發(fā)布時(shí)間：2020-08-24 23:36

【摘要】：高白鮭魚(Coregonus peled)是一種高耗氧冷水性鮭魚,在我國(guó)新疆賽里木湖區(qū)域進(jìn)行大規(guī)模養(yǎng)殖,并已達(dá)到工廠化加工規(guī)模。高白鮭魚肉營(yíng)養(yǎng)豐富,具有較高的食用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值,以冰鮮產(chǎn)品運(yùn)輸至北京、上海等高消費(fèi)區(qū)域。然而,水產(chǎn)品在運(yùn)輸及冷藏過程中,因其水分含量高,pH值偏中性等特點(diǎn),導(dǎo)致微生物尤其是優(yōu)勢(shì)腐敗菌繁殖代謝,產(chǎn)品極易發(fā)生腐敗變質(zhì)。本論文以冷藏高白鮭魚魚肉為研究對(duì)象,鑒定其在貯藏過程中的優(yōu)勢(shì)腐敗菌,探明腐敗菌菌間抑制或促進(jìn)生長(zhǎng)的交互作用,為后期開發(fā)其他微生物間拮抗抑菌保鮮劑奠定基礎(chǔ),具體研究?jī)?nèi)容如下:(1)冷藏高白鮭魚肉生化指標(biāo)的測(cè)定:冷藏高白鮭魚肉為研究對(duì)象,測(cè)定魚肉中菌落總數(shù)及TVBN值變化,利用高通量測(cè)序方法,分析產(chǎn)品貯藏過程中的菌相變化情況及優(yōu)勢(shì)腐敗菌。結(jié)果表明,冷藏高白鮭魚肉在貯藏過程中,隨時(shí)間的延長(zhǎng),菌落總數(shù)由4.38lgCFU/g增加至8.30 lgCFU/g,TVBN值含量由20.61 mg/100g增加至48.05 mg/100g。通過分析高通量測(cè)序結(jié)果,冷藏高白鮭魚肉中菌相豐富度較高,優(yōu)勢(shì)腐敗菌主要為假單胞菌屬(Pseudomonas sp.)和氣單胞菌屬(Aeromonas sp.)細(xì)菌。(2)高白鮭魚肉中拮抗菌的初步篩選:利用傳統(tǒng)分離鑒定法分析高白鮭魚肉貯藏過程中的腐敗菌種類及其優(yōu)勢(shì)腐敗菌;再利用交叉劃線法對(duì)分離鑒定出的菌株進(jìn)行初步篩選獲得具有抑菌效果的腐敗菌和被抑制生長(zhǎng)的腐敗菌。結(jié)果表明在貯藏過程中共分離鑒定出104株腐敗菌,最后通過交叉劃線法篩選出24株抑制菌及19株被抑制菌。(3)冷藏高白鮭魚肉主要腐敗菌的交互作用分析:通過固體法和液體法探明菌株之間的抑制效果或促生長(zhǎng)效果,利用Cytoscape軟件作圖表明腐敗菌之間的交互作用。結(jié)果表明,液體培養(yǎng)基條件下抑制菌對(duì)被抑制菌的抑制效果比固體培養(yǎng)基條件下更顯著,且Cytoscape圖直觀顯示出冷藏高白鮭魚肉腐敗菌之間具有復(fù)雜的交互作用;假單胞菌屬B19和B23對(duì)液體培養(yǎng)基中被抑制菌的抑制效果最強(qiáng)且抑制譜較寬,且假單胞菌B23在固體培養(yǎng)基中也有較強(qiáng)的抑菌效果;不動(dòng)桿菌(Acinetobacter sp.)A29、溫和氣單胞菌(Aeromonas sp.)B20、沙雷氏菌(Serratia sp.)D6、假單胞菌E6和假單胞菌E12對(duì)被抑制菌具有促生長(zhǎng)作用。19株被抑制菌的生長(zhǎng)均可被抑制菌不同程度的抑制,但只有5株被抑制菌的生長(zhǎng)被促進(jìn),相比于促進(jìn)效果腐敗菌之間的交互作用更偏向于抑制反應(yīng)。(4)假單胞菌B23對(duì)食源性致病菌生長(zhǎng)繁殖的影響:以假單胞菌B23為腐敗菌代表菌株,分析其與食源性致病菌生長(zhǎng)繁殖間的交互作用。結(jié)果表明,假單胞菌B23上清液能夠抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌如金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)ATCC6538和單增李斯特菌(Listeria monocytogenes)ATCC19111的生長(zhǎng)繁殖。同時(shí),pH 4.0-10.0和0-40oC范圍內(nèi),假單胞菌B23上清液對(duì)金黃色葡萄球菌均具有穩(wěn)定的抑菌活性。此外,假單胞菌B23上清液能有效抑制金黃色葡萄球菌生物膜的形成。
【學(xué)位授予單位】：大連海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：TS254.1
【圖文】：

Figure 2-2 Changes in Coregonus peled TVB-N value of spoilage bacterial2.5.3 冷藏高白鮭魚肉貯藏過程高通量測(cè)序檢測(cè)結(jié)果圖2-3 各樣品稀釋曲線（A）和Shannon-Indexs曲線（B）分析Figure 2-3 The dilution of curve (A) and Shannon-Indexs curve（B）如圖 2-3A 所示，隨著測(cè)序量的增加，樣品稀釋性曲線逐漸進(jìn)入飽和期，說明測(cè)序量合理充分，且深度已基本覆蓋所有物種信息。同時(shí)，Shannon-indexs 曲線也趨于平緩(圖2-3B)，說明測(cè)序數(shù)據(jù)可反映樣本中微生物菌群多樣性組成，更多數(shù)據(jù)量對(duì)發(fā)現(xiàn)新的 OTUs貢獻(xiàn)較少。0 4 8 12102030405060mVBN(Tg/10)g貯貯貯貯(Days)

b 為相應(yīng)的被抑制菌或抑制菌。長(zhǎng)抑制網(wǎng)絡(luò)圖中，單個(gè)抑制節(jié)點(diǎn)的大小等于BN和CN的總和。抑制菌節(jié)點(diǎn)和CN 的直徑，菱形越小，就更好的抑制。對(duì)于既是被抑制菌又是抑制菌尺寸分別計(jì)算為被抑制菌和抑制菌，然后將最終尺寸表示為這兩個(gè)值的平與討論法測(cè)定菌間交互作用標(biāo)準(zhǔn)程度按照抑菌圈大小分為5個(gè)等級(jí)：直徑D≥2mm為+++++，1.5＜D≤2mm為mm 為+++，0.5＜D≤1mm 為++，0＜D≤0.5mm 為+[92]。并記錄抑菌圈的邊 4-1。= 1ib

圖 4-2 液體法生長(zhǎng)抑制與促進(jìn)效果Figure 4-2 CFS assay inhibition and promotion effect4.6.3 冷藏高白鮭魚肉腐敗菌交互作用結(jié)果分析4.6.3.1 冷藏高白鮭魚肉腐敗菌中的抑制效果分析表 4-1 生長(zhǎng)抑制活動(dòng)Table 4-1Growth inhibition of activity點(diǎn)滴法 液體法抑制反應(yīng)水平 數(shù)量 % 數(shù)量 %+++++ 4 0.9 — —++++ 4 0.9 — —

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本文編號(hào)：2802981