【摘要】：食物被認為是人體的能量來源。動物或植物來源的食物均含有一定量的對人體有益的生物活性物質(zhì)�；加醒芗膊〉娜藢χ参飦碓吹囊恍┗钚噪漠a(chǎn)生的反應與對動物來源活性肽產(chǎn)生的反應相同。這些活性肽可以通過應用不同的技術(shù)從食物中獲得,如通過開發(fā)水解酶,微生物酶或蛋白酶。最近,科學家們正試圖利用食物中的生物活性肽來消除或減少高血壓等心血管疾病給人體帶來的負擔。已經(jīng)證明活性肽能夠緩解高血壓和抑制ACE,因為ACE被認為是高血壓和其他心血管疾病的主要致病因子。這項研究的主要目的是,通過優(yōu)化發(fā)酵時間對發(fā)酵水牛奶和發(fā)酵羊奶產(chǎn)品進行體外和體內(nèi)評估,并在在血清蛋白水平的基礎(chǔ)上評估新的ACE抑制肽。由于山羊和水牛奶的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)組成和在世界上的廣泛分布,因此被設計為本研究的對象。在山羊奶和水牛奶脫脂和凍干后,乳蛋白作為更深入研究對象。在通過進行血液化學測試評估水牛的健康狀況后,基于血清蛋白水平選擇四只奶牛幼奶牛(22,26,30和34個月)用于進一步分析,并用它們所產(chǎn)奶進行LC發(fā)酵。對于山羊奶,乳蛋白通過優(yōu)化孵育時間至8,16,24和36小時與LH進行發(fā)酵。1-D-22作為水牛組的空白對照,比較ACE抑制趨勢,而S-8則用作山羊組的空白對照。將水牛脫脂乳與LC共培養(yǎng)24小時后,通過使用截留分子量10000 Da(PM-10)的超濾膜純化樣品肽。2-通過應用nin-hydrin反應和SDS-PAGE確定蛋白質(zhì)水解情況。ACE抑制試驗的結(jié)果表明34個月大的動物乳汁(D-34)在體外具有出更高的ACE抑制活性。另一方面,通過使用分子量截留量10000Da(PM-10)的超濾膜和ultracel 3K膜從發(fā)酵樣品中純化得到ACE抑制肽。通過nin-hydrin反應和 SDS-PAGE,3-發(fā)現(xiàn)孵育時間24小時的樣品與其他樣品相比水解效果最好。ACE抑制試驗進一步驗證了 S-24在體外抑制ACE的真實性。4-此外,Q exactive Hybrid Quadrapole-Orbitra質(zhì)譜用于確定兩組動物中ACE抑制肽的分子結(jié)構(gòu)和氨基酸序列。肽鏈序列通過MaxQuant數(shù)據(jù)庫的鑒定。最后,5-在D-34中鑒定出具有更高濃度的脯氨酸,賴氨酸和芳香族氨基酸的肽。高濃度的疏水脂肪族氨基酸PIN-94和PIN-332的存在表明D-34在發(fā)酵的水牛乳蛋白樣品中作為ACE抑制劑是有效的。而對于S-24,含有功能性氨 基 酸 結(jié) 構(gòu) 的 VLPVPQKAVPQ,VLPVPQKVVPQ 和TQTPVVVPPFLQPEIMGVPKVKE中的三種肽基于強度,大小和較高濃度的疏水性氨基酸被認為具有最高的ACE抑制活性。6-在SHR中進行體內(nèi)分析,以應用遙測方法檢查那些豐富肽的作用。對于D-34,在12-14小時后記錄到收縮壓降低,14-16小時后的記錄到舒張壓降低。對于S-24,在10-12和8-10小時后在分別觀察到收縮壓和舒張壓降低。根據(jù)觀察結(jié)果確定,具有功能性氨基酸的小肽可用作功能性食品的一部分以抑制ACE,并可用作降低血壓的藥物。這樣,發(fā)酵乳蛋白可以作為具有健康促進作用的高血壓患者的營養(yǎng)保健品。以這種實惠價格生產(chǎn)出的功能性食品,可以為高血壓和心血管患者的生活帶來更好的變化。
【學位授予單位】：北京林業(yè)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：TS201.4

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本文編號：2785146