微藻是一類能夠進(jìn)行光合自養(yǎng)的生物,富含不飽和脂肪酸,尤其是多不飽和脂肪酸,作為不飽和脂肪酸來源具有良好的發(fā)展前景,既安全、經(jīng)濟(jì),又綠色環(huán)保。課題以不飽和脂肪酸及生物量為指標(biāo)篩選得到了優(yōu)勢藻株,并確定了優(yōu)勢藻株的最佳營養(yǎng)方式與脂肪酸甲酯化工藝參數(shù),同時研究了不同培養(yǎng)條件對優(yōu)勢藻株生長及不飽和脂肪酸積累的影響,在此基礎(chǔ)上,運(yùn)用轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)構(gòu)建了優(yōu)勢藻株中不飽和脂肪酸的生物合成途徑。課題先以海南當(dāng)?shù)氐?0株微藻為篩選對象,比較其生物量、生長速率、總脂含量、總脂產(chǎn)量以及不飽和脂肪酸相對含量。結(jié)果表明,藻株Chlorella vulgaris CJ15生物量、油脂產(chǎn)量較高,油脂含量及不飽和脂肪酸相對含量最高,相對于其他藻株更具開發(fā)潛力。探討了營養(yǎng)方式對優(yōu)勢藻株C.vulgaris CJ15生長的影響,并測定了各生化組分（蛋白質(zhì)、總糖、色素、粗纖維、氨基酸、總脂、脂肪酸）的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)營養(yǎng)方式顯著影響C.vulgaris CJ15的生長及生化組成;且C.vulgaris CJ15無異養(yǎng)能力。培養(yǎng)基中添加葡萄糖混養(yǎng)時C.vulgaris CJ15蛋白質(zhì)及粗纖維的含量最高,分別為6.7%及6.75%... 

【文章來源】：海南大學(xué)海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：107 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

cDNA文庫構(gòu)建流程圖

微藻不飽和脂肪酸積累調(diào)控研究28圖3-110株微藻的生長曲線Fig.3-1Growthcurveof10strainsofmicroalgae表3-110株微藻的生物量及比生長速率Table3-1Biomassandspecificgrowthrateof10strainsofmicroalgae藻株編號生物量（gL-1）比生長速率（d-1）XSO42.11±0.01e0.7±0.03dWC011.87±0.13f0.58±0.06eCJ153.51±0.04c1.21±0.02bB91.83±0.17f0.55±0.01efB312.44±0.09d0.84±0.02cB383.98±0.02b1.33±0.04aB431.75±0.11f0.51±0.06fC111.52±0.05g0.43±0.05gC221.24±0.11h0.17±0.01hC674.16±0.07a1.37±0.01a3.1.2富油藻株篩選油脂是微藻的一種初級代謝產(chǎn)物，大量研究表明微藻在特定條件下能夠積累豐富的油脂。圖3-2反映了10株實(shí)驗(yàn)藻種的油脂積累情況。10株微藻均能貯存油脂，但油脂儲存能力各異。油脂含量超過30%的微藻通常稱為富油微藻（Demirbas.,2011）。由圖3-2可以看出藻株CJ15、C22及C67油脂含量均超過30%，分別為31.49±0.23%,30.46±0.33%和30.61±0.27%，說明這三種藻株能積累較多的油脂。其余7株藻株，除了藻株WCO1油脂含量（26.11±0.09%）超過20%外，其他藻株油脂含量均低于20%，不適合作為獲得脂類物質(zhì)的潛在資源。藻株CJ15油脂含量顯著高于其他藻株（P<0.05），藻株C22與C67油脂含量無顯著差異（P>0.05）。從油脂產(chǎn)量看，10株微藻中C67與CJ15油脂產(chǎn)量最高，分

海南大學(xué)碩士學(xué)位論文29別為1.27±0.09g/L，1.11±0.08g/L，兩者差異較小，其次為藻株B38，為0.60±0.09g/L，其余藻株油脂產(chǎn)量均低于0.60g/L。因此，藻株C67與CJ15在比生長速率、生物量、油脂含量及產(chǎn)量上具有較大的優(yōu)勢，更適合于進(jìn)一步的研究。圖3-210株藻的油脂含量及油脂含量Fig.3-2LipidcontentandLipidyieldof10microalgalcultures3.1.3脂肪酸成分分析除油脂含量及產(chǎn)量外，脂肪酸組成也是衡量微藻油脂的一項(xiàng)重要理化指標(biāo)。表3-2為10株藻株的脂肪酸組成及相對含量。其中藻株CJ15亞油酸相對含量最高，為30.92%。藻株C22與CJ15C18:3（n-3）（亞麻酸）含量均超過10%，高于幾種常見植物油中亞麻酸含量：毛豆油（0.5%）、橄欖油（0.6%）、葵花籽油（0.2%）及花生油（2.0%）（婁婷婷等，2014）�？梢�，這兩株微藻作為亞麻酸生產(chǎn)來源上具有誘人的發(fā)展前景。藻株C22同時還含有一定量的C18:3（n-6）（γ-亞麻酸）及少量的C20:4（n-6）（花生四烯酸）。與藻株C22相似，藻株WC01與B43均含有少量花生四烯酸�；ㄉ南┧嶙鳛槿梭w的一種必需脂肪酸，參與人體的各種生命活動，其來源目前以動物油脂為主，但還未能滿足人們對該種脂肪酸的需求，因此，對該三株微藻通過生物工程改造等手段提高花生四烯酸含量使其成為富含此種必需脂肪酸的藻株在生產(chǎn)上具有誘人的發(fā)展前景。在藻株B9和CJ15中還分別發(fā)現(xiàn)了少量的C20：5（n-3）（EPA）和C22:6（n-3）（DHA），雖然EPA與DHA含量極低，但通過各種基因工程等生物技術(shù)的手段提高其表達(dá)量，使其成為富含EPA或DHA的來源也具有極大的發(fā)展前景。不飽和脂肪酸是機(jī)體新陳代謝和提高免疫力的重要物質(zhì)，對人體具有更重要的生理意義。此外，不飽和脂肪酸也是生產(chǎn)生物柴油的一項(xiàng)重要指標(biāo)之一。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3410677