右旋糖酐是一種聚D-葡萄糖,其葡萄糖殘基以α-1,6-糖苷鍵連接成主鏈,支鏈則由葡萄糖殘基或葡萄糖鏈(簡(jiǎn)單或復(fù)雜的)以α-1,2-、α-1,3-或α-1,4-糖苷鍵連接在主鏈上,主要用途包括代血漿藥物、益生元、藥物基質(zhì)或載體等。右旋糖酐傳統(tǒng)生產(chǎn)工藝是利用微生物發(fā)酵蔗糖產(chǎn)生大分子右旋糖酐后,通過(guò)酸解將其分子量降低到一定范圍,再精制而得。本研究將開(kāi)發(fā)一種新工藝,在發(fā)酵過(guò)程中加入右旋糖酐酶,使發(fā)酵結(jié)束時(shí)右旋糖酐的分子量處于較低、較窄范圍。新工藝主要優(yōu)點(diǎn)有二,一是省去酸解和中和工藝,免去強(qiáng)酸強(qiáng)堿使用,精簡(jiǎn)工藝流程;二是降低發(fā)酵液粘度,提高發(fā)酵效率。右旋糖酐酶在新工藝中發(fā)揮核心作用,其酶活可通過(guò)與底物溶液(含2 g/d L dextran T-2150的Na₂HPO₄-KH₂PO₄緩沖液)反應(yīng)后用DNS法測(cè)定還原端增量的方法測(cè)定。在單因素試驗(yàn)中,測(cè)得其最適反應(yīng)溫度、p H、離子強(qiáng)度分別是60/65°C(無(wú)顯著性差異)、5.5、0.015 mol/L。在模擬發(fā)酵條件(dextran T-2150、蔗糖、細(xì)菌學(xué)蛋...

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 右旋糖酐酶
        1.1.1 右旋糖酐酶的概況
        1.1.2 右旋糖酐酶的應(yīng)用
        1.1.3 廣東省生物工程研究所右旋糖酐酶開(kāi)發(fā)概況
    1.2 右旋糖酐
        1.2.1 右旋糖酐的概況及應(yīng)用
        1.2.2 右旋糖酐的生產(chǎn)
    1.3 右旋糖酐酶在右旋糖酐生產(chǎn)中的應(yīng)用概況
    1.4 課題意義、來(lái)源及主要研究?jī)?nèi)容
        1.4.1 課題意義及來(lái)源
        1.4.2 主要研究?jī)?nèi)容
第二章 右旋糖酐酶的酶學(xué)性質(zhì)研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路和設(shè)計(jì)計(jì)算
        2.1.1 右旋糖酐酶酶活測(cè)定方法的選擇
        2.1.2 酶促反應(yīng)體系的設(shè)計(jì)計(jì)算及酶活測(cè)定方法的建立
        2.1.3 右旋糖酐酶K_m值的測(cè)定
    2.2 儀器與試劑
        2.2.1 儀器
        2.2.2 試劑
    2.3 方法
        2.3.1 葡萄糖、dextran T-2150 的水分測(cè)定
        2.3.2 各種溶液的配制
        2.3.3 DNS法葡萄糖質(zhì)量-吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        2.3.4 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.3.5 酶活測(cè)定方法的建立和右旋糖酐酶酶活定義及測(cè)定
        2.3.6 右旋糖酐酶在模擬右旋糖酐發(fā)酵過(guò)程中的酶學(xué)表現(xiàn)
        2.3.7 右旋糖酐酶在最適條件和實(shí)際應(yīng)用條件的K_m值測(cè)定
        2.3.8 模擬發(fā)酵結(jié)束后滅活條件對(duì)酶活的影響
        2.3.9 條件恢復(fù)對(duì)右旋糖酐酶的酶活影響
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 葡萄糖、dextran T-2150 的水分測(cè)定
        2.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        2.4.3 單因素試驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.4.4 右旋糖酐酶酶液的酶活測(cè)定
        2.4.5 右旋糖酐酶在模擬右旋糖酐發(fā)酵條件的酶活力
        2.4.6 右旋糖酐酶K_m值的測(cè)定
        2.4.7 模擬發(fā)酵結(jié)束后滅活條件對(duì)酶活的影響
        2.4.8 條件恢復(fù)對(duì)右旋糖酐酶的酶活影響
    2.5 小結(jié)
第三章 酶解過(guò)程右旋糖酐分子量變化規(guī)律研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路和設(shè)計(jì)計(jì)算
        3.1.1 右旋糖酐分子量的測(cè)定
        3.1.2 模擬邊合成邊水解的新工藝過(guò)程
        3.1.3 加酶量的計(jì)算
    3.2 儀器與試劑
        3.2.1 儀器
        3.2.2 試劑
    3.3 方法
        3.3.1 右旋糖酐分子量測(cè)定方法的建立及分子量的測(cè)定
        3.3.2 小分子水解物的液相色譜分析
        3.3.3 T-2150的分子量測(cè)定
        3.3.4 右旋糖酐酸解規(guī)律探究
        3.3.5 右旋糖酐酶解規(guī)律探究
        3.3.6 模擬邊合成邊水解工藝的右旋糖酐分子量變化
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 右旋糖酐分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.4.2 小分子水解物標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.4.3 右旋糖酐酸解和酶解規(guī)律研究
        3.4.4 模擬邊合成邊水解工藝的右旋糖酐分子量變化
    3.5 小結(jié)
第四章 右旋糖酐發(fā)酵新工藝的研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路和設(shè)計(jì)計(jì)算
        4.1.1 發(fā)酵菌種和發(fā)酵條件
        4.1.2 分析發(fā)酵狀態(tài)的指標(biāo)
        4.1.3 新工藝開(kāi)發(fā)思路
    4.2 儀器與試劑
        4.2.1 儀器
        4.2.2 菌種和試劑
    4.3 方法
        4.3.1 培養(yǎng)基的配制
        4.3.2 種子液的培養(yǎng)
        4.3.3 傳統(tǒng)工藝的發(fā)酵狀態(tài)研究
        4.3.4 新工藝的發(fā)酵狀態(tài)和產(chǎn)物分子量分布研究
        4.3.5 各指標(biāo)的檢測(cè)方法
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 蔗糖、果糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線
        4.4.2 傳統(tǒng)工藝和新工藝的發(fā)酵狀態(tài)對(duì)比
        4.4.3 傳統(tǒng)工藝和新工藝的右旋糖酐分子量分布對(duì)比
    4.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號(hào)：3811591