【摘要】：香菇是世界上十分重要的一種食用菌資源,我國是世界上最大的香菇生產(chǎn)和出口的國家。香菇中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、膳食纖維、維生素以及人體所需的其他營養(yǎng)物質(zhì),并具有重要的保健作用。香菇柄占香菇重量的30%,由于香菇柄中含有大量的膳食纖維導(dǎo)致了香菇的口感粗糙并難以咀嚼,以及在加工過程中會影響香菇制品的質(zhì)量,每年都會有大量的香菇柄被當(dāng)做廢棄物處理掉。所以,為了更加充分的利用香菇資源,對香菇柄中的多肽進(jìn)行研究,開發(fā)出更多的香菇產(chǎn)品具有重要的意義,一方面,可以滿足大眾對營養(yǎng)又健康食品的需求,另一方面,也提高了對香菇的利用率和經(jīng)濟(jì)效益。本文以香菇柄為實(shí)驗(yàn)原料,對香菇柄中的蛋白質(zhì)進(jìn)行提取、酶解,制備出香菇柄多肽,以及從中分離純化得到不同分子質(zhì)量的多肽,最后將分離純化的多肽組分進(jìn)行抗氧化和抗菌活性研究。主要的研究結(jié)論如下:1.選擇超聲波法對香菇柄中的蛋白質(zhì)進(jìn)行提取,研究不同條件下超聲波提取對蛋白提取率的影響。依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得到最佳工藝條件為:超聲提取的功率100W,溫度50℃,pH9.0,料液比1:25,提取時(shí)間1.5h,提取2次,最終測得提取率達(dá)到17.8%。2.從5種蛋白酶中篩選出中性蛋白酶,作為香菇柄蛋白提取的最佳酶進(jìn)行酶解實(shí)驗(yàn),以香菇柄多肽的得率為評價(jià)指標(biāo),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,酶解最佳條件:pH6.0,溫度55℃,酶用量為4000U/g,時(shí)間為3h,測得多肽得率達(dá)到19.98%。3.用超濾膜分離香菇柄多肽,獲得香菇柄多肽的四個(gè)組分,分別是組分Ⅰ(10KDa)、組分Ⅱ(5kDa-10KDa)、組分Ⅲ(1KDa-5kDa)和組分Ⅳ(1KDa)。4.利用香菇柄多肽四個(gè)不同組分對·OH自由基、DPPH自由基的清除力及還原力進(jìn)行測定,結(jié)果表明香菇柄多肽四個(gè)組分都有較強(qiáng)的自由基清除作用,說明其屬于抗氧化活性肽。但不同分子量肽的抗氧化能力不同,其抗氧化活性與分子量有關(guān)。其中分子量小于1KDa和5kDa-10KDa之間的多肽抗氧化活性更強(qiáng)。5.香菇柄多肽四個(gè)組分抗菌能力測定,結(jié)果表明香菇多肽四個(gè)組分對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌及沙門氏菌4種細(xì)菌都具有抑菌作用,抑制作用最強(qiáng)的是對沙門氏菌,其次是對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌,而抑制作用最弱的是對枯草芽孢桿菌。對青霉菌和黃曲霉無抑制作用。
【學(xué)位授予單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：TS201.2
【圖文】：

L934），見下表 2-1。表 2-1 香菇柄蛋白提取率正交試驗(yàn)因素水平表ab.2-1 Lentinus edodes stalk protein extraction rate screening test factor le平 提取時(shí)間 pH 料液比 提取次數(shù)1 0.5 7.0 1:20 12 1.0 8.0 1:25 23 1.5 9.0 1:30 3分析到標(biāo)準(zhǔn)曲線1 可得到回歸方程:OD595nm=2.9155x+0.0047（R2=0.998）。由此 0.998，線性良好，曲線可以作為蛋白質(zhì)測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

圖 2-2 不同提取方法對香菇柄蛋白提取率的影響g.2-2 Effects of extraction method on extraction rate of lentinus edodes sta2 可以看出，將香菇柄利用傳統(tǒng)的熱回流提取法提取，其提取率波法提取，蛋白質(zhì)的提取率則可提高到 10.53％。超聲波法利用間內(nèi)使香菇細(xì)胞破壁，使蛋白質(zhì)更好的提取出來，蛋白質(zhì)的提提高達(dá) 50％以上，而且超聲波提取比傳統(tǒng)的方法操作簡單，提大程度的節(jié)約了生產(chǎn)成本。提取香菇柄蛋白的單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果香菇柄蛋白提取率的影響3 所示，香菇柄蛋白的提取率受 pH 影響很大，開始時(shí)隨著 pH 升高，當(dāng) pH=9.0 時(shí)，香菇柄蛋白的提取率達(dá)到最高值，而當(dāng) 呈下降趨勢。這是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)在堿性溶液中易發(fā)生酸式水解，

圖 2-3 pH 對香菇柄蛋白提取率的影響Fig.2-3 Effect of pH on extraction rate of lentinus edodes stalk protein時(shí)間對香菇柄蛋白提取率的影響4 所示，利用超聲波提取香菇柄蛋白時(shí)，其提取率受超聲提時(shí)間的推移，蛋白的提取率持續(xù)增高，在 0.5～1h 內(nèi)香菇蛋白提提取時(shí)間到 1.5h 后，提取率增加的幅度變小。原因是超聲波提完全破壁，蛋白質(zhì)溶出率較高，隨著時(shí)間的延長，溶解度達(dá)溶出逐漸減少，提取率增加的幅度逐漸降低。為了防止時(shí)間過慮到成本問題，本實(shí)驗(yàn)以提取時(shí)間為 1.5h 作為香菇蛋白提取最

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本文編號：2747594