固定床生物反應(yīng)器由于其剪切力低、貼附面積大、可低密度接種等優(yōu)點(diǎn)被廣泛地應(yīng)用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。但固定床生物反應(yīng)器缺少合適的縮小模型用于前期工藝優(yōu)化,并且存在設(shè)備結(jié)構(gòu)復(fù)雜、細(xì)胞分布不均、通氣易產(chǎn)生泡沫等問題,因而限制了其在生物制品領(lǐng)域中的應(yīng)用。針對上述問題,本研究創(chuàng)新研發(fā)了固定床生物反應(yīng)器縮小模型（tube-fixed-bed bioreactor,TFB反應(yīng)器）以及新型固定床生物反應(yīng)器（Xcell反應(yīng)器）。通過對Xcell反應(yīng)器結(jié)構(gòu)優(yōu)化以及操作方式優(yōu)化,使固定床中細(xì)胞分布均勻;設(shè)計新型的“瀑布式”傳氧策略實現(xiàn)Xcell反應(yīng)器無泡通氣。通過優(yōu)化TFB反應(yīng)器與Xcell反應(yīng)器中Vero細(xì)胞的培養(yǎng)工藝,并分析含血清培養(yǎng)與無血清培養(yǎng)下Vero細(xì)胞的生長與代謝,驗證了Vero細(xì)胞培養(yǎng)工藝從TFB反應(yīng)器規(guī)模放大至Xcell反應(yīng)器的可行性;并進(jìn)一步建立了基于TFB反應(yīng)器與Xcell反應(yīng)器的固定床生物反應(yīng)器scale-down/scale-up平臺�；谠撈脚_,快速完成了Vero細(xì)胞源豬偽狂犬病毒（pseudorabies virus,PRV）擴(kuò)增工藝的優(yōu)化以及工藝放大,為PRV疫苗的研發(fā)與生產(chǎn)提供了新... 

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

糖萼（細(xì)胞被）結(jié)構(gòu)示意圖

細(xì)胞貼附原理示意圖

微載體與片狀載體對比

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬流行性腹瀉病毒細(xì)胞適應(yīng)毒LJB-03株在三種Vero細(xì)胞上增殖效果的比較[J]. 郭衛(wèi)龍,解偉純,侯星宇,李智力,姜艷平,崔文,王麗,喬薪瑗,周晗,徐義剛,李一經(jīng),唐麗杰.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2019(03)
[2]人源化抗血管內(nèi)皮生長因子單克隆抗體在CHO K1細(xì)胞中的表達(dá)及鑒定[J]. 周朋,張琨,許磊濤,葉藝,孔茜,楊帥,彭玲,黃穎,孔健.  中國生物制品學(xué)雜志. 2018(11)
[3]無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)Vero細(xì)胞制備狂犬病病毒工藝的建立[J]. 孫燕,張香玲,陳軍,劉鵬,馬超,張生琰,李薇.  中國生物制品學(xué)雜志. 2016(10)
[4]Vero細(xì)胞無血清培養(yǎng)基的研究進(jìn)展[J]. 張香玲,李薇.  微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 2015(02)
[5]用于重組蛋白生產(chǎn)的哺乳動物細(xì)胞表達(dá)新技術(shù)[J]. 勾藍(lán)圖,楊金亮.  生物技術(shù)通訊. 2012(06)
[6]細(xì)胞工廠在水痘疫苗生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]. 王亮,楊月蓮,周鋒,謝蕾,孫世杰,彭曉,周翎喬,馬相虎.  中國新藥雜志. 2012(10)
[7]4種病毒在細(xì)胞上達(dá)最大吸附量所需時間測定[J]. 張晉強(qiáng),牛麗,宋美琴,白喜云.  山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2011(04)
[8]無血清培養(yǎng)MDCK細(xì)胞生產(chǎn)狂犬病病毒條件的初步優(yōu)化[J]. 樊慶帥,牛紅星,吳書軍,張旭,譚文松.  中國生物制品學(xué)雜志. 2009(11)
[9]在無血清培養(yǎng)基中代謝副產(chǎn)物對雜交瘤細(xì)胞生長代謝的影響I.乳酸的作用[J]. 張立,金亦輝,張元興.  華東理工大學(xué)學(xué)報. 2002(02)

博士論文
[1]重組凝血因子VII在CHO細(xì)胞中的高效表達(dá)[D]. 彭林.江南大學(xué) 2017
[2]偽狂犬病病毒DNA聚合酶入核轉(zhuǎn)運(yùn)的分子機(jī)制[D]. 王一平.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[3]基于MDCK細(xì)胞高密度培養(yǎng)的甲型流感病毒疫苗生產(chǎn)工藝開發(fā)與優(yōu)化[D]. 黃錠.華東理工大學(xué) 2016

碩士論文
[1]豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白在CHO-K1細(xì)胞系中的真核表達(dá)及鑒定[D]. 武樂祎.鄭州大學(xué) 2019
[2]銀杏外種皮多糖抑制新城疫病毒作用的研究[D]. 夏前賢.揚(yáng)州大學(xué) 2017
[3]Vero細(xì)胞無血清培養(yǎng)基的研制及其在流感病毒培養(yǎng)中的應(yīng)用[D]. 段盼盼.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2015
[4]基于工業(yè)化生產(chǎn)的治療用單克隆抗體上游制備及放大工藝研究[D]. 許峰.蘇州大學(xué) 2014
[5]動物細(xì)胞培養(yǎng)用生物反應(yīng)器內(nèi)流體混合及氣液傳質(zhì)特性研究[D]. 鄭兵兵.華東理工大學(xué) 2013
[6]激流式生物反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)IBDV及制備高效滅活疫苗的研究[D]. 周欣.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[7]旋轉(zhuǎn)式生物反應(yīng)器內(nèi)微載體培養(yǎng)擴(kuò)增皮膚相關(guān)細(xì)胞及微粒皮膚的初步制備[D]. 晁洋.第四軍醫(yī)大學(xué) 2011



本文編號：3703609