【摘要】：雌二醇是一種天然存在的類固醇雌激素,能夠通過食物鏈在人體內(nèi)富集,攝入過多外源性雌二醇將會(huì)擾亂內(nèi)分泌系統(tǒng),危害人體健康。現(xiàn)有的雌二醇定量分析方法大都需要昂貴的分離分析設(shè)備和復(fù)雜的樣品預(yù)處理,而基于試紙條的雌二醇測(cè)定方法都以抗體為識(shí)別單元,無法克服如穩(wěn)定性差等抗體自身的弊端。因此,基于適配體識(shí)別技術(shù),建立穩(wěn)定、簡便、快速、靈敏的雌二醇測(cè)定方法,對(duì)于保障食品安全具有重要意義。本論文的主要研究內(nèi)容如下:(1)為克服熒光傳感易受背景信號(hào)干擾的弊端,利用長余輝納米材料發(fā)光壽命長,信噪比高的特性,基于磷光共振能量轉(zhuǎn)移原理,建立了雌二醇室溫磷光傳感方法,并應(yīng)用于牛奶樣品中雌二醇的測(cè)定:通過水熱合成法制備摻雜稀土元素的長余輝納米材料;以核酸適配體對(duì)其進(jìn)行表面修飾并進(jìn)行結(jié)構(gòu)和性質(zhì)表征;以其作為能量供體,以二硫化鉬納米片作為能量受體,構(gòu)建磷光共振能量轉(zhuǎn)移傳感器;在優(yōu)化的測(cè)定條件下,該傳感器在710 nm處的磷光強(qiáng)度與其中雌二醇濃度在0.5~1200 ng/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系(R~2=0.982),檢測(cè)限為0.3 ng/mL。牛奶樣品中的加標(biāo)回收率為93.6%~102.4%,證明本方法可應(yīng)用于牛奶樣品中雌二醇的定量分析。采用磷光傳感方法可有效避免來自乳蛋白和共存物的熒光干擾,提高方法準(zhǔn)確度。(2)建立了基于適配體識(shí)別-檢測(cè)區(qū)響應(yīng)性變構(gòu)-類夾心型側(cè)流層析試紙的雌二醇快速檢測(cè)方法,并應(yīng)用于牛奶樣品中雌二醇的測(cè)定:以35 mer雌二醇適配體序列為試紙檢測(cè)區(qū)分子信標(biāo)的環(huán)狀部位,樣品溶液中的雌二醇能與分子信標(biāo)環(huán)狀部位結(jié)合,迫使分子信標(biāo)頸部互補(bǔ)配對(duì)的雙鏈打開,其中一段與納米金表面修飾的DNA單鏈互補(bǔ)結(jié)合而使檢測(cè)區(qū)顯色。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,檢測(cè)區(qū)與質(zhì)控區(qū)信號(hào)強(qiáng)度之比與雌二醇濃度在27.2~27200 ng/mL范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系(R~2=0.920),裸眼檢測(cè)限為27.2 ng/mL。牛奶樣品中的加標(biāo)回收率為89%~103%,單次測(cè)定耗時(shí)15 min,證明本方法可用于牛奶樣品中雌二醇的快速測(cè)定。以本方法測(cè)定雌二醇,較前述室溫磷光傳感法快速、簡便、但檢測(cè)限偏高。(3)為降低側(cè)流層析試紙技術(shù)的檢測(cè)限,建立了試紙檢測(cè)區(qū)預(yù)富集方法:以miR-210模擬物為模式目標(biāo)物,在類夾心型和競(jìng)爭(zhēng)型兩種檢測(cè)模式中,以檢測(cè)區(qū)預(yù)富集目標(biāo)物后上載顯色信號(hào)單元,與直接上樣法相比,可視化檢測(cè)限降低了1~3個(gè)數(shù)量級(jí)且特異性沒有明顯差異。在1:1稀釋的血清樣品中,此預(yù)富集方法可得到與緩沖溶液中同樣的檢測(cè)限。此方法為降低雌二醇的側(cè)流層析檢測(cè)限提供思路。
【圖文】：

、共沉淀法、燃燒法和微波法。）溶膠-凝膠法溶膠-凝膠法的制備過程主要包括水解聚合的溶膠-凝膠、溶液脫水凝膠和絡(luò)合燥燒制三個(gè)步驟[39]。通常情況下，該方法的前體為醇鹽或金屬鹽，螯合配體為交聯(lián)劑為乙醇。由于螯合劑包裹 PLNPs 晶體的反應(yīng)溫度較高，生長受到限制提升其光學(xué)性質(zhì)。與高溫煅燒法相比，由于溶膠-凝膠法的反應(yīng)環(huán)境為溶液，子混合更加均勻，反應(yīng)溫度較低，提高了合成效率。研究者們通常利用溶膠-備以鋁酸鹽和硅酸鹽為基質(zhì)的 PLNPs。Chermont 等[40]首次利用溶膠-凝膠法制光譜位于近紅外區(qū)域、尺寸大小在 50～200 nm 之間的 PLNPs，進(jìn)行特定標(biāo)記在生物成像領(lǐng)域應(yīng)用效果良好。利用溶膠-凝膠法制備的 PLNPs 不僅尺寸均勻特征還可通過制備條件（如 pH 值、反應(yīng)前體和配體種類、反應(yīng)溫度等）的改應(yīng)的控制，可以制備出納米球、納米線[41]等形狀。Fu 等[42]利用溶膠-凝膠法a5O8:Cr 長余輝納米顆粒，發(fā)現(xiàn)隨著合成溫度的不斷增加，PLNPs 的尺寸也隨之增免 PLNPs 晶體粒徑過大，發(fā)展了溶膠-凝膠-微波法[43]和溶膠-凝膠-燃燒法[44，制備的 PLNPs 晶形完整，尺寸均勻。

圖 1-2 水熱法制備長余輝納米材料及其應(yīng)用[45]atic illustration of the PLNPs sythesised by hydrothermal method and for in采用的模板一般為介孔二氧化硅納米球（MSNs），該物質(zhì)在作對(duì) PLNPs 的尺寸大小和形貌進(jìn)行有效控制，使 PLNPs 的原料內(nèi)沉積，煅燒后獲得 MSNs@PLNPs，粒徑大小在 50～100 nm 范模板法制備出尺寸較小的 PLNPs，可應(yīng)用于分析檢測(cè)或成像領(lǐng)法 PLNPs 的原料溶液進(jìn)行混合，加入沉淀劑后使體系中離子產(chǎn)后高溫煅燒即可獲得 PLNPs 晶體。由于該方法的最初步驟是在混勻提供有利條件，，因而獲得的 PLNPs 晶體更為均一。Chen制備晶型為六方多壁晶系的長余輝納米管。
【學(xué)位授予單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：TS252.7;O658.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄧?yán)?;友人的歡歌[J];參花(下);2017年07期

2 壽漢偉;側(cè)流式圓網(wǎng)造紙機(jī)[J];中國造紙;1992年05期

3 包金;黃晶;孫璐璐;單洪麗;;雙向側(cè)流免疫檢測(cè)髓過氧化物酶參考區(qū)間的[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年07期

4 胡楨;李進(jìn)義;劉建魁;袁金雷;;側(cè)流式深采抽油泵的研制與應(yīng)用[J];石油礦場(chǎng)機(jī)械;2010年08期

5 徐永英;;側(cè)流網(wǎng)槽的使用性能[J];陜西科技大學(xué)學(xué)報(bào);1993年04期

6 肖忠華;黃海兵;郝坡;;側(cè)流免疫法在臨床即時(shí)檢測(cè)中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J];重慶醫(yī)學(xué);2016年28期

7 李紅楓,周明連;管殼式換熱器殼側(cè)流動(dòng)與傳熱的實(shí)驗(yàn)研究[J];發(fā)電設(shè)備;2001年01期

8 李鐵彬,肖金榮;側(cè)流弧形板式網(wǎng)槽的設(shè)計(jì)和應(yīng)用[J];中國造紙;1992年01期

9 郭景玉;張?jiān)屏?李宇;孔雯;王卉妍;李國強(qiáng);;反應(yīng)時(shí)間對(duì)雙向側(cè)流免疫法測(cè)定NT-proBNP結(jié)果的影響[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2012年17期

10 ;問和答:煙味等于二手煙嗎?[J];心血管病防治知識(shí);2006年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前6條

1 何亞峰;干為民;盧文壯;趙建社;肖華星;楊振文;;側(cè)流式電解加工鈦合金試驗(yàn)研究[A];2016年全國電化學(xué)加工技術(shù)研討會(huì)會(huì)議論文集[C];2016年

2 張杰;白若石;易小麗;周駿;;在線固相萃取-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定側(cè)流煙氣中的煙草特有亞硝胺[A];中國煙草學(xué)會(huì)2014年學(xué)術(shù)年會(huì)入選論文摘要匯編[C];2014年

3 ;在線固相萃取-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定側(cè)流煙氣中的煙草特有亞硝胺[A];上海市煙草學(xué)會(huì)2014年度優(yōu)秀學(xué)術(shù)論文集（工程技術(shù)類）[C];2015年

4 江莉龍;葉炳火;魏可鎂;邢一德;張建萍;;改性鋁土礦為載體的Ni-Mn-K一氧化碳高溫變換催化劑工業(yè)側(cè)流試驗(yàn)[A];第五屆全國工業(yè)催化技術(shù)與應(yīng)用年會(huì)論文集（上冊(cè)）[C];2008年

5 張玲;司晉鴻;李金峰;黎誠耀;;一種高靈敏高特異性的用于抗原靶分子檢測(cè)的新型側(cè)流免疫分析信號(hào)放大系統(tǒng)的設(shè)計(jì)與應(yīng)用[A];中國輸血協(xié)會(huì)第九屆輸血大會(huì)論文專輯[C];2018年

6 吳婷婷;許利蘋;張學(xué)記;;基于酶放大的膠體金側(cè)流層析試紙[A];中國化學(xué)會(huì)第30屆學(xué)術(shù)年會(huì)摘要集-第四分會(huì)：生物分析和生物傳感[C];2016年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 鄧洪軍;創(chuàng)新思路破解深抽難題[N];中國石化報(bào);2009年

2 宏偉;酒、醋防豬中暑[N];江蘇科技報(bào);2001年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 呂景花;厭氧釋磷上清液側(cè)流化學(xué)磷回收對(duì)主流生物除磷系統(tǒng)的影響研究[D];西安建筑科技大學(xué);2015年

2 陳光軍;淬硬鋼高速精密切削過程穩(wěn)定性與表面塑性側(cè)流研究[D];哈爾濱理工大學(xué);2011年

3 黃炎;納米材料標(biāo)記的側(cè)流層析生物傳感器的設(shè)計(jì)和應(yīng)用[D];北京科技大學(xué);2018年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張曉曉;雌二醇的磷光傳感及側(cè)流層析方法研究[D];江南大學(xué);2019年

2 申童童;基于側(cè)流化學(xué)回收磷的A~2/O工藝污泥回流位點(diǎn)對(duì)系統(tǒng)效能影響研究[D];西安建筑科技大學(xué);2018年

3 朱青松;側(cè)流式電除塵器的除塵特性研究[D];武漢科技大學(xué);2018年

4 劉倫;富含磷污泥回流過程中磷的釋出及側(cè)流化學(xué)脫除污泥中磷對(duì)主流生物系統(tǒng)的影響研究[D];西安建筑科技大學(xué);2018年

5 劉傳波;側(cè)流水相化學(xué)磷回收對(duì)倒置A~2/O生物系統(tǒng)的影響[D];西安建筑科技大學(xué);2017年

6 郭小馬;改良A~2O-側(cè)流除磷工藝脫氮除磷及微生物菌落特征研究[D];中國海洋大學(xué);2015年

7 席粉鵲;側(cè)流化學(xué)磷剝奪對(duì)AO連續(xù)流生物除磷系統(tǒng)的影響研究[D];西安建筑科技大學(xué);2014年

8 宋璐;微好氧BNR系統(tǒng)的高效除磷及其磷回收研究[D];蘭州交通大學(xué);2017年

9 鄒麗;側(cè)流除磷強(qiáng)化A~2/O系統(tǒng)脫氮除磷的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2012年

10 金勇;卷煙側(cè)流煙氣的調(diào)控研究[D];湖南師范大學(xué);2003年

本文編號(hào)：2657236