【摘要】：新鮮紫錐菊富含豐富的咖啡酸衍生物(Caffeic acid derivatives,CADs),但紫錐菊中的多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO)易把CADs降解掉,降低其增強(qiáng)免疫力功效。本論文通過對紫錐菊不同部位PPO酶學(xué)性質(zhì)研究,確定各部位適宜的鈍酶方法以最大限度保留CADs,并研發(fā)出富含CADs的紫錐菊保健汁。具體研究結(jié)果如下:(1)傳統(tǒng)熱處理均可鈍化紫錐菊鮮花中PPO,同時(shí)CADs保留量得以提高;采用相同的高溫蒸汽處理紫錐菊根、莖、葉、花,其CADs保留量并不相同。以紫錐菊鮮花為例,采用傳統(tǒng)的熱處理方式(漂燙、高溫蒸汽、中溫干燥)對其PPO鈍化處理后,紫錐菊花中綠原酸和菊苣酸保留量與未鈍化處理相比均有明顯增加,以高溫蒸汽處理的CADs保留效果最突出。留茬期鮮花經(jīng)過100℃高溫蒸汽處理15 min后,PPO活力降低至12.74%,綠原酸和菊苣酸含量與未鈍化處理者分別提高7.85、46.29倍。采用高溫蒸汽(100℃,15 min)處理紫錐菊根、莖、葉、花四個(gè)部位,其綠原酸、菊苣酸含量較未鈍化處理均有所增加(1.84-2.75倍),但呈現(xiàn)出區(qū)域特征,推測其與不同部位PPO酶構(gòu)型或性質(zhì)不同有關(guān)。(2)紫錐菊花、葉、根部位PPO酶學(xué)性質(zhì)存在差異,鮮花宜采用高溫蒸汽方式鈍酶,紫錐菊葉采用檸檬酸協(xié)同高溫蒸汽處理鈍酶效果較優(yōu)。紫錐菊花、葉、根中PPO粗酶,在100℃下放置,隨著時(shí)間的延長,PPO活力逐步降低;紫錐菊花、根中pH反應(yīng)出現(xiàn)多個(gè)不同的最適區(qū)間;紫錐菊葉中粗酶液最適PPO反應(yīng)在pH為7.5時(shí)最高,但在酸性條件下PPO表現(xiàn)較低的活力。根據(jù)PPO酶學(xué)性質(zhì)差異,分別選擇高溫蒸汽鈍酶處理或有機(jī)酸協(xié)同高溫蒸汽處理,結(jié)果表明,紫錐菊花采用高溫蒸汽處理25 min時(shí)PPO相對酶活力可降至6.82%,此時(shí)總CADs含量最高為6.96 mg/g,是未經(jīng)處理的2.61倍;紫錐菊葉采用pH 3.5的檸檬酸溶液協(xié)同高溫蒸汽處理15 min時(shí)PPO相對酶活力可降至10.94%,此時(shí)總CADs含量保留量為6.65 mg/g,是未經(jīng)處理的2.26倍。(3)制備出富含CADs的紫錐菊保健汁。富含CADs的紫錐菊花汁、葉汁制備方法為:花經(jīng)高溫蒸汽處理25 min后加水榨汁,250 W超聲處理5 min,離心去除濾渣,巴氏殺菌后裝袋。CADs溶出量為1.10 mg/mL,溶出率為78.01%;葉經(jīng)高溫蒸汽處理15 min后,加pH為3.5的檸檬酸溶液榨汁,300 W超聲處理5 min,離心去除濾渣,巴氏殺菌后裝袋。CADs溶出量為0.92 mg/mL,溶出率為69.70%。(4)紫錐菊汁對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)有顯著性影響,可提高小鼠的免疫功能。以小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)為例驗(yàn)證紫錐菊汁的免疫增強(qiáng)作用,其中,高劑量組葉汁(給藥量6.25 mg/kg)、高劑量組花汁(給藥量6.25 mg/kg)對DTH的免疫刺激作用優(yōu)于陽性對照組(p0.05),其小鼠耳差分別為(13.97±2.02)mg和(14.85±1.97)mg,比陽性組(7.19±2.15)mg分別增加94.30%和106.54%。
【圖文】：

合肥工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文綠原酸和菊苣酸有較好地分離，綠原酸保留時(shí)間 3.6 min，菊苣酸保留時(shí)間 11.6min。定量檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線：綠原酸 Y=15914 x +194.39 R2=0.9911，線性范圍 0.005-0.100 mg/mL；菊苣酸 Y=23967 x + 199.12 R2=0.9972，線性范圍 0.005-0.100mg/mL。

圖 2.8 紫錐菊花不同處理方法的 HPLC 圖Fig 2.8 HPLC diagrams of different treatment methods for Echinacea flowers注：1：綠原酸 2：菊苣酸2.3.3.2 不同熱處理方式對紫錐菊花中 PPO 酶活力的影響不同熱處理方式處理留茬期鮮花對 PPO 酶活力的影響結(jié)果列于表 2.5，由表2.5 可知，經(jīng)不同高溫方式處理后，檢測酶活力結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著蒸汽處理時(shí)間的增加，酶活力呈降低趨勢，其中蒸汽處理 15min 后，相對酶活力為 12.74%。蒸汽處理 10 min 與漂燙處理 10 min 相比，蒸汽處理后酶活力低于漂燙處理（15.83 U/mLvs 22.5 U/mL），同時(shí)，蒸汽處理后 CADs 含量高于漂燙處理（4.06 mg/g vs 3.63 mg/g），由此可知，蒸汽與漂燙處理相同時(shí)間，蒸汽處理能更好的降低 PPO 活力，增加有效成分含量的保留。蒸汽處理 15 min 后，再進(jìn)行干燥處理，酶活力為 7.5 U/mL，酶活力低于其他熱處理方式。雖然酶活力低，但是 CADs 含量與只經(jīng)過蒸汽處理15 min 相比，含量出現(xiàn)降低（3.73 mg/g vs 4.26 mg/g）與得到的酶活力降低，CADs含量增加結(jié)果不同，因此，，推測再經(jīng)過干燥處理雖能降低酶活力但不能使 CADs
【學(xué)位授予單位】：合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：TS275.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2707709