【摘要】：果膠是高等植物中原代細(xì)胞壁和細(xì)胞內(nèi)層的主要成分之一,是一種組成復(fù)雜的多糖類物質(zhì)。果膠具有天然,綠色和廉價的特性,以及抗氧化,抗糖化,抗腫瘤,降血脂等生物活性,故可作為天然食品添加劑減少食品質(zhì)量和營養(yǎng)價值的損失,改善食品的品質(zhì),減少慢性非傳染性疾病的發(fā)生。本研究以山楂為原料,分別采用超聲法、酶法和熱水法提取果膠,經(jīng)大孔吸附樹脂D3520和聚酰胺進(jìn)行脫色和脫蛋白處理后,進(jìn)行得率、總糖含量、半乳糖醛酸含量、總酚含量、硫酸集團含量、酯化度等特性和體外抗氧化和抗糖基化活性測定。在此基礎(chǔ)上,將山楂果膠上樣DEAE-52層析柱進(jìn)行分離純化,收集各洗脫峰并進(jìn)行濃縮、透析以及冷凍干燥。并對洗脫組分中含量最多的中性多糖(WPS)和酸性多糖(SPS-3)進(jìn)行單糖組成、紅外以及抗氧化和抗糖化活性的測定。最后分別將山楂果膠、山楂果膠酶解物、SPS-3以及SPS-3酶解物作為抗糖化劑添加到嬰兒配方乳粉中,比較不同抗糖化劑在嬰兒配方乳粉中對晚期糖化終末產(chǎn)物(AGEs)形成的抑制能力。結(jié)果如下:1、山楂果膠的提取及純化:1)采用超聲法(提取功率200 W、250 W、300W、350 W)、酶法和熱水法提取果膠,并用D3520進(jìn)行脫色。脫色后顏色由亮紅色變?yōu)槿榘咨�。聚酰胺脫蛋白的清除率均達(dá)到90%以上。酶法提取果膠的得率(11.50%)最高,超聲法提取山楂果膠得率最低,僅為8%左右。2)探究不同提取方式對果膠多糖的物化特性影響。結(jié)果表明,超聲法功率為350 W時,提取的山楂果膠的總糖含量(92.15%)和半乳糖醛酸含量(74.11%)最高。酶法提取的山楂果膠酯化度(88.17%)和總酚含量(0.10%)最高,總糖和半乳糖醛酸含量最低。熱水法得到的果膠硫酸基團含量(0.33%)最高。3)在抗氧化活性的測定中,超聲350W時對DPPH自由基、羥基自由基、超氧自由基的清除能力相對較強,熱水法和超聲200W時對三種自由基的清除能力相對較弱;在抗糖化測定中,超聲350W時對AGEs抑制率最高,酶法提取的山楂果膠抑制率最低。2、山楂果膠的分離純化及性質(zhì)的測定:1)將熱水提取山楂果膠經(jīng)離子交換柱DEAE-52進(jìn)行分離純化,得到五個組分,分別為中性糖WPS和酸性糖SPS-1、SPS-2、SPS-3和SPS-4。其中WPS和SPS-3組分含量最大,故選取WPS和SPS-3組分進(jìn)行單糖組成、紅外以及體外抗氧化和抗糖化活性的測定。2)WPS和SPS-3的碳水化合物含量非常接近,但SPS-3的糖醛酸含量遠(yuǎn)高于WPS。單糖組成結(jié)果表明,WPS的主要單糖為葡萄糖(25.60%),半乳糖(36.50%),阿拉伯糖(14.60%)和鼠李糖(10.50%),SPS-3的主要單糖為半乳糖醛酸(72.30%),阿拉伯糖(17.30%)和鼠李糖(3.60%)。結(jié)合單糖組成和FT-IR光譜結(jié)果,WPS和SPS-3均為多糖,且SPS-3為高酯化度果膠。3)在活性測定中,SPS-3對超氧自由基、羥基自由基、DPPH自由基的清除能力和對末端糖基化產(chǎn)物(AGEs)的抑制能力均強于WPS,故選取SPS-3作為抗糖化劑添加到嬰兒配方乳粉中,進(jìn)行抗糖化活性的測定。3、山楂果膠及其酶解產(chǎn)物在嬰幼兒配方乳粉中抗糖化能力的測定:分別將山楂果膠、山楂果膠酶解產(chǎn)物、SPS-3以及SPS-3酶解產(chǎn)物添加到嬰幼兒配方乳粉中,同時設(shè)置不添加果膠及其酶解產(chǎn)物為空白對照,添加氨基胍為陽性對照,在60℃加速貯藏條件下經(jīng)0、7、14、21和28天,比較其抗糖化的能力。試驗結(jié)果表明,與加速貯藏前相比,加速貯藏結(jié)束時,空白對照組的熒光強度增加了154.18%,山楂果膠組熒光強度增加了72.09%,山楂果膠酶解物組增加了86.68%,SPS-3組增加了45.06%,SPS-3酶解物組增加了50.61%,氨基胍組增加了44.23%。整個加速貯藏期間,熒光強度的增加順序為空白對照山楂果膠酶解物山楂果膠SPS-3酶解物SPS-3氨基胍。由此可見,SPS-3對嬰兒配方乳粉中AGEs形成的抑制能力最強,其次是SPS-3酶解物,山楂果膠酶解物的抗糖化活性最弱。綜上所述,本文以山楂為研究對象,將提取的山楂果膠進(jìn)行脫色和脫蛋白純化,然后將純化的山楂果膠進(jìn)行柱分離,選取含量最大的WPS和SPS-3組分進(jìn)行單糖組成、紅外光譜以及抗氧化和抗糖化活性的測定。由于SPS-3的體外抗糖化活性優(yōu)于WPS,故選取SPS-3為主要抗糖化劑添加到嬰兒配方乳粉中,探究其抑制AGEs能力。作為比較,分別將山楂果膠、粗山楂果膠酶解物、SPS-3、SPS-3酶解物添加到乳粉中。結(jié)果表明,SPS-3在乳粉中的抗糖化活性最強。本文為天然食源性抗糖化劑的開發(fā)提供了理論基礎(chǔ)。
【圖文】：

停止后，，放在 4 ℃冰箱里面冷卻一段時間。然后吸取 已經(jīng) 4 ℃冷卻過的三氯乙酸(1 g/ mL)混勻，高速離心 5 m然后棄掉上清液，用磷酸緩沖液（pH10）對沉淀進(jìn)行溶測定晚期糖化終末產(chǎn)物的熒光強度， 設(shè)定激發(fā)波長 370。果膠的純化效果后的顏色變化法得到的山楂果膠提取液經(jīng)大孔吸附樹脂 D3520 脫色后，為乳白色，脫色效果明顯。前后的蛋白質(zhì)含量變化

第 1 章 山楂果膠的提取和純化量是最高的為 5.71%，其次是熱水法，蛋白質(zhì)含量為 5.6聲法提取的山楂果膠蛋白質(zhì)含量在 5.13%-5.21%之間。用白質(zhì)的清除率均在 90%以上。超聲法功率為 300 W 時，聚量最低為 0.45%，其次是超聲 200 W 為 0.48%。酶法提取含量最高為 0.59%。取方法對果膠得率的影響
【學(xué)位授予單位】：遼寧大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：TS202.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2695608