L-精氨酸主要來(lái)源于食物蛋白、內(nèi)源合成和機(jī)體蛋白的周轉(zhuǎn),具有很多重要的生理功能,包括降低血壓、調(diào)節(jié)血糖、增強(qiáng)人體免疫力等。本文主要內(nèi)容是以His缺陷型黃色短桿菌為基礎(chǔ)出發(fā)菌株,采用復(fù)壯和亞硝基胍誘變篩選獲得高產(chǎn)精氨酸的His缺陷型菌株,通過(guò)ARTP誘變獲得精氨酸類(lèi)似物磺胺胍耐藥性高抗性菌株,解除精氨酸的積累對(duì)代謝的反饋抑制作用,解除高濃度葡萄糖對(duì)菌株的糖抑制作用。通過(guò)對(duì)搖瓶的發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的研究,為精氨酸的工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)提供了必要的前提條件。利用發(fā)酵罐控制發(fā)酵底物葡萄糖濃度的方式進(jìn)一步優(yōu)化發(fā)酵罐培養(yǎng)條件,從而實(shí)現(xiàn)精氨酸發(fā)酵逐級(jí)放大進(jìn)行發(fā)酵工藝驗(yàn)證和優(yōu)化,提高了 L-精氨酸的產(chǎn)率和葡萄糖轉(zhuǎn)化率。對(duì)L-精氨酸分離純化過(guò)程中脫色工藝及離子交換工藝進(jìn)行了優(yōu)化研究,并對(duì)濃縮結(jié)晶后的產(chǎn)品進(jìn)行純度和收率分析,初步確定了 L-精氨酸發(fā)酵液純化工藝制程。1、實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有菌株產(chǎn)L-精氨酸能力為8.3g/L。對(duì)該菌株進(jìn)行了亞硝基胍誘變處理,得到編號(hào)為NTG-19的菌株,產(chǎn)L-精氨酸為10.4g/L,產(chǎn)酸能力提高了 25%。在此菌株的基礎(chǔ)上進(jìn)一步利用ARTP誘變,最終得到一株L-精氨酸菌株ARTP-27,... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１原始菌株的生長(zhǎng)曲線??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｏｒｉｇｉｎａｌ?ｓｔｒａｉｎ??

對(duì)其進(jìn)行ＡＲＴＰ誘變，篩選磺胺胍抗性提高的菌株。ＡＲＴＰ射流區(qū)的活性粒子主??要是處于激發(fā)態(tài)的Ｈｅ、０、Ｎ２、０Ｈ等粒子，其活性粒子的譜線強(qiáng)度遠(yuǎn)高于紫外??誘變強(qiáng)度。誘變時(shí)間時(shí)間與致死率如下圖２．２所示。??黃色短桿菌的致死曲線??１２０－０％?＂?９９．〇％?９９．９％?１００．０％??１００．０％?－?＾—ｔ—■一?丨丨丨丨丨■?＇?？??ｊＴ?９９．５％?１００．０％?１００．０％??＾?８０．０％?１?Ｘ??＾?６０．０％?－?４３．０％／＾??翁?４０．０％?－??２０－０％ｏ．？％＾ｘ，＇＾??０．０％??：??，?；???：?！??０?５０?１００?１５０?２００?２５０?３００???時(shí)間／ｓ?????圖２．２?ＡＲＴＰ誘變致死率曲線??Ｆｉｇｕｒｅ?２．２?ＡＲＴＰ?ｍｕｔａｇｅｎｉｃ?ｌｅｔｈａｌｉｔｙ?ｃｕｒｖｅ??在等離子誘變過(guò)程中，在１２０ｓ內(nèi)隨著誘變時(shí)間的延長(zhǎng)，致死率明顯升高，１２０ｓ??時(shí)致死率達(dá)到９９％，最后繼續(xù)延長(zhǎng)誘變時(shí)間，致死率最終至１００％，因此我們選??擇１００ｓ為合適的誘變時(shí)間。??２．３．２．２?ＡＲＴＰ誘變復(fù)篩??將ＡＲＴＰ誘變后，從磺胺胍抗性平皿中復(fù)篩３１株菌株，與原始菌株的搖瓶??產(chǎn)精氨酸水平的比較，結(jié)果如下圖２．３所示。??復(fù)篩３１株菌株與原始菌株的搖瓶產(chǎn)精氨酸水平的比較??１４?－Ｉ

除去了渣中的大部分半纖維素和木質(zhì)素，保留了大量的纖維素成分，經(jīng)過(guò)纖維素??酶水解后得到葡萄糖溶液。本實(shí)驗(yàn)用木糖工業(yè)廢渣的糖化液以不同比例的替換葡??萄糖，來(lái)驗(yàn)證糖化液是否可以替換葡萄糖的可行性研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖２．４所??７Ｊ＼?〇??１４?－??園圍??￥?丨：ＪＵＬＬｌｕｌ??０％替代?２０％替代４０％替代６０％替代８０％替代１００％替代??葡萄糖替代量??圖２．４玉米芯渣糖化液代替葡萄糖的搖瓶實(shí)驗(yàn)??２６??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]精氨酸酶的高效表達(dá)、性質(zhì)及其產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸的應(yīng)用研究[D]. 黃凱.江南大學(xué) 2017
[2]鈍齒棒桿菌SYPA5-5發(fā)酵產(chǎn)L-精氨酸的代謝工程改造[D]. 徐美娟.江南大學(xué) 2012

碩士論文
[1]產(chǎn)L-精氨酸谷氨酸棒狀桿菌基因工程菌發(fā)酵工藝初步優(yōu)化[D]. 田洪銘.華南理工大學(xué) 2016
[2]L-精氨酸高產(chǎn)菌株發(fā)酵條件的優(yōu)化[D]. 韋云威.濟(jì)南大學(xué) 2014
[3]L-精氨酸高產(chǎn)菌種的選育及發(fā)酵研究[D]. 陳曉博.北京化工大學(xué) 2011
[4]發(fā)酵生產(chǎn)L-精氨酸的微生物育種研究[D]. 伊廷存.山東師范大學(xué) 2011
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[6]L-精氨酸產(chǎn)生菌的選育及其代謝調(diào)控的初步研究[D]. 殷樹(shù)昌.江南大學(xué) 2009
[7]L-精氨酸發(fā)酵條件研究[D]. 劉建成.石河子大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3535980