【摘要】：采用超聲協(xié)同微波輔助堿法提取玉米麩皮不溶性阿拉伯木聚糖(WUAX),以單因素和響應面試驗為基礎確定最佳提取條件。通過纖維素DEAE-52和Sephadex G-100凝膠柱分離純化粗WUAX。純化組分的結(jié)構(gòu)及表征通過高效液相色譜,高效凝膠滲透色譜,傅里葉紅外光譜、掃描電鏡、以及核磁光譜等方法進行分析比較。比較研究AX-1-1,AX-2-1和AX-3-1對通過脂多糖(LPS)誘導RAW 264.7巨噬細胞產(chǎn)生炎癥的抗炎活性,其研究結(jié)果如下所述:1、玉米麩皮WUAX超聲協(xié)同微波輔助堿法的工藝優(yōu)化及分離純化超聲協(xié)同微波輔助堿法提取玉米麩皮WUAX�；趩我蛩睾晚憫嬖囼�,優(yōu)化了超聲功率、NaOH濃度、液料比和超聲微波協(xié)同時間四個因素。試驗數(shù)據(jù)顯示:超聲功率500 W,NaOH濃度0.30 mol/L,液料比30 mL/g,超聲微波協(xié)同時間25 min,WUAX的最大得率為27.78±0.17%。WUAX經(jīng)過纖維素DEAE-52柱的初步純化,得到一個水洗脫阿拉伯木聚糖峰(AX-3),兩種鹽洗脫阿拉伯木聚糖峰(AX-1和AX-2)。以蒸餾水為洗脫液,AX-1,AX-2和AX-3經(jīng)Sephadex G-100柱進一步分別純化,收集得到高純度組分AX-1-1,AX-2-1和AX-3-1,用于結(jié)構(gòu)鑒定和抗炎活性的評價。2、玉米麩皮AX-1-1、AX-2-1和AX-3-1的結(jié)構(gòu)及表征傅里葉紅外光譜顯示,AX-1-1、AX-2-1和AX-3-1具有典型的阿拉伯木聚糖特征吸收峰;掃描電鏡結(jié)果顯示三種主要洗脫組分主要以聚集態(tài)存在,呈薄片狀,且表面光滑;高效凝膠滲透色譜分析顯示AX-1-1、AX-2-1和AX-3-1都是一種同質(zhì)化多糖,其分子量分別為287,305和280 KDa;高效液相色譜表明AX-1-1、AX-2-1和AX-3-1三種多糖的主要單糖組分為阿拉伯糖和木糖,其A/X比分別為0.78,1.02和0.96;利用核磁共振H譜與C譜對三種純化多糖進行結(jié)構(gòu)分析,確定AX-1-1、AX-2-1和AX-3-1主要由β-D-吡喃木糖連接構(gòu)成主鏈,α-L-呋喃阿拉伯糖連接在C(O)-2或C(O)-3位置形成側(cè)鏈結(jié)構(gòu),有基本相似的化學組成和空間結(jié)構(gòu)。3、玉米麩皮AX-1-1、AX-2-1和AX-3-1的抗炎活性研究用脂多糖(LPS)刺激的RAW 264.7巨噬細胞評價AX-1-1、AX-2-1和AX-3-1的抗炎作用。數(shù)據(jù)結(jié)果顯示:AX-3-1具有明顯的抗炎活性,可降低炎性細胞因子的分泌,如腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細胞介素1β(IL-1β)和白細胞介素1α(IL-1α)等。同時降低一氧化氮(NO)的釋放水平。而且AX-3-1能夠抑制環(huán)氧合酶-2(COX-2)和誘導型一氧化氮合酶(iNOS)的表達,抑制LPS刺激RAW 264.7巨噬細胞核因子(NF-κB)的激活。
【學位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：TS210.9
【圖文】：

組分AX-2的SephadexG-100柱層析洗脫曲線

3.7 Elution curve ofAX-1 on a sephadex G-100 chromatography co圖 3.8 組分 AX-2 的 Sephadex G-100 柱層析洗脫曲線 3.8 Elution curve ofAX-2 on a sephadex G-100 chromatography co

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本文編號：2718429