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非產(chǎn)毒黃曲霉菌株篩選及其在花生種植中的應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2024-05-21 06:44
  黃曲霉毒素(aflatoxin,AFT)是黃曲霉、寄生曲霉等產(chǎn)生的一類劇毒次生代謝產(chǎn)物,對(duì)花生、玉米等糧油及其制品造成廣泛的污染。因其具有致癌、致畸、致突變作用,嚴(yán)重威脅著人類健康。因基因變異,部分黃曲霉菌喪失了產(chǎn)毒能力,在種植和倉儲(chǔ)過程中,非產(chǎn)毒黃曲霉菌株可競(jìng)爭(zhēng)抑制黃曲霉毒素產(chǎn)生菌的生長(zhǎng),實(shí)現(xiàn)從源頭控制黃曲霉毒素污染的目的。本研究針對(duì)我國(guó)幾個(gè)花生主產(chǎn)區(qū),同時(shí)也是黃曲霉毒素污染嚴(yán)重區(qū)域,如河南舞陽、湖北襄陽等地開展非產(chǎn)毒黃曲霉菌株的篩選、菌劑制備及田間應(yīng)用效果評(píng)價(jià)等研究。首先,利用形態(tài)學(xué)、分析化學(xué)和PCR-RFLP等分子生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合的方法分離鑒定非產(chǎn)毒黃曲霉菌株,在河北、河南、湖北等地的土壤和花生樣品中共篩選鑒定出156株黃曲霉菌,其中非產(chǎn)毒黃曲霉菌21株(13.5%),產(chǎn)毒黃曲霉菌135株(86.5%)。而后利用非產(chǎn)毒黃曲霉菌制備不同菌劑,如以花生粕和大豆為基質(zhì)的菌肥、以大米為介質(zhì)的大米接種孢子劑、液體孢子菌劑和花生包衣劑等。并設(shè)置不同的施加時(shí)間和劑量,通過田間試驗(yàn)對(duì)不同菌劑進(jìn)行應(yīng)用效果評(píng)價(jià)。田間試驗(yàn)結(jié)果表明施加劑量對(duì)田間試驗(yàn)結(jié)果無影響,最佳的菌劑施加時(shí)間為開花期開始的前2

【文章頁數(shù)】:81 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1非產(chǎn)毒黃曲霉菌株篩選及其在花生種植中的應(yīng)用研究技術(shù)路線

圖1.1非產(chǎn)毒黃曲霉菌株篩選及其在花生種植中的應(yīng)用研究技術(shù)路線

1.5技術(shù)路線非產(chǎn)毒黃曲霉菌株篩選及其在花生種植中的應(yīng)用研究技術(shù)路線如圖1.1所示。圖1.1非產(chǎn)毒黃曲霉菌株篩選及其在花生種植中的應(yīng)用研究技術(shù)路線


圖2.1不同曲霉菌在AFPA平板上形態(tài)

圖2.1不同曲霉菌在AFPA平板上形態(tài)

2.1不同曲霉菌在AFPA平板上形態(tài)曲霉;(b)醬油曲霉;(c)黃曲霉;(d)寄生曲屬鑒定分析提取糖凝膠電泳檢測(cè)所提取的基因組DNA的2.2所示。


圖2.2基因組DNA提取凝膠電泳圖

圖2.2基因組DNA提取凝膠電泳圖

圖2.2基因組DNA提取凝膠電泳圖M1:DL10000;M2:DL15000;1~16為本次實(shí)驗(yàn)所用及篩選到的菌株所示,Marker的大小分別為10000與15000,所提取的基因組10000至15000之間,且條帶明亮完整,說明使用試劑盒提取果良好。....


圖2.328SrRNA凝膠電泳圖

圖2.328SrRNA凝膠電泳圖

圖2.328SrRNA凝膠電泳圖;1:寄生曲霉3.124;2:黃曲霉NAF06;3:米曲霉3.484;4:醬油曲SrRNA基因的測(cè)序結(jié)果及比對(duì)R擴(kuò)增得到的28SrRNA基因送華大基因有限公司進(jìn)行雙向測(cè)序?qū)y(cè)序結(jié)果進(jìn)行比對(duì),發(fā)現(xiàn)各菌株之間高度同源,一致性....



本文編號(hào):3979743

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