油脂是人類膳食中重要的組成部分,一方面為機(jī)體提供能量,另一方面發(fā)揮著特殊的健康作用。近年來(lái),過多的攝入脂肪和其他的不良生活習(xí)慣會(huì)導(dǎo)致肥胖,進(jìn)而引起一系列的疾病。中長(zhǎng)鏈脂肪酸甘油三酯（Medium-and long-chain triacylglycerols,MLCT）是一類特殊的結(jié)構(gòu)脂質(zhì),可以為機(jī)體供能的同時(shí)避免脂肪堆積。市場(chǎng)上的MLCT大多是以辛癸酸為原料合成的,且沒有特定的分子結(jié)構(gòu)。本研究以月桂酸、棕櫚硬脂和藻油為原料,酶法合成兩種MLM型（Middle-long-middle,MLM）MLCT,分別是富含1,3-二月桂酸-2-棕櫚酸甘油三酯（1,3-lauric-2-palmitoylglycerol,LaPLa）和富含月桂酸及二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic Acid,DHA）的MLCT。并通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究富含LaPLa的MLCT對(duì)小鼠脂代謝的影響。研究的主要結(jié)果如下:（1）富含LaPLa的MLCT酶法制備及理化性質(zhì)分析:以LaPLa的含量為指標(biāo),利用sn-1,3位特異性脂肪酶催化月桂酸酸解棕櫚硬脂合成目的產(chǎn)物。比較了三種脂肪酶（RM IM、TL IM、AO I... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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不同鏈長(zhǎng)的脂肪酸甘油三酯的代謝過程

河北科技大學(xué)碩士學(xué)位論文14脂肪酸種類較少，不含有月桂酸，其棕櫚酸的含量達(dá)到73.71%，sn-2位上的棕櫚酸含量也達(dá)到了66.83%。這種sn-2位上含有大量棕櫚酸的特殊結(jié)構(gòu)，成為能合成高含量的LaPLa的基矗根據(jù)脂肪酸組成和含量，計(jì)算出棕櫚硬脂平均分子摩爾質(zhì)量為826.06。理化性質(zhì)中過氧化值和酸價(jià)符合食用油標(biāo)準(zhǔn)，該棕櫚硬脂可以使用。表2-1棕櫚硬脂脂肪酸組成脂肪酸種類總脂肪含量（%）Sn-2位脂肪酸含量（%）C14:00.90±0.02－C16:073.71±0.1366.83±0.24C18:04.41±0.032.84±0.04C18:117.12±0.0522.64±0.14C18:23.52±0.067.69±0.06其他0.25±0.02－2.2.2富含LaPLa的MLCT酶法制備2.2.2.1合成富含LaPLa的MLCT的酶篩選反應(yīng)條件:底物摩爾比1:8（棕櫚硬脂：月桂酸），酶載量8%（w/w），溫度60℃，恒溫水浴振蕩器轉(zhuǎn)速200rmp，反應(yīng)達(dá)到LaPLa含量不再顯著性增加。圖2-13種脂肪酶對(duì)富含LaPLa的MLCT合成的影響。脂肪酶的選取原則首先是活性強(qiáng)，其次是能達(dá)到特殊的反應(yīng)要求，如本研究是將月桂酸盡可能的摻入甘油三酯的sn-1,3位。原料中使用的是熔點(diǎn)為58℃棕櫚硬脂，所以將3種酶的溫度都設(shè)在60℃，其他條件也一致。由圖2-1可以看出，3種酶表現(xiàn)出了不同的活力和反應(yīng)程度，即反應(yīng)速率和終產(chǎn)物含量。其中TLIM酶的活力和反應(yīng)程度最低，LaPLa含量上升速度較慢，在最后反應(yīng)達(dá)到平衡（LaPLa含量不再顯著性升高）時(shí)，其LaPLa含量較低，約為（22.51±0.41）%。RMIM和AOIM兩

第2章富含LaPLa的MLCT酶法制備及理化性質(zhì)分析15種酶在反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)，其LaPLa含量沒有顯著性差異，分別是（32.78±0.50）%和（32.38±0.30）%，但前者的反應(yīng)時(shí)間要遠(yuǎn)遠(yuǎn)長(zhǎng)于后者，分別是8h和4h，AOIM表現(xiàn)出了很高的催化效率。在這里需要注意的是，AOIM隨著反應(yīng)的進(jìn)行，LaPLa含量會(huì)下降，這是因?yàn)橛腥鹿鹚岣视王?LaLaLa)的生成。試驗(yàn)中，當(dāng)LaPLa含量趨于平衡時(shí)，隨著反應(yīng)繼續(xù)進(jìn)行，LaLaLa開始生成且含量越來(lái)越高，這可能是因?yàn)榉磻?yīng)過程中出現(xiàn)了�；w移，以及過高的月桂酸影響了脂肪酶特異性，與Zhang[71]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符合，下文工藝優(yōu)化中LaPLa含量最后下降也是這個(gè)原因。綜合來(lái)看，控制好反應(yīng)時(shí)間，AOIM性能優(yōu)異，可以滿足此合成工藝，后期工藝優(yōu)化選取AOIM作為生物催化劑。2.2.2.2合成工藝條件對(duì)LaPLa含量的影響（1）反應(yīng)溫度對(duì)LaPLa含量的影響棕櫚硬脂與月桂酸混合，使整個(gè)反應(yīng)體系熔點(diǎn)降低，在50℃下也能熔融。溫度一方面會(huì)影響體系的粘度，進(jìn)而影響分子之間的相互作用，另一方面會(huì)影響酶的活力[72]。由圖2-2的反應(yīng)曲線可以看出，隨著溫度從50℃不斷地提高，酶的活力越來(lái)越強(qiáng)，反應(yīng)達(dá)到平衡所用的時(shí)間越來(lái)越短，65℃時(shí)達(dá)到頂值，為3h，此溫度下酶的活力最強(qiáng)。當(dāng)達(dá)到70℃時(shí)酶的活力下降，反應(yīng)平衡時(shí)間延長(zhǎng)，反應(yīng)速率降低。這可能是因?yàn)闇囟冗^高，使部分酶失活，整體催化能力降低。所以65℃下可以得到更高LaPLa含量的MLCT，同時(shí)反應(yīng)時(shí)間最短，選擇65℃作為酶催化合成試驗(yàn)的下一步試驗(yàn)的溫度條件。反應(yīng)條件:底物摩爾比1:8（棕櫚硬脂：月桂酸），酶載量4%（w/w），反應(yīng)溫度分別為50℃、55℃、60℃、65℃、70℃，恒溫水浴振蕩器轉(zhuǎn)速200rmp，反應(yīng)時(shí)間8h。圖2-2反應(yīng)溫度對(duì)LaPLa含量的影響。

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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