.5和GT112低pH耐受性為2,菌株KX3和KT3對低pH的耐受性為2.5;菌株GT112能耐受42℃高溫,KX3、KT3、ST3和XG1.5能耐受38℃高溫。五株優(yōu)良菌株的均為高產(chǎn)酒精和高產(chǎn)酯酵母,其中菌株KX3、XG1.5和GT112為低產(chǎn)硫化氫酵母,菌株ST3和KT3為中產(chǎn)硫化氫酵母。3.菌株的鑒定 用26S rDNA基因序列測序分析,在NCBI網(wǎng)站對測序結(jié)果進(jìn)行相似性分析,并構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹,結(jié)果證實5株酵母菌株均為釀酒酵母。4.小罐釀酒試驗 5株優(yōu)良酵母菌株與商業(yè)酵母CECA和CSM作對照,用玫瑰香葡萄汁于室溫發(fā)酵9天后結(jié)束發(fā)酵。菌株KX3的發(fā)酵速度最快、發(fā)酵最徹底,發(fā)酵液殘?zhí)橇繛?.9 g/L,酒精度為12.8%vol,總酸含量為6.9 g/L,感官評價得分89分。綜合表現(xiàn)與國產(chǎn)商業(yè)酵母CECA不相上下,優(yōu)于法國商業(yè)酵母CSM,可用于工業(yè)生產(chǎn)葡萄酒。
【學(xué)位單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：TS262.6
【部分圖文】：

電子天平?ＴＰ－２１４?丹佛儀器北京有限公司??恒溫震蕩培養(yǎng)箱?ＴＨＺ－９８ＡＢ?上海一恒科學(xué)儀器有限公司??可調(diào)式封閉電爐?ＦＬ－２?天津市泰斯特儀器有限公司??生化培養(yǎng)箱?ＬＲ１Ｉ－７０?上海一恒科學(xué)儀器有限公司??光學(xué)顯微鏡?ＣＸ２１?上海一恒科學(xué)儀器有限公司??立式壓力蒸汽滅歯鍋?ＳＸ－７００?北京世貿(mào)遠(yuǎn)東科學(xué)儀器有限公司??超凈工作臺?ＶＤ－１３２０?哈爾濱東聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司??酸度計?ＰＨＳ－３Ｃ?丹佛儀器北京有限公司??移液器?１００－１０００ＩＩ?Ｌ?丹佛儀器北京有限公司??電熱恒溫水浴鍋?ＨＷＳ１２?ｈ海一恒科學(xué)儀器有限公司??商速離心機?ＨＣ－２５１８Ｒ?上海玉溥生物科技有限公司???３試驗方法??３．?１試驗技術(shù)路線圖??

圖２發(fā)酵工藝流程圖??Ｆｉｇｕｒｅ．２?Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｆｌｏｗ?ｃｈａｒｔ??培養(yǎng)至對數(shù)生長期的優(yōu)良菌株接種到ｙｐｄ液體培養(yǎng)基中，在ｉｏ°ｃ的培０００?ｒ／ｍｉｎ條件下離心３?ｍｉｎ，收集菌泥備用［６４］。試驗處于冬季，市面上沒有，因此選用種植于內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)職業(yè)技術(shù)學(xué)院的于－８０°Ｃ冰箱凍存的玫行發(fā)酵試驗（葡萄汁理化指標(biāo)為：２３．０?Ｂｒｉｘ。，還原糖１５４．０７?ｇ?／Ｌ，總０．２ｇ／Ｌ，ｐＨ３．１４）。葡萄汁中按２％的接種量接入優(yōu)良酵母菌株，同時用母ＣＳＭ和國產(chǎn)商業(yè)酵母ＣＥＣＡ作對照。在２５°Ｃ下恒溫發(fā)酵。每２４?ｈ、總酸和酒精度（發(fā)酵期間取樣均在無菌超凈臺進(jìn)行），當(dāng)殘?zhí)呛肯乱韵聲r視為發(fā)酵結(jié)束，最后進(jìn)行感官評定［６５＾６］。??精度采用蒸餾法測定；殘?zhí)橇坎捎渺沉衷噭┑味ǚy定；總酸采用酸堿中測定［６９］。??．?２試驗菌株釀制葡萄酒的感官評定??

圖４酵母菌株ＰＣＲ擴(kuò)增電泳圖??Ｆｉｇｕｒｅ．４?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｅｄ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ?ｏｆ?ｙｅａｓｔ?ｓｔｒａｉｎｓ??如圖４所示，通過對酵母菌株ＤＮＡ的提取和ＰＣＲ擴(kuò)增，可以看出５株酵母菌??
【參考文獻(xiàn)】

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1 岑濤;岳田利;袁亞宏;丁旭;王虎玄;宋靚;;云南芒果中酵母菌分離鑒定及在芒果酒發(fā)酵中的應(yīng)用[J];食品科學(xué);2015年11期

2 張會娟;張首玉;邱聰;譚曉榮;惠明;;一株產(chǎn)酯酵母的鑒定及發(fā)酵性能研究[J];河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2015年02期

3 于洋;粟春燕;陳晶瑜;;3株葡萄酒非釀酒酵母的生長與發(fā)酵特性[J];食品科學(xué);2015年19期

4 王曉娥;陳長武;;東北山葡萄酵母菌基因組DNA提取方法的比較研究[J];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2014年06期

5 賴穎;郭婕;郭靜娜;;濃香型白酒生產(chǎn)中耐酒精酵母菌的選育研究[J];釀酒科技;2015年01期

6 劉美玲;劉延琳;;釀酒酵母單倍體的分離及其產(chǎn)硫化氫特性[J];食品科學(xué);2013年21期

7 李宏;劉銳萍;張克義;;葡萄酒感官品評技術(shù)要求及品評方法研究[J];釀酒科技;2013年05期

8 蒲春;胡沂淮;賈亞偉;嚴(yán)啟梅;;產(chǎn)酯酵母的篩選及其發(fā)酵特性研究[J];釀酒科技;2013年03期

9 王瑞艷;馬曉云;高小波;劉行知;李景明;;葡萄酒抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性的研究[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2012年06期

10 李濤;劉亮偉;;產(chǎn)地葡萄酒發(fā)酵菌種選育及工藝優(yōu)化研究[J];食品工業(yè);2012年04期

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1 王曉宇;葡萄酒抗氧化活性及其檢測方法的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2008年

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1 忻勝兵;優(yōu)質(zhì)特性釀酒酵母的選育及直投式發(fā)酵菌劑研發(fā)[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

2 李語甜;21種進(jìn)口葡萄酒用活性干酵母的鑒定及發(fā)酵特性研究[D];河北科技師范學(xué)院;2015年

3 萬海霞;呼和浩特地區(qū)葡萄源酵母菌優(yōu)良株的篩選及發(fā)酵特性研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

4 陸振群;產(chǎn)酯類酵母菌的選育[D];安徽工程大學(xué);2012年

5 程雷;葡萄自然發(fā)酵過程中酵母的分離鑒定及優(yōu)良葡萄酒酵母篩選[D];東北林業(yè)大學(xué);2010年

6 薛軍俠;釀酒酵母的篩選鑒定及耐受性初步研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2007年

7 蘇暢;葡萄酒活性干酵母的研究[D];天津科技大學(xué);2004年

本文編號：2835515