【摘要】：作為水產(chǎn)品養(yǎng)殖加工及消費大國,我國水產(chǎn)品安全急需重視,禁止或限制用于水產(chǎn)品中的漁藥均對人體危害較大。氯霉素(CAP)作為禁用漁藥,對人體造血系統(tǒng)具有一定程度危害。需建立一種靈敏、準確且快速的檢測方法對水產(chǎn)品安全具有重要應用價值,銪摻雜聚苯乙烯熒光微球熒光性能優(yōu)異,毒性較低,具有較熱的研究趨勢。本文以乳液聚合法制備羧基化聚苯乙烯微球(PS),采用低溫溶脹方式將銪熒光素摻雜入羧基化聚苯乙烯微球,通過對紅外光譜、掃描電子顯微鏡、透射電鏡、不同條件下的熒光性能、水溶液懸浮分散性及表面羧基含量表征。結果表明,所制備銪摻雜羧基化聚苯乙烯熒光微球(EuPS)直徑約為100 nm,呈均勻球形,表面成功帶有羧基,羧基含量為37.5 nmol/mg,在pH=4.0-9.0,低鹽離子濃度條件下,熒光特性及懸浮分散性較好。以制備的羧基化聚苯乙烯熒光微球為載體,通過與氯霉素抗體的氨基催化偶聯(lián)形成偶聯(lián)物,使用粒徑測定、熒光分析等對偶聯(lián)結果表征,證明了抗體偶聯(lián)成功。制備氯霉素熒光免疫層析試紙條,實驗得到抗體偶聯(lián)的最佳條件為偶聯(lián)時間為3 h,最佳偶聯(lián)比例為1.0mg微球:50μg抗體;CN 140及Millipore 135熒光較為明顯,選取CN 140為本實驗所用NC膜,CF-50硝酸纖維素膜為本實驗所用樣本墊;當C/T線濃度達到1.0 mg/mL,微球抗體偶聯(lián)物添加量為6.0μL,PBST+Tris-HCl為釋放液,37℃孵育20 min時,試紙條C/T線呈現(xiàn)較好的熒光特性。以最優(yōu)呈色條件,測定氯霉素的靈敏度、特異性,加樣后15 min測定結果,得到氯霉素的檢出限為100 ng/mL,與洛美沙星、諾氟沙星、氟羅沙星、加替沙星、左氧氟沙星無交叉反應。通過對鰻魚樣品實際檢測,結果中實際樣品的檢出限為600 ng/g,9周的存放時間內,檢出限無較大影響,滿足快速檢測的需求。
【學位授予單位】：渤海大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：O658.1;TS254.7

【參考文獻】

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