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紅菊苣中花青素的提取純化及生物活性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-29 23:42
【摘要】:紅菊苣產(chǎn)量大,易管理,作為蔬菜因其味苦不宜大量消耗,以紅菊苣為原料提取花青素,可更加高效地利用紅菊苣資源。本文對(duì)紅菊苣中花青素的提取、純化、成分分析、穩(wěn)定性及生物活性進(jìn)行了研究,結(jié)論如下:(1)利用pH示差法對(duì)紅菊苣中花青素進(jìn)行定量,并對(duì)定量條件進(jìn)行優(yōu)化。該花青素的最大吸收波長(zhǎng)為520nm,提取液為含0.1%鹽酸的酸性乙醇,緩沖液pH值分別為1.0和4.5,反應(yīng)溫度應(yīng)保持在35℃左右,反應(yīng)平衡時(shí)間為30min;平均加標(biāo)回收率為100.32%,RSD為1.07%。該方法能消除溶液中雜質(zhì)對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響,可用于紅菊苣花青素的定量分析。(2)利用超聲波輔助有機(jī)溶劑法提取紅菊苣中花青素,優(yōu)化所得到的最優(yōu)提取條件為:液固比41:1(mL:g)、乙醇體積分?jǐn)?shù)71%、超聲提取時(shí)間28min。在此條件下,花青素的提取量達(dá)到908.596mg/100g,與二次響應(yīng)面回歸模型中預(yù)測(cè)值910.426mg/100g相差不大,因此該模型可用于實(shí)際預(yù)測(cè)。(3)確定AB-8型大孔樹(shù)脂的最佳純化工藝條件:吸附時(shí)間為2.5h,上樣液pH值為2.0,濃度為342.33mg/L,流速為2mL/min,體積為260mL;解吸時(shí)間為1.5h,解吸液為60%乙醇,流速為2mL/min,體積為100mL。經(jīng)此條件純化后,紅菊苣花青素的色價(jià)由5.2提高到48.9,是未純化的9.4倍。采用高效液相色譜法分析紅菊苣花青素的成分,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:紅菊苣花青素含有6種成分,其中矢車菊-3-O-葡萄糖苷含量最多,為646.247mg/100g。(4)探究各種因素對(duì)紅菊苣花青素穩(wěn)定性的影響,結(jié)果表明:紅菊苣花青素在強(qiáng)酸條件下較穩(wěn)定,但對(duì)光照和高溫比較敏感,H_2O_2可顯著降低其穩(wěn)定性,亞硫酸鈉對(duì)其具有漂白作用,Vc對(duì)其穩(wěn)定性具有雙重影響,苯甲酸鈉、山梨酸鉀對(duì)其穩(wěn)定性影響不明顯,蔗糖對(duì)其有一定的護(hù)色作用,Cu~(2+)、Fe~(3+)、Al~(3+)均可降低紅菊苣花青素的穩(wěn)定性,Na~+、Mg~(2+)、Zn~(2+)、Ca~(2+)對(duì)其穩(wěn)定性影響不大,K~+則可增加其穩(wěn)定性。因此,紅菊苣花青素應(yīng)在避光、低溫、強(qiáng)酸性條件下保存,避免接觸H_2O_2、亞硫酸鈉和Cu~(2+)、Fe~(3+)、Al~(3+)等金屬離子。(5)本實(shí)驗(yàn)對(duì)紅菊苣花青素生物活性性能進(jìn)行了全面分析?寡趸詫(shí)驗(yàn)表明:紅菊苣花青素在清除DPPH自由基、Fe~(3+)還原能力上均表現(xiàn)出較強(qiáng)活性;抗菌性實(shí)驗(yàn)表明:紅菊苣花青素對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌均具有抑制性,對(duì)大腸桿菌的抑制程度最強(qiáng);紅菊苣花青素可有效地清除亞硝酸鈉,最大清除率可達(dá)到70.01%,其對(duì)亞硝胺合成具有明顯的阻斷作用,最大阻斷率可達(dá)到85.37%。
【學(xué)位授予單位】:西安工程大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:TS264.4
【圖文】:

花青素,基本結(jié)構(gòu)


是 H 或者糖基,R1、R2是 H、OH 或糖基,R3是 OH 或糖基圖 1-1 花青素的基本結(jié)構(gòu)取純化方法方法前提是要提取花青素,現(xiàn)階段關(guān)于花青素提取的工輔助溶劑提取法和熱溶劑直接提取法的提取工藝,的熱效應(yīng);第二種是包括高壓脈沖電場(chǎng)輔助溶劑提溶劑提取法的提取工藝,其特點(diǎn)是工藝過(guò)程不伴隨取法 在天然色素提取法中,我們通常選用的是取溶劑對(duì)于該方法是至關(guān)重要的。一般來(lái)說(shuō),該方度地溶解提取物的同時(shí),還要滿足對(duì)其他物質(zhì)不能會(huì)被糖類通過(guò)糖苷化過(guò)程轉(zhuǎn)變?yōu)榛ㄉ眨哂泻軓?qiáng)花青素可選用水,或者選用具備親水(脂)性的乙

吸收光譜曲線,花青素,提取液


(6)反應(yīng)平衡時(shí)間的確定 根據(jù)花青素定量分析方法,將加入緩沖液的待測(cè)液在水浴條件下分別平衡 10 min、20 min、30 min、40 min、50 min、60min。.5 紅菊苣花青素的回收實(shí)驗(yàn)取 2 份紅菊苣花青素提取液,其中一份花青素提取液利用 pH 示差法直接測(cè)其含另一份花青素提取液中加入已知量的 Cy-3-Glu,利用 pH 示差法測(cè)定其含量,與標(biāo)樣提取液含量進(jìn)行比較,回收率計(jì)算見(jiàn)式(2-3):p = 2 1 3× 100% 公式(2-3)式中:p--回收率;C1--試樣測(cè)定量;C2--加標(biāo)樣測(cè)定量;C3--加標(biāo)量。3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論.1 最大吸收波長(zhǎng)的確定

菊苣,工藝研究,提取量,液固比


液固比和乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)花青素提取量的影響

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