發(fā)布時間：2025-02-11 11:40

　　本文是關(guān)于天麻醇提物的添加對灰樹花產(chǎn)胞外多糖的影響及其機(jī)理的研究。主要包括添加天麻醇提物對灰樹花液體深層發(fā)酵菌絲體生長、合成胞外多糖及關(guān)鍵酶活性的影響;對灰樹花轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行測序并進(jìn)行生物信息學(xué)分析與差異表達(dá)基因分析;天麻醇提物及其特征成分的添加對灰樹花胞外多糖抗氧化活性的影響。主要研究結(jié)論如下:天麻醇提物的添加對灰樹花胞外多糖合成及關(guān)鍵酶活性的影響。當(dāng)天麻醇提物的添加濃度為7 g/L時對灰樹花菌體生物量及胞外多糖合成促進(jìn)作用最明顯,與對照組相比分別提高了44.24%和37.98%。此外7 g/L天麻醇提物可顯著提高α-磷酸葡萄糖變位酶活性及抑制磷酸葡萄糖異構(gòu)酶活性,且兩種關(guān)鍵酶酶活均在發(fā)酵培養(yǎng)的第12 d表現(xiàn)出最大酶活力。基于Illumina高通量測序技術(shù)對灰樹花轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行測序。獲得74 575 910個reads,10.4 G數(shù)據(jù)量;將測序數(shù)據(jù)進(jìn)行de novo拼接后得到18 077個Unigene。對所得Unigene進(jìn)行不同數(shù)據(jù)庫比對,在Nr數(shù)據(jù)庫中有11 651個Unigene被注釋到,其中灰樹花轉(zhuǎn)錄組與變色栓菌相似序列最多(18.74%);有8 332個Unigene在GO數(shù)據(jù)庫...

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 天麻
        1.1.1 天麻的主要成分
        1.1.2 天麻醇提物主要成分
    1.2 真菌灰樹花
        1.2.1 灰樹花菌株
        1.2.2 灰樹花多糖的價值
    1.3 灰樹花深層發(fā)酵研究進(jìn)展
    1.4 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)
        1.4.1 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)概述
        1.4.2 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)在真菌研究中的應(yīng)用
    1.5 真菌多糖抗氧化活性研究進(jìn)展
    1.6 課題研究背景及意義
    1.7 主要研究內(nèi)容
第二章 天麻醇提物參與灰樹花發(fā)酵影響產(chǎn)胞外多糖及關(guān)鍵酶活性的研究
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 菌種和天麻
        2.2.2 實驗藥品
        2.2.3 實驗儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 培養(yǎng)基
        2.3.2 培養(yǎng)方法
        2.3.3 天麻醇提物的制備
        2.3.4 分析方法
        2.3.5 實驗數(shù)據(jù)處理及制圖
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 不同濃度天麻醇提液對灰樹花菌體生長和EPS產(chǎn)量的影響
        2.4.2 7g/L的天麻醇提物的添加對灰樹花發(fā)酵的影響
        2.4.3 天麻醇提物對灰樹花多糖合成關(guān)鍵酶的影響
    2.5 本章小結(jié)
第三章 真菌灰樹花菌絲體轉(zhuǎn)錄組測序及分析
    3.1 引言
    3.2 材料
        3.2.1 菌種
        3.2.2 實驗藥品
        3.2.3 實驗儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 培養(yǎng)基
        3.3.2 培養(yǎng)方法
        3.3.3 總RNA的提取
        3.3.4 cDNA文庫構(gòu)建
        3.3.5 序列組裝
        3.3.6 功能注釋
        3.3.7 預(yù)測編碼蛋白框(CDS)
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 Unigene拼接
        3.4.2 SSR分析
        3.4.3 Unigene的功能注釋
        3.4.4 Unigene的CDS預(yù)測
    3.5 本章小結(jié)
第四章 灰樹花轉(zhuǎn)錄組差異性表達(dá)基因篩選及分析
    4.1 引言
    4.2 材料
        4.2.1 菌種和天麻
        4.2.2 實驗藥品
        4.2.3 實驗儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 培養(yǎng)基
        4.3.2 培養(yǎng)方法
        4.3.3 天麻醇提物的制備
        4.3.4 總RNA提取
        4.3.5 基因表達(dá)量
        4.3.6 差異表達(dá)基因篩選
        4.3.7 GO顯著性富集分析
        4.3.8 KEGG顯著性富集分析
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 RNA的提取
        4.4.2 差異表達(dá)基因篩選
        4.4.3 差異基因GO富集分析
        4.4.4 差異基因KEGG富集分析
    4.5 本章小結(jié)
第五章 天麻提取物組分的添加對灰樹花胞外多糖抗氧化活性的研究
    5.1 引言
    5.2 材料
        5.2.1 菌種與天麻
        5.2.2 實驗藥品
        5.2.3 實驗儀器
    5.3 實驗方法
        5.3.1 培養(yǎng)基
        5.3.2 培養(yǎng)方法
        5.3.3 天麻醇提物的制備
        5.3.4 灰樹花胞外多糖的提取
        5.3.5 DPPH自由基清除率測定
        5.3.6 羥基自由基測定
        5.3.7 還原力測定
        5.3.8 實驗數(shù)據(jù)處理及制圖
    5.4 結(jié)果與分析
        5.4.1 DPPH自由基清除率測定
        5.4.2 羥基自由基清除率測定
        5.4.3 還原力測定
    5.5 本章小結(jié)
第六章 總結(jié)與展望
    6.1 總結(jié)
    6.2 論文創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 展望
致謝
主要參考文獻(xiàn)
附錄



本文編號：4033208