生物乙醇是潛在的原油替代能源,豐富且不可食用的木質(zhì)纖維素被作為潛在原料用于乙醇生產(chǎn),但纖維素水解液中糠醛、乙酸等成分抑制細(xì)胞生長是纖維素乙醇生產(chǎn)的瓶頸。產(chǎn)甘油假絲酵母（Candida glycerinogenes）具有耐高溫、高糖、高濃度乙酸,抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)。本文以C.glycerinogenes為研究對象,在發(fā)現(xiàn)其微耗氧條件生產(chǎn)乙醇及耐高濃度糠醛的基礎(chǔ)上,圍繞C.glycerinogenes糠醛耐受機(jī)制及木質(zhì)纖維素乙醇發(fā)酵進(jìn)行研究,主要研究如下:（1）經(jīng)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在微耗氧條件下C.glycerinogenes生成62.4 g·L^-1的乙醇,甘油為主要副產(chǎn)物;為了考察其產(chǎn)乙醇性能,通過敲除甘油合成基因CgGPD,構(gòu)建突變株C.glycerinogenes UG21,乙醇產(chǎn)量提高了16.2%;且突變株在高滲透壓、高濃度乙酸等耐受性方面無明顯變化,在低pH、高溫條件下仍保持優(yōu)良的乙醇發(fā)酵性能,40°C條件下乙醇產(chǎn)量達(dá)到最大為76.3 g·L^-1;5 L發(fā)酵罐條件下,通過不同通氣量的研究發(fā)現(xiàn)在0.3 vvm的通氣量時,表現(xiàn)出明顯的乙醇生產(chǎn)優(yōu)勢,乙... 

【文章來源】：江南大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

糠醛原位脫毒Fig.1-1Furfuralinsitudetoxification

驗(yàn)證正確獲得的敲除菌命名為2-1 C. glycerinogenes CgGPD敲除流程圖2-1 The schematic of CgGPD disruption磷酸脫氫酶酶活測定培養(yǎng) 12 h，收集菌體，添加 pH 7.4 的 P渦旋振蕩使細(xì)胞壁破裂。過程：渦旋 30 s、冰上放置低溫離心收集上清備用。酶活測定反應(yīng)體系如表 2.5。30 μL 粗酶液使用酶標(biāo)儀檢測吸光值的變化，其中溫度為 30 °C，波長為 340 nm表 2.5 反應(yīng)體系Table 2.5 Reaction system濃度(mM) 添加量(μL)3100 3HCl buffer 50 1205 603.35 600.45 60滲透壓耐受性檢測UG21分別培養(yǎng)12 h，離心收集菌體，并用600=1，并按照100至10-4進(jìn)行梯度稀釋，3平板上，30 °C 培養(yǎng)2-3 d。葡萄糖濃度分別為°C, 200 r/min 搖瓶

1215DO06000369121518(B)DO06s UA5 在厭氧葡萄糖entation ofls: OD600(squares), glucose (circles), glycerol (triangles),0 10 20 30 40 50 600369lucGseo(/gL)Time (h)03060901201500102030405060Glceyrolg/L)(0102030405060thanoElg/L)(10 20 30 40 50 60Time (h)thanoElg/L)(lyceGolrg/L()lucGseog/()L0306090120150180010203040506070010203040506070(A)、微耗氧(B)條件下的乙醇發(fā)酵性能。(圓形), 甘油 (三角形), 乙醇 (菱形).C. glycerinogenes UA5 under anaerobic (A) )

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]木質(zhì)纖維素原料生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)纖維素乙醇過程的關(guān)鍵技術(shù)研究[D]. 張建.華東理工大學(xué) 2011

碩士論文
[1]產(chǎn)甘油假絲酵母高溫高糖發(fā)酵應(yīng)答研究[D]. 楊飛.江南大學(xué) 2018
[2]微量通氣對馬克斯克魯維酵母發(fā)酵木質(zhì)纖維素水解液的影響[D]. 馮華良.大連理工大學(xué) 2017



本文編號：3431850