青霉素是一種重要的β-內(nèi)酰胺類廣譜抗生素,主要通過絲狀真菌產(chǎn)黃青霉菌發(fā)酵生產(chǎn)。據(jù)統(tǒng)計2016年全球抗生素的藥物市場約438.1億美元,其中青霉素類藥物在抗生素市場占47%,且青霉素的需求逐年上升;同時,青霉素中間體六氨基青霉烷酸(6-APA)是合成羥氨芐青霉素和氨芐青霉素等其它半合成抗生素合成原料。然而,青霉素發(fā)酵過程放大往往面臨生產(chǎn)能力降低的難題,成為進一步深入挖掘產(chǎn)黃青霉菌生產(chǎn)“潛質(zhì)”的重要瓶頸。本文利用定量代謝物組學(xué)技術(shù),進行如下研究:針對前期實驗室構(gòu)建的產(chǎn)黃青霉菌海藻糖代謝途徑突變株(P.chrysogenum Δtps1和P.chrysogenum Δtps2),在實驗室規(guī)模恒化器中探究了海藻糖代謝功能對于菌體生長和青霉素合成的生理學(xué)響應(yīng)。實驗結(jié)果表明,與出發(fā)菌(P.chrys ogenumWisconsin 54-1255)相比,在稀釋率為0.05 h-1葡萄糖限制性恒化器培養(yǎng)中,海藻糖途徑缺失菌株菌體得率分別下降2.7%和13.5%,工程菌株單位底物消耗氧分別下降14.6%和10.1%,能量代謝效率略有提高;然而,在海藻糖突變株中,青霉素產(chǎn)量下降了一半。與高產(chǎn)產(chǎn)黃青霉菌(...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１青霉素Ｇ分子式??Ｆｉｇ．?１．１?Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ?Ｇ?ｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｆｏｒｍｕｌａ??

細??菌的細胞壁并在細菌細胞的繁殖期起殺菌作用的一類抗生素，是世界上最早發(fā)現(xiàn)的第??一種治療人類疾病的抗生素ｍ。??青霉素分為三代，第－代青霉素指天然青霉素，如青霉素Ｇ。第二代青霉素指以??青霉素為母核，６－氨基青霉烷酸（６－ＡＰＡ）改變側(cè)鏈而得到半合成青霉素，如甲氧苯青??霉素....

圖１．２青霉素生物合成途徑１６１??Ｆｉｇ．?１．２?Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ?ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｐａｔｈｗａｙ１６＾??１．３產(chǎn)黃青霉菌研究進展??１．３．１產(chǎn)黃青霉菌的發(fā)現(xiàn)??

第２頁?華東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文??此這兩步反應(yīng)位于細胞質(zhì)中，最后一步發(fā)生在過氧化物酶體中，ＩＰＮ在五基因編??碼的異青霉素Ｎ酰基轉(zhuǎn)移酶（ＡＴ）的作用下生成產(chǎn)物青霉素Ｇ?（如圖１．２）?＋６］。??，，？？?／?＼??．．．＊？？?／?、??ｍｏｏｃＡ＾ｃ〇〇ｈ?，？？？？?／?....

圖１．６快速取樣、淬滅、代謝物提取的流程１４７１??Ｆｉｇ．?１．６?Ｆａｓｔ?ｓａｍ?

ｆｒｇ?Ｌ－ｃ??Ｖ＇ｌ?－Ｈｊ－?？?８＜＾?／Ｖ?—＂??｝?’－國、二｜＾｜＾??Ａｌｉｑｕｏ?丨?ｅ?Ｒａｐｉｄ?ｅｖａｐｏｒａｉｉｏｎ?Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ?３?ｍｉｎ?＾５ｔ?ｆｉ；，ｒａ，ｉ°ｎ??－６００?＾ｉｇ?＆?ｃｏｌｄ?ｗａｓｈｉｎｇ?■??，２Ｃ?ｇｌｕ....

圖１．７海藻糖結(jié)構(gòu)式??Ｆｉｇ．?１．７?Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ?ｆｏｒｍｕｌａ??大腸桿菌胞內(nèi)合成的海藻糖可以作為應(yīng)激保護劑，外部提供的海藻糖不能作為壓??

率操作，而稀釋率接近生物體Ａ的最大值。優(yōu)點包括：（１）在不改變培養(yǎng)基成分??或操作條件（例如溫度，ｐＨ值）的情況下改變（２）通過修正平估環(huán)境參數(shù)的特??定影響；（３）通過改變生長限制底物的性質(zhì)來建立獨特的條件，例如Ｃ－、Ｎ－、Ｐ〇４３＇??Ｍｇ２＋限制生長；（４）可以分析穩(wěn)態(tài)和瞬....

本文編號：3985920