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渾濁紅球菌發(fā)酵制備奇數(shù)碳脂肪酸油脂及其代謝通路的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-10-10 03:54
  奇數(shù)碳脂肪酸(odd-carbon fatty acids,OCFA)具有重要的功能特性,在食品、制藥和化工等行業(yè)應(yīng)用廣泛。渾濁紅球菌PD630(Rhodococcus opacus PD630,R.opacus PD630)能夠利用各種有機(jī)化合物作為碳源、具有較高的油脂積累能力且天然條件下能合成較高比例的OCFA。本研究通過向R.opacus PD630發(fā)酵培養(yǎng)基中添加正丙醇顯著提高了OCFA的含量,獲得了一個高產(chǎn)OCFA的工藝,詳細(xì)分析了R.opcus PD630中OCFA油脂的性質(zhì),闡明了OCFA大量合成的代謝通路。具體研究內(nèi)容及結(jié)果如下:(1)OCFA油脂的發(fā)酵制備。采用R.opacus PD630發(fā)酵制備OCFA油脂,發(fā)現(xiàn)正丙醇的添加使OCFA含量顯著提高,得到了一個高產(chǎn)OCFA的工藝。以1%(v/v)正丙醇和葡萄糖作為發(fā)酵碳源時(shí),OCFA占總脂肪酸的比例從29.45%提升至84.51%,增幅達(dá)186.96%。(2)OCFA油脂的組成與熱力學(xué)性質(zhì)研究。本研究中OCFA油脂是R.opacus PD630以正丙醇結(jié)合葡萄糖作碳源,通過100 L發(fā)酵罐和亞臨界萃取技術(shù)生產(chǎn)和提取的。... 

【文章來源】:華南理工大學(xué)廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:95 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 奇數(shù)碳脂肪酸
        1.1.1 自然界中奇數(shù)碳脂肪酸的分布情況
        1.1.2 奇數(shù)碳脂肪酸的功能
            1.1.2.1 定量內(nèi)標(biāo)
            1.1.2.2 作為評估膳食攝入及瘤胃功能的生物標(biāo)志物
            1.1.2.3 藥理特性
            1.1.2.4 作為替代代謝途徑的證據(jù)
            1.1.2.5 其他
        1.1.3 奇數(shù)碳脂肪酸的內(nèi)源性合成途徑
            1.1.3.1 通過延長短鏈奇數(shù)碳脂肪酸合成
            1.1.3.2 通過縮短超長鏈脂肪酸合成
        1.1.4 奇數(shù)碳脂肪酸的生產(chǎn)方式
            1.1.4.1 提取法
            1.1.4.2 化學(xué)合成法
            1.1.4.3 基因工程法
            1.1.4.4 發(fā)酵調(diào)控法
    1.2 渾濁紅球菌
        1.2.1 簡介
        1.2.2 渾濁紅球菌PD630發(fā)酵油脂的特點(diǎn)
        1.2.3 渾濁紅球菌PD630油脂生產(chǎn)及條件
        1.2.4 渾濁紅球菌PD630作為生產(chǎn)菌株
    1.3 本課題研究的意義及主要內(nèi)容
        1.3.1 研究的意義
        1.3.2 研究的主要內(nèi)容
第二章 奇數(shù)碳脂肪酸油脂的發(fā)酵制備
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        2.2.1 菌種
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        2.2.4 主要培養(yǎng)基
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 培養(yǎng)方法
        2.3.2 生物量的測定
        2.3.3 發(fā)酵上清液的分析
        2.3.4 油脂含量的測定
        2.3.5 總脂肪酸的分析
        2.3.6 數(shù)據(jù)分析
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 渾濁紅球菌PD630的基本生長情況及產(chǎn)脂特性分析
        2.4.2 不同碳源對渾濁紅球菌PD630生長及脂肪酸組成的影響
        2.4.3 正丙醇濃度對渾濁紅球菌PD630生長及脂肪酸組成的影響
        2.4.4 添加1%(v/v)正丙醇時(shí)渾濁紅球菌PD630的生長情況及產(chǎn)脂特性
    2.5 本章小結(jié)
第三章 奇數(shù)碳脂肪酸油脂的組成與熱力學(xué)性質(zhì)研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        3.2.1 菌種
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 培養(yǎng)方法
        3.3.2 亞臨界提油
        3.3.3 總脂肪酸分析
        3.3.4 Sn-2位脂肪酸組成分析
        3.3.5 超高壓液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測定甘油三酯組分
        3.3.6 用Visual Basic(VB)軟件計(jì)算甘油三酯組成
        3.3.7 差示掃描量熱法進(jìn)行熱力學(xué)分析
        3.3.8 數(shù)據(jù)分析
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 發(fā)酵和含油量測定結(jié)果
        3.4.2 脂肪酸組成與位置分布
        3.4.3 甘油三酯的種類
        3.4.4 熱力學(xué)性質(zhì)
    3.5 本章小結(jié)
第四章 渾濁紅球菌PD630高產(chǎn)奇數(shù)碳脂肪酸的代謝通路研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        4.2.1 菌種
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        4.2.4 主要培養(yǎng)基
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 培養(yǎng)方法
        4.3.2 正丙醇對渾濁紅球菌PD630的菌體形態(tài)的影響
        4.3.3 代謝組分析
            4.3.3.1 樣品制備
            4.3.3.2 超高效液相色譜串聯(lián)三重四級桿飛行時(shí)間質(zhì)譜分析
            4.3.3.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
        4.3.4 轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析
            4.3.4.1 RNA測序及數(shù)據(jù)處理
            4.3.4.2 測序分析
        4.3.5 數(shù)據(jù)分析
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 正丙醇對渾濁紅球菌PD630的菌體形態(tài)的影響
        4.4.2 代謝組學(xué)分析
            4.4.2.1 代謝組數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析
            4.4.2.2 差異代謝物
        4.4.3 轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
附件



本文編號:3427594

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