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海帶中巖藻黃素及其異構(gòu)體的分離與生物活性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-31 06:07
【摘要】:近年來,我國(guó)對(duì)海洋資源的開發(fā)利用越來越重視,提高海洋資源加工水平迫在眉睫。傳統(tǒng)的海帶產(chǎn)業(yè)中,多以提取褐藻膠為主,海帶色素等脂溶性物質(zhì)多作為廢料遺棄。巖藻黃素作為海帶中類胡蘿卜素的主要成分,具有良好的生物活性。目前已被食品、化妝品、藥品等行業(yè)廣泛關(guān)注,具有良好的商業(yè)前景與商業(yè)價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)以海帶為原材料,采用乙醇提取海帶中的色素,驗(yàn)證了使用大孔樹脂富集巖藻黃素的可行性。結(jié)果表明大孔樹脂X-5對(duì)巖藻黃素有較強(qiáng)的吸附作用,考察了使用乙醇和水作為洗脫劑對(duì)巖藻黃素的洗脫作用,結(jié)果表明60%以上的乙醇的水溶液能有效洗脫大孔樹脂吸附的巖藻黃素。建立了實(shí)驗(yàn)室通過減壓柱層析快速富集富含巖藻黃素組分的方法,富集組分先通過硅膠柱層析純化,最后用高效制備液相色譜法制備得到三種巖藻黃素的異構(gòu)體。巖藻黃素及其異構(gòu)體通過紫外可見光譜(UV VIS)、核磁共振氫譜(~1 H-NMR)和質(zhì)譜(MS)進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征和鑒定。采用乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞系為模型,對(duì)巖藻黃素的體外抗腫瘤活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)。結(jié)果表明,巖藻黃素顯著抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖,13-順和13'-順巖藻黃素組分對(duì)癌細(xì)胞具有最強(qiáng)的抑制活性,IC_(50)值達(dá)到23.71μg/mL。全反式巖藻黃素和9'-順巖藻黃素兩種異構(gòu)體IC_(50)值分別為45.30μg/mL和27.09μg/mL。qPCR試驗(yàn)表明巖藻黃素各異構(gòu)體可能通過抑制癌細(xì)胞NF-κB家族基因表達(dá)而抑制乳腺癌細(xì)胞增殖?疾炝藥r藻黃素異構(gòu)體的自由基清除活力,其中全反式巖藻黃素清除DPPH自由基活性較高,13-順和13'-順巖藻黃素組分對(duì)羥基自由基表現(xiàn)出較強(qiáng)清除能力,全反式巖藻黃素和13-順和13'-順巖藻黃素組分對(duì)超氧自由基的清除能力要高于9'-順巖藻黃素。
【圖文】:

巖藻黃素,異構(gòu)體結(jié)構(gòu),褐藻


圖 1.1 巖藻黃素異構(gòu)體結(jié)構(gòu)式Figure 1.1 Structure of fucoxanthin stereoisomers1.3.2 褐藻中巖藻黃素含量研究表明,巖藻黃素在不同種類褐藻中含量差異較大,研究表明,巖藻黃素在馬尾藻科褐藻中含量較豐富,約為干重的 1.1-3.7‰,,而巖藻黃素在海帶中的含量相對(duì)較低,約占海帶干重的 0.7‰(Terasaki et al.,2009)。巖藻黃素在褐藻中的含量受季節(jié)影響變化,在日本采集的褐藻中的研究顯示,巖藻黃素在 1-3 月份含量較高,這是由于這段時(shí)期光照強(qiáng)度和海水溫度較低,而巖藻黃素是褐藻中光合作用重要的捕光色素,冬季光照不足導(dǎo)致褐藻中巖藻黃素富集以更好的進(jìn)行光合作用(Jin et al.,2003;Mouget et al.,2004)。巖藻黃素化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定,pH 值、光照以及溫度等因素均影響巖藻黃素的穩(wěn)

巖藻黃素,黃醇,代謝產(chǎn)物,結(jié)構(gòu)式


圖 1.2 巖藻黃素及其代謝產(chǎn)物巖藻黃醇和 amarouciaxanthinA 的結(jié)構(gòu)式Figure 1.2 The structure of fucoxanthin and its metabolite fucoxanthinol and amarouciaxanthin A雖然在巖藻黃素的吸收及代謝方面還有很多尚未研究透徹的問題,但目前的研究結(jié)果表明巖藻黃素素是一種無毒、無致敏、無致突變、生物相容性較好的物質(zhì)。1.5 巖藻黃素抗腫瘤機(jī)制研究現(xiàn)狀自巖藻黃素發(fā)現(xiàn)以來,研究人員對(duì)巖藻黃素的抗腫瘤活性一直很感興趣。巖藻黃素能誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡,抑制腫瘤的產(chǎn)生。巖藻黃素抗腫瘤的作用位點(diǎn)主要集中在幾個(gè)關(guān)鍵分子上,包括 MAPK、生長(zhǎng)阻滯與 DNA損傷誘導(dǎo)蛋白 45(GADD45)、轉(zhuǎn)錄因子 AP-1、NF-κB 途徑相關(guān)因子、X 染色體
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)科學(xué)院大學(xué)(中國(guó)科學(xué)院海洋研究所)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:TS254.58

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