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小麥芽內(nèi)肽酶酶學性質(zhì)及其對豆粕降解規(guī)律研究

發(fā)布時間:2024-06-02 02:10
  小麥芽含有豐富的酶系,其中內(nèi)肽酶主要作用于蛋白質(zhì)多肽鏈內(nèi)部的肽鍵使蛋白質(zhì)長鏈分解成短肽。在許多食品加工原料及食品加工過程,內(nèi)肽酶活力的大小直接影響到底物蛋白、產(chǎn)物蛋白的含量及組成比例,同時也是很多發(fā)酵食品的重要監(jiān)測指標。豆粕蛋白質(zhì)含量高,分子質(zhì)量大、結(jié)構(gòu)緊密,消化利用率不高。通過酶法將大分子蛋白質(zhì)降解成小分子蛋白質(zhì)、肽和氨基酸,從而使蛋白質(zhì)分子量降低,提高蛋白質(zhì)的利用率。而小麥芽作為天然的復合酶,可以解決豆粕中所含的蛋白質(zhì)分子質(zhì)量較大、消化利用率相對較低等問題。本研究改進了小麥芽內(nèi)肽酶活力測定方法,探索了小麥芽內(nèi)肽酶的酶學性質(zhì)和動力學常數(shù),確定了最佳酶活力測定條件。將小麥芽內(nèi)肽酶應(yīng)用到豆粕降解中,研究了酶解時間對產(chǎn)物蛋白含量、氨基氮含量、蛋白質(zhì)分子量大小分布等指標的影響規(guī)律,采用紅外光譜、掃描電鏡、拉曼光譜等技術(shù)手段明確了豆粕降解前后蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)的變化。并對豆粕降解產(chǎn)物中抗氧化活性肽做了探討。主要研究結(jié)果如下:(1)本實驗在利用SDS-PAGE電泳技術(shù)觀察反應(yīng)產(chǎn)物條帶分布的基礎(chǔ)上,采用三氯乙酸沉淀反應(yīng)體系中大分子蛋白質(zhì),留下產(chǎn)物肽,通過測定產(chǎn)物肽含量精確測定小麥芽內(nèi)肽酶活性。實驗結(jié)果中...

【文章頁數(shù)】:64 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1縮二脲標準曲線

圖1縮二脲標準曲線

山東農(nóng)業(yè)大學碩士論文17圖1縮二脲標準曲線Fig.1Standardcurveofbiuret2.5.3.2實驗測定pH4.5醋酸-醋酸鈉緩沖液1.0mL、粗酶提取液1.0mL被加入到比色管中,50℃保溫30min,溶液中加入1.0mL牛血清白蛋白溶液,在50℃下被反應(yīng)4h。然后....


圖2蛋白溶液的標準曲線

圖2蛋白溶液的標準曲線

小麥芽內(nèi)肽酶酶學性質(zhì)及其對豆粕降解規(guī)律研究182.5.4動力學常數(shù)的測定在最適的pH和溫度條件下,底物牛血清白蛋白濃度為0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2mg/mL、1.4mg/mL、1.6mg/mL、1.8mg/mL....


圖3內(nèi)肽酶反應(yīng)體系的SDS-PAGE電泳圖

圖3內(nèi)肽酶反應(yīng)體系的SDS-PAGE電泳圖

小麥芽內(nèi)肽酶酶學性質(zhì)及其對豆粕降解規(guī)律研究223結(jié)果與分析3.1小麥芽內(nèi)肽酶活力最佳測定條件的確定3.1.1內(nèi)肽酶測定過程中反應(yīng)體系蛋白質(zhì)組成分析圖3為內(nèi)肽酶反應(yīng)體系中蛋白質(zhì)的SDS-PAGE電泳圖。如圖3所示,泳道1為粗酶液的蛋白分子量的分布,我們可以看出小麥芽內(nèi)肽酶的分子量主....


圖4內(nèi)肽酶反應(yīng)體系的Tricine-SDS-PAGE電泳圖

圖4內(nèi)肽酶反應(yīng)體系的Tricine-SDS-PAGE電泳圖

山東農(nóng)業(yè)大學碩士論文23中的4.6-10kDa處的條帶只在泳道3中出現(xiàn),說明此條帶的物質(zhì)為小麥芽內(nèi)肽酶降解底物牛血清白蛋白后的部分產(chǎn)物,這部分產(chǎn)物分子量較小,不能被TCA沉淀。將TCA沉淀后的酶解液與堿性硫酸銅反應(yīng)在540nm下測定吸光度值減去對照組酶解液體系540nm的吸光度值....



本文編號:3986697

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