載蝦青素海藻酸鈣微球體外抗肝癌機制探究
發(fā)布時間:2021-12-16 18:39
蝦青素(astaxanthin,AST)是一種抗氧化能力極強的膳食類類胡蘿卜素,由于其對癌癥等疾病的潛在益處而引起了科學(xué)界極大的興趣。這種優(yōu)勢與蝦青素分子結(jié)構(gòu)中存在的大量不飽和鍵密切相關(guān),然而由于這些不飽鍵的存在同時導(dǎo)致其在高溫、光照、酸性條件下易被氧化,蝦青素的不穩(wěn)定性降低了蝦青素的生物利用度。另外,與大多數(shù)類胡蘿卜素相似,蝦青素在水中溶解度極低。蝦青素的生物局限性不僅限制了蝦青素的應(yīng)用,而且還限制了蝦青素抗癌機制的探究。針對上述問題,本研究采用改性乳液技術(shù)制備海藻酸鈣(可生物降解材料)微球作為蝦青素載體,同時選取肝癌細胞(HepG2細胞株)和肝正常細胞(THLE-2細胞株)作為體外肝細胞模型,實驗對比蝦青素干預(yù)前后兩種細胞系的細胞行為,并對其內(nèi)在機制進行了探討。本研究首先采用雙乳液法制備載蝦青素海藻酸鈣(ACA)微球,與未包封的蝦青素相比,所制備的載蝦青素海藻酸鈣微球具有更高的貯存穩(wěn)定性和抗氧化能力,ACA微球粒徑均一,平均粒徑為724 nm?紤]人體吸收系統(tǒng),并在ACA微球基礎(chǔ)上探究制備載蝦青素海藻酸鈣/殼聚糖復(fù)合(ACAC)微球的最佳制備條件。結(jié)果表明,使用0.1%(w/v)的...
【文章來源】:大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
1 文獻綜述
1.1 蝦青素簡介及研究現(xiàn)狀
1.1.1 蝦青素結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
1.1.2 蝦青素的發(fā)展前景
1.1.3 蝦青素的應(yīng)用局限
1.1.4 蝦青素的結(jié)構(gòu)修飾及物理包合
1.2 海藻酸鈣及殼聚糖載藥微球系統(tǒng)的研究現(xiàn)狀
1.2.1 載藥微球技術(shù)簡介
1.2.2 海藻酸鈉及殼聚糖的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)
1.2.3 微球的制備途徑
1.2.4 乳化凝膠法制備微球
1.2.5 海藻酸鈣/殼聚糖微球的應(yīng)用
1.3 蝦青素抗癌研究進展
1.3.1 肝癌概述
1.3.2 肝癌惡性糖代謝概述
1.3.3 蝦青素抗癌效果研究現(xiàn)狀
1.4 論文的選題依據(jù)及研究內(nèi)容
2.載蝦青素海藻酸鈣微球的制備與性能研究
2.1 實驗儀器及材料
2.1.1 實驗儀器及設(shè)備
2.1.2 實驗藥品及試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 載蝦青素微球的制備流程
2.2.2 蝦青素的定量檢測
2.2.3 載蝦青素微球表征
2.2.4 載蝦青素微球載藥量和包載率測試
2.2.5 載蝦青素微球的體外釋放性能測試
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 蝦青素/的定量分析
2.3.2 載蝦青素海藻酸鈣微球的表征
2.3.3 載蝦青素微球載藥量和包載率
2.3.4 載蝦青素海藻酸鈣/殼聚糖微球體外釋放性能
2.4 小結(jié)
3 載蝦青素海藻酸鈣微球抗肝癌效果探究
3.1 實驗儀器與材料
3.1.1 細胞系的選擇
3.1.2 藥品與試劑
3.1.3 試劑配制
3.1.4 實驗儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 細胞培養(yǎng)及凍存
3.2.2 血球計數(shù)法測定細胞活性
3.2.3 海藻酸鈣微球細胞毒性測試方法
3.2.4 載蝦青素海藻酸鈣微球抗肝癌測試方法
3.2.5 細胞內(nèi)活性氧含量的測定
3.2.6 細胞凋亡檢測方法
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 海藻酸鈣微球細胞毒性測試結(jié)果
3.3.2 載蝦青素海藻酸鈣微球抗肝癌測試結(jié)果
3.3.3 蝦青素干預(yù)后細胞內(nèi)活性氧含量變化
3.3.4 蝦青素干預(yù)后細胞凋亡結(jié)果
3.4 本章小結(jié)
4 載蝦青素海藻酸鈣微球抗肝癌作用機制探究
4.1 實驗材料與儀器
4.1.1 藥品與試劑
4.1.2 實驗儀器
4.1.3 設(shè)計與合成的引物
4.2 實驗方法
4.2.1 RNA的提取
4.2.2 cDNA合成
4.2.3 RT-PCR反應(yīng)
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 蝦青素對糖酵解過程的影響
4.3.2 蝦青素對三羧酸循環(huán)過程(TCA cycle)的影響
4.3.3 蝦青素對糖異生過程的影響
4.3.4 蝦青素對磷酸戊糖途徑的影響
4.3.5 蝦青素對甘油合成途徑的影響
4.3.6 蝦青素對脂肪酸和膽固醇生物合成途徑的影響
4.4 本章小結(jié)
結(jié)論
創(chuàng)新點與展望
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]雨生紅球藻中蝦青素的提取及穩(wěn)定性研究[J]. 王紅霞,楊雯,田洪,連運河,胡曉梅,武亞明. 中國食品添加劑. 2015(02)
[2]超臨界CO2萃取-反相高效液相色譜測定海南對蝦殼中蝦青素的含量[J]. 周雪晴,馮玉紅,謝艷麗,趙振東. 海南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2011(01)
[3]蝦青素抗氧化作用動物實驗研究[J]. 楊艷,周宇紅,徐海濱,張立實. 現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2009(13)
[4]喇蛄(大頭蝦)殼蝦青素提取工藝研究[J]. 杜春霖. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(02)
[5]蝦青素的提取及其穩(wěn)定性的研究[J]. 張影霞,武利剛,羅志輝,林起,段杉. 現(xiàn)代食品科技. 2008(12)
[6]酸法破壁條件對法夫酵母蝦青素提取效果的影響[J]. 倪輝,何國慶,吳光斌,楊遠帆,陳申如,蔡慧農(nóng). 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報. 2005(03)
[7]國內(nèi)外蝦青素的研究進展[J]. 張明祥,趙建國. 糧食與飼料工業(yè). 2002(01)
碩士論文
[1]雨生紅球藻的培養(yǎng)及其蝦青素的提取、穩(wěn)定性和應(yīng)用研究[D]. 黃水英.廈門大學(xué) 2008
本文編號:3538631
【文章來源】:大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
1 文獻綜述
1.1 蝦青素簡介及研究現(xiàn)狀
1.1.1 蝦青素結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
1.1.2 蝦青素的發(fā)展前景
1.1.3 蝦青素的應(yīng)用局限
1.1.4 蝦青素的結(jié)構(gòu)修飾及物理包合
1.2 海藻酸鈣及殼聚糖載藥微球系統(tǒng)的研究現(xiàn)狀
1.2.1 載藥微球技術(shù)簡介
1.2.2 海藻酸鈉及殼聚糖的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)
1.2.3 微球的制備途徑
1.2.4 乳化凝膠法制備微球
1.2.5 海藻酸鈣/殼聚糖微球的應(yīng)用
1.3 蝦青素抗癌研究進展
1.3.1 肝癌概述
1.3.2 肝癌惡性糖代謝概述
1.3.3 蝦青素抗癌效果研究現(xiàn)狀
1.4 論文的選題依據(jù)及研究內(nèi)容
2.載蝦青素海藻酸鈣微球的制備與性能研究
2.1 實驗儀器及材料
2.1.1 實驗儀器及設(shè)備
2.1.2 實驗藥品及試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 載蝦青素微球的制備流程
2.2.2 蝦青素的定量檢測
2.2.3 載蝦青素微球表征
2.2.4 載蝦青素微球載藥量和包載率測試
2.2.5 載蝦青素微球的體外釋放性能測試
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 蝦青素/的定量分析
2.3.2 載蝦青素海藻酸鈣微球的表征
2.3.3 載蝦青素微球載藥量和包載率
2.3.4 載蝦青素海藻酸鈣/殼聚糖微球體外釋放性能
2.4 小結(jié)
3 載蝦青素海藻酸鈣微球抗肝癌效果探究
3.1 實驗儀器與材料
3.1.1 細胞系的選擇
3.1.2 藥品與試劑
3.1.3 試劑配制
3.1.4 實驗儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 細胞培養(yǎng)及凍存
3.2.2 血球計數(shù)法測定細胞活性
3.2.3 海藻酸鈣微球細胞毒性測試方法
3.2.4 載蝦青素海藻酸鈣微球抗肝癌測試方法
3.2.5 細胞內(nèi)活性氧含量的測定
3.2.6 細胞凋亡檢測方法
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 海藻酸鈣微球細胞毒性測試結(jié)果
3.3.2 載蝦青素海藻酸鈣微球抗肝癌測試結(jié)果
3.3.3 蝦青素干預(yù)后細胞內(nèi)活性氧含量變化
3.3.4 蝦青素干預(yù)后細胞凋亡結(jié)果
3.4 本章小結(jié)
4 載蝦青素海藻酸鈣微球抗肝癌作用機制探究
4.1 實驗材料與儀器
4.1.1 藥品與試劑
4.1.2 實驗儀器
4.1.3 設(shè)計與合成的引物
4.2 實驗方法
4.2.1 RNA的提取
4.2.2 cDNA合成
4.2.3 RT-PCR反應(yīng)
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 蝦青素對糖酵解過程的影響
4.3.2 蝦青素對三羧酸循環(huán)過程(TCA cycle)的影響
4.3.3 蝦青素對糖異生過程的影響
4.3.4 蝦青素對磷酸戊糖途徑的影響
4.3.5 蝦青素對甘油合成途徑的影響
4.3.6 蝦青素對脂肪酸和膽固醇生物合成途徑的影響
4.4 本章小結(jié)
結(jié)論
創(chuàng)新點與展望
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]雨生紅球藻中蝦青素的提取及穩(wěn)定性研究[J]. 王紅霞,楊雯,田洪,連運河,胡曉梅,武亞明. 中國食品添加劑. 2015(02)
[2]超臨界CO2萃取-反相高效液相色譜測定海南對蝦殼中蝦青素的含量[J]. 周雪晴,馮玉紅,謝艷麗,趙振東. 海南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2011(01)
[3]蝦青素抗氧化作用動物實驗研究[J]. 楊艷,周宇紅,徐海濱,張立實. 現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2009(13)
[4]喇蛄(大頭蝦)殼蝦青素提取工藝研究[J]. 杜春霖. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(02)
[5]蝦青素的提取及其穩(wěn)定性的研究[J]. 張影霞,武利剛,羅志輝,林起,段杉. 現(xiàn)代食品科技. 2008(12)
[6]酸法破壁條件對法夫酵母蝦青素提取效果的影響[J]. 倪輝,何國慶,吳光斌,楊遠帆,陳申如,蔡慧農(nóng). 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報. 2005(03)
[7]國內(nèi)外蝦青素的研究進展[J]. 張明祥,趙建國. 糧食與飼料工業(yè). 2002(01)
碩士論文
[1]雨生紅球藻的培養(yǎng)及其蝦青素的提取、穩(wěn)定性和應(yīng)用研究[D]. 黃水英.廈門大學(xué) 2008
本文編號:3538631
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