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類(lèi)肝素糖聚物促進(jìn)干細(xì)胞分化的研究

發(fā)布時(shí)間:2023-05-13 15:44
  干細(xì)胞治療是通過(guò)在體外對(duì)干細(xì)胞進(jìn)行純化分離、增殖培養(yǎng)然后進(jìn)行定向誘導(dǎo)分化,通過(guò)移植技術(shù)將獲得全新的細(xì)胞、組織和器官等移植到體內(nèi),移植部分能夠代替正常、損傷或者死亡的細(xì)胞,從而恢復(fù)機(jī)體功能一種細(xì)胞療法。在細(xì)胞治療過(guò)程中,干細(xì)胞的高效定向分化是至關(guān)重要的,全面了解和充分利用影響干細(xì)胞分化因素對(duì)再生醫(yī)學(xué)具有重要意義。肝素/硫酸乙酰肝素(HP/HS)作為干細(xì)胞生態(tài)位中結(jié)構(gòu)最復(fù)雜的GAGs分子,可通過(guò)結(jié)構(gòu)中大量負(fù)電荷的羧酸基團(tuán)和磺酸基團(tuán)與可溶性信號(hào)因子或細(xì)胞膜蛋白相互作用,進(jìn)而特異性誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞方向分化。我們通過(guò)基團(tuán)重組策略合成類(lèi)肝素聚合物,并模擬干細(xì)胞生態(tài)位微環(huán)境,設(shè)計(jì)人工干細(xì)胞生態(tài)位微環(huán)境平臺(tái),探究其對(duì)干細(xì)胞定向分化的影響。具體研究?jī)?nèi)容如下:1.首先從宏觀3D角度設(shè)計(jì)人工干細(xì)胞生態(tài)位平臺(tái),我們以3-磺丙基丙烯酸鹽鉀鹽(SPA)、2-(甲基丙烯酰胺基)葡萄糖(MAG)、N-異丙基丙烯酰胺(NIPAAm)為單體單元,進(jìn)行RAFT聚合制備溫敏性多孔水凝膠PNMS,用于封裝骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs),并探究該平臺(tái)對(duì)BMSCs向成骨細(xì)胞分化的影響。通過(guò)紅外光譜、...

【文章頁(yè)數(shù)】:123 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 干細(xì)胞概述
        1.1.1 干細(xì)胞生物學(xué)
        1.1.2 影響干細(xì)胞分化的因素
    1.2 肝素/硫酸乙酰肝素(HP/HS)對(duì)干細(xì)胞分化的影響
        1.2.1 糖胺聚糖的結(jié)構(gòu)與功能
        1.2.2 肝素/硫酸乙酰肝素(HP/HS)對(duì)干細(xì)胞分化的影響
    1.3 肝素及類(lèi)肝素糖聚物的合成方法
        1.3.1 天然肝素
        1.3.2 生物學(xué)方法合成
        1.3.3 化學(xué)方法合成
    1.4 課題的提出
        1.4.1 研究的目的及意義
        1.4.2 研究?jī)?nèi)容
第二章 溫敏性PNMS水凝膠對(duì)BMSC成骨分化的研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.3 2-(甲基丙烯酰胺基)葡萄糖胺(MAG)的合成
        2.2.4 溫敏性PNMS水凝膠的制備
        2.2.5 溫敏性PNMS水凝膠的表征與測(cè)試
        2.2.6 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.7 溫敏性PNMS水凝膠生物相容性表征
        2.2.8 PNMS水凝膠對(duì)BMSC向成骨細(xì)胞分化的影響
        2.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 溫敏性PNMS水凝膠紅外光譜表征
        2.3.2 溫敏性水凝膠表面形貌表征
        2.3.3 溫敏性水凝膠溶脹率(SR)表征
        2.3.4 溫敏性水凝膠溶脹性能表征
        2.3.5 溫敏性PNMS水凝膠細(xì)胞粘附表征
        2.3.6 溫敏性PNMS水凝膠對(duì)BMSC成骨分化的影響
    2.4 本章小結(jié)
第三章 AuNP-PMS/FGF2三元復(fù)合物促進(jìn)mESC向神經(jīng)分化
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.3 類(lèi)肝素糖聚物PMS的合成
        3.2.4 巰基化類(lèi)肝素糖聚物PMS-SH的合成
        3.2.5 含熒光素的巰基化類(lèi)肝素糖聚物的合成
        3.2.6 金納米粒子的合成
        3.2.7 AuNP-PMSF自組裝效率的檢測(cè)
        3.2.8 AuNP-PMS/FGF2三元復(fù)合物的制備
        3.2.9 AuNP-PMSR/FGF2復(fù)合物驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
        3.2.10 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.11 L929細(xì)胞相容性表征
        3.2.12 AuNP-PMS/FGF2三元復(fù)合物對(duì)mESC增殖的影響
        3.2.13 AuNP-PMS/FGF2三元復(fù)合物對(duì)mESC向神經(jīng)分化的影響
        3.2.14 FGF2結(jié)合試驗(yàn)
        3.2.15 FGF2的濃度對(duì)mESC向神經(jīng)分化的影響
        3.2.16 FGF2的濃度對(duì)L929毒性的表征
        3.2.17 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 類(lèi)肝素糖聚物的合成與表征
        3.3.2 熒光法檢測(cè)AuNP-PMSF自組裝效率
        3.3.3 AuNP-PMS的制備與表征
        3.3.4 AuNP-PMS/FGF2三元復(fù)合物的制備與表征
        3.3.5 L929細(xì)胞相容性表征
        3.3.6 AuNP-PMS/FGF2三元復(fù)合物對(duì)mESC增殖的影響
        3.3.7 AuNP-PMS/FGF2三元復(fù)合物對(duì)mESC向神經(jīng)分化的影響
        3.3.8 FGF2結(jié)合試驗(yàn)
        3.3.9 FGF2的濃度對(duì)mESC向神經(jīng)分化的影響
        3.3.10 FGF2的濃度對(duì)L929毒性的表征
    3.4 本章小結(jié)
第四章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
碩士論文工作期間科研成果
附錄
致謝



本文編號(hào):3816122

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