【摘要】：目的:優(yōu)化獼猴桃皮渣多酚的有效提取條件,并分析其成分,進(jìn)一步研究獼猴桃皮渣多酚體外模擬消化過程中的穩(wěn)定性及抗氧化活性變化,同時(shí)探索獼猴桃皮渣多酚經(jīng)體外糞便發(fā)酵后對腸道微生物的影響,為獼猴桃皮渣多酚作為功能因子調(diào)節(jié)腸道內(nèi)環(huán)境提供理論依據(jù),為其植物多酚的開發(fā)利用提供參考。方法:1.以獼猴桃皮渣為原料,在超聲時(shí)間、甲醇濃度、超聲溫度和超聲功率4個(gè)單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)面優(yōu)化,確定多酚的有效提取條件,并采用高效液相色譜法(HPLC)對其進(jìn)行成分分析。2.通過體外模擬消化試驗(yàn),測定消化過程中的總酚、黃酮、DPPH自由基及羥自由基(·OH)清除率,研究獼猴桃皮渣多酚消化過程中的穩(wěn)定性及抗氧化活性變化。3.采用化學(xué)分析法和氣相色譜儀分別測定獼猴桃皮渣多酚體外發(fā)酵過程中氨氮值(NH_3-N)及短鏈脂肪酸含量(SCFAs)的變化,最后通過微生物測序分析探討獼猴桃皮渣多酚對腸道微生物的影響。結(jié)果:1.單因素試驗(yàn)結(jié)果顯示:當(dāng)超聲時(shí)間為20 min、甲醇濃度為60%、超聲溫度為50℃、超聲功率為450 W時(shí),多酚提取量最大。響應(yīng)面優(yōu)化后,提取條件為:甲醇濃度58%、超聲溫度60℃、超聲時(shí)間21 min、超聲功率為430 W,此時(shí),獼猴桃皮渣多酚提取量可達(dá)(19.34±0.39)mg·g~(-1)。HPLC分離出7種物質(zhì):沒食子酸、原兒茶酸、綠原酸、七葉亭、兒茶素、表兒茶素、對香豆酸。2.體外消化過程中獼猴桃皮渣多酚的穩(wěn)定性及抗氧化活性變化:(1)模擬胃消化過程中多酚、黃酮含量相對穩(wěn)定,與空白組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而模擬腸消化后兩者含量均有降低,但高于空白對照,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)獼猴桃皮渣多酚體外模擬胃消化過程中,DPPH及·OH自由基清除率與空白對照相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;模擬腸消化過程中,兩自由基清除率高于空白對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),該結(jié)果與總酚、總黃酮結(jié)果一致。3.獼猴桃皮渣多酚對腸道微生物的影響:(1)獼猴桃皮渣多酚經(jīng)模擬體外糞便發(fā)酵后,多酚組與空白對照組比較,NH_3-N含量明顯下降并趨于穩(wěn)定(P0.01)。乙酸、丙酸、丁酸含量降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),推測這可能與各組腸道微生物組成變化有關(guān)。(2)腸道微生物測序結(jié)果顯示:在門水平上,獼猴桃皮渣多酚發(fā)酵組微生物以擬桿菌門、厚壁菌門及放線菌門為主;空白組則以厚壁菌門、變形菌門為主,擬桿菌門較少。在屬水平上,獼猴桃皮渣多酚發(fā)酵組腸道微生物構(gòu)成以普氏菌屬、巨單胞菌屬、乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬為主;空白組以巨單胞菌屬、考拉桿菌屬、大腸埃希菌屬及部分未明確分類的微生物為主;同時(shí),加酚組優(yōu)勢菌屬為普氏菌、擬桿菌、乳酸桿菌及芽孢桿菌。相關(guān)性熱圖顯示乙酸、丙酸、丁酸或NH_3-N含量與上述各優(yōu)勢菌呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,該結(jié)果與NH_3-N含量及SCFAs含量的測定結(jié)果相一致。結(jié)論:1.獼猴桃皮渣多酚有效提取條件為:甲醇濃度58%、超聲溫度60℃、超聲時(shí)間21 min、超聲功率為430 W,該條件下提取量為(19.34±0.39)mg·g~(-1)。2.獼猴桃皮渣多酚在模擬胃消化中較穩(wěn)定,在腸消化過程中不穩(wěn)定,有所降解,但與對照組相比模擬腸消化可以提高獼猴桃皮渣多酚的釋放并增強(qiáng)抗氧化活性。3.獼猴桃皮渣多酚影響腸道微生物及其代謝物的組成:獼猴桃皮渣多酚對促進(jìn)普氏菌屬、擬桿菌屬、乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬的增殖有一定作用,本研究表明獼猴桃皮渣多酚可以改善腸道內(nèi)環(huán)境、優(yōu)化腸道菌群結(jié)構(gòu),有望在未來的研究中作為食品功能因子得以開發(fā)利用。
【圖文】：

圖 1 甲醇濃度對多酚提取率的影響ig. 1 Effect of methanol concentration on yield of polyphen多酚提取率的影響

由圖可以看出提取溫度在 20~50 ℃間，多酚提取 ℃達(dá)到最大，之后變化不明顯且略有降低。一方面分子運(yùn)動(dòng)加快，，因此溶解度增加、擴(kuò)散系數(shù)增大，多面，結(jié)合多酚可能有一部分釋放。但多酚具有熱敏破壞[44]，同時(shí)溫度升高，溶劑揮發(fā)損失，導(dǎo)致提取率
【學(xué)位授予單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：TS209

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本文編號(hào)：2606687