構(gòu)建一種能有效介導(dǎo)目的基因表達(dá),對正常組織細(xì)胞低毒,并能抗血漿蛋白非特異性吸附的基因傳遞載體,是腫瘤基因治療領(lǐng)域的重要課題。生長抑制因子4（ING4）和白介素-24（IL-24）基因分別能夠從細(xì)胞內(nèi)、外兩條途徑抑制腫瘤細(xì)胞生長。柞蠶絲素蛋白具備良好的生物相容性,可被生物降解。聚乙二醇（PEG）具有抗血漿蛋白的非特異性吸附的能力。在PEG支鏈上接枝基質(zhì)金屬蛋白酶敏感肽（MMP2敏感肽,序列為GPLGIAGQC）后,PEG鏈可在腫瘤細(xì)胞外高度表達(dá)的MMP2的作用下斷裂,從而增強腫瘤細(xì)胞對復(fù)合物顆粒的內(nèi)化作用。本文的目的是構(gòu)建一種以柞蠶絲素蛋白為基礎(chǔ)的新型ING4-IL-24雙基因共表達(dá)質(zhì)粒傳遞載體。為了降低非特異性吸附,延長載體的體內(nèi)循環(huán)時間,在該載體的表面接枝PEG-MMP2敏感肽支鏈。當(dāng)載體到達(dá)高表達(dá)MMP2的腫瘤細(xì)胞表面后,載體表面的PEG鏈可在MMP2作用下斷裂。為了實現(xiàn)上述目標(biāo),本文首先用分枝狀低分子量聚乙烯亞胺（PEI）對柞蠶絲素蛋白（ASF）進行化學(xué)改性,使柞蠶絲素蛋白的表面由帶負(fù)電荷翻轉(zhuǎn)為帶大量正電荷,制得陽離子化柞蠶絲素蛋白（CASF）。再將PEG-MMP2敏感肽共價接枝... 

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２經(jīng)不同質(zhì)量ＰＥＩ改性后的柞蠶絲素蛋白的Ｚｅｔａ電位??如圖２－２所示，純ＡＳＦ溶液的表面Ｚｅｔａ電位值為－１０．８±０．２９?ｍＶ

圖２－３?ＰＥＩ、ＡＳＦ及ＣＡＳＦ的紅外吸收光譜??紅外吸收光譜是用來研究絲素蛋白的酰胺峰位置和強度的主要測試方法，且能夠??很好地反應(yīng)絲素蛋白的分子構(gòu)象情況

圖２４經(jīng)ＰＥＩ改性前后柞蠶絲素蛋白的等電點??（ａ）ＡＳＦ；?（ｂ）ＣＡＳＦ〇??蛋白質(zhì)溶液在某一?ｐＨ值條件下解離成正、負(fù)離子的趨勢相等即凈電荷為零，此??Ｈ８４


本文編號：3660422