可可毛色二孢（Lasiodiplodia theobromae）導(dǎo)致的茶樹葉斑病是在貴州茶區(qū)發(fā)現(xiàn)的一種新型茶葉病害,其在貴州惠水縣茶區(qū)田間發(fā)生率達(dá)到30至45%。含1,3,4-噁二唑的砜類化合物具有高效、低毒及廣譜的生物活性而被廣泛應(yīng)用在新型綠色農(nóng)藥的設(shè)計研究中。本論文在明確可可毛色二孢生物學(xué)特性的基礎(chǔ)上,測試了5個含1,3,4-噁二唑的砜類化合物對可可毛色二孢的抑菌活性。結(jié)果顯示,甲磺酰菌唑?qū)煽擅叩碾x體抑菌活性最好(EC₅₀為3.54μg/mL),甲磺酰菌唑在50和100μg/mL對可可毛色二孢導(dǎo)致的葉斑病的治療活性分別為14.55%和41.78%,與相同濃度戊唑醇的治療活性相當(dāng)（分別為14.08%和38.50%）。本論文研究的重點(diǎn)是甲磺酰菌唑?qū)煽擅叩囊志饔脵C(jī)理。甲磺酰菌唑處理可可毛色二孢菌絲后,光學(xué)顯微鏡結(jié)果顯示菌絲分支減少、變短、扭曲、畸形和深色物質(zhì)在菌絲內(nèi)積累,掃描電鏡結(jié)果顯示菌絲塌陷和皺縮,透射電鏡結(jié)果顯示細(xì)胞膜、細(xì)胞壁和細(xì)胞器模糊以及細(xì)胞內(nèi)空腔化,4’,6-diamidino-2-phenylindole染色實(shí)驗(yàn)顯示細(xì)胞核減少和模糊不... 

【文章來源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞列表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 茶樹、茶樹葉斑病及可可毛色二孢研究進(jìn)展
    1.2 防治茶樹葉斑病的化學(xué)農(nóng)藥研究進(jìn)展
    1.3 含1,3,4-噁二唑的砜類化合物研究進(jìn)展
    1.4 抑菌機(jī)理方法研究進(jìn)展
        1.4.1 形態(tài)學(xué)方法研究進(jìn)展
        1.4.2 生理生化方法研究進(jìn)展
        1.4.3 轉(zhuǎn)錄組分析研究進(jìn)展
        1.4.4 熒光定量PCR研究進(jìn)展
    1.5 結(jié)語
第二章 論文設(shè)計思想和目的
    2.1 研究目的和意義
    2.2 擬解決的主要問題
    2.3 研究內(nèi)容
    2.4 研究思路
第三章 實(shí)驗(yàn)部分
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器(器材)
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.3 供試化合物
        3.1.4 供試菌株
        3.1.5 供試植物
    3.2 可可毛色二孢生物學(xué)特性的研究
        3.2.1 病原菌的致病性測試
        3.2.2 溫度對可可毛色二孢菌絲生長的影響
        3.2.3 pH對可可毛色二孢菌絲生長的影響
        3.2.4 不同碳源對可可毛色二孢菌絲生長的影響
        3.2.5 不同氮源對可可毛色二孢菌絲生長的影響
        3.2.6 可可毛色二孢生長曲線
        3.2.7 數(shù)據(jù)處理
    3.3 含1,3,4-噁二唑的砜類化合物抑菌活性測試
        3.3.1 離體抑菌活性測試
        3.3.2 活體抑菌活性測試
    3.4 形態(tài)學(xué)研究
        3.4.1 光學(xué)顯微鏡觀察
        3.4.2 掃描電鏡和透射電鏡觀察
        3.4.3 甲磺酰菌唑?qū)?xì)胞核的影響
        3.4.4 甲磺酰菌唑?qū)?xì)胞壁及隔膜的影響
    3.5 生理生化指標(biāo)測定
        3.5.1 細(xì)胞膜通透性測定
        3.5.2 麥角甾醇含量測定
    3.6 轉(zhuǎn)錄組分析
        3.6.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計
        3.6.2 樣品制備
        3.6.3 總RNA提取及檢測
        3.6.4 cDNA文庫構(gòu)建
        3.6.5 上機(jī)測序
        3.6.6 轉(zhuǎn)錄本拼接
        3.6.7 基因功能注釋
        3.6.8 基因表達(dá)水平分析
        3.6.9 RNA-seq整體質(zhì)量評估
        3.6.10 基因差異表達(dá)分析
        3.6.11 差異基因GO富集分析
        3.6.12 差異基因KEGG富集分析
    3.7 熒光定量PCR驗(yàn)證差異基因
        3.7.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計
        3.7.2 引物
        3.7.3 樣品制備
        3.7.4 總RNA提取
        3.7.5 第一鏈反轉(zhuǎn)錄
        3.7.6 實(shí)時熒光定量PCR
        3.7.7 數(shù)據(jù)處理
    3.8 甲磺酰菌唑?qū)溄晴薮己铣赏废嚓P(guān)基因表達(dá)量的影響
        3.8.1 實(shí)驗(yàn)方法
        3.8.2 引物
        3.8.3 樣品制備
        3.8.4 RNA提取
        3.8.5 第一鏈反轉(zhuǎn)錄
        3.8.6 熒光定量PCR
        3.8.7 數(shù)據(jù)處理
第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 可可毛色二孢生物學(xué)特性的研究
        4.1.1 可可毛色二孢的致病性測試
        4.1.2 溫度對可可毛色二孢菌絲生長的影響
        4.1.3 pH對可可毛色二孢菌絲生長的影響
        4.1.4 不同碳源培養(yǎng)基對可可毛色二孢菌絲生長的影響
        4.1.5 不同氮源培養(yǎng)基對可可毛色二孢菌絲生長的影響
        4.1.6 可可毛色二孢的生長曲線
    4.2 含1,3,4-噁二唑的砜類化合物的抑菌活性測試
        4.2.1 離體抑菌活性測試
        4.2.2 活體抑菌活性測試
    4.3 形態(tài)學(xué)研究
        4.3.1 光學(xué)顯微鏡觀察
        4.3.2 掃描電鏡和透射電鏡觀察
        4.3.3 甲磺酰菌唑?qū)?xì)胞核的影響
        4.3.4 甲磺酰菌唑?qū)?xì)胞壁及隔膜的影響
    4.4 甲磺酰菌唑?qū)煽擅呱砩再|(zhì)的影響
        4.4.1 甲磺酰菌唑?qū)煽擅呒?xì)胞膜通透性的影響
        4.4.2 甲磺酰菌唑?qū)煽擅呔z麥角甾醇含量的影響
    4.5 轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析
        4.5.1 RNA質(zhì)量檢測
        4.5.2 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量匯總
        4.5.3 基因功能注釋
        4.5.4 基因表達(dá)水平分析
        4.5.5 樣品間相關(guān)性檢查
        4.5.6 差異表達(dá)分析
        4.5.7 差異基因GO富集分析
        4.5.8 差異基因KEGG富集分析
    4.6 熒光定量PCR驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄組差異基因
    4.7 甲磺酰菌唑?qū)溄晴薮己铣赏坊虮磉_(dá)的影響
第五章 討論
第六章 結(jié)論
    6.1 主要研究結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 不足及展望
致謝
主要參考文獻(xiàn)
附錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]作物病蟲害分類介紹及其防治圖譜——茶圓赤星病及其防治圖譜[J]. 王永崇.  農(nóng)藥市場信息. 2019(04)
[4]茶樹葉部病害病原菌Phoma segeticola var.camelliae的生物學(xué)特性研究[J]. 韋唯,任亞峰,李冬雪,王勇,趙曉珍,王楓,陳卓.  中國植保導(dǎo)刊. 2018(12)
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[7]百合葉尖干枯病病原菌的鑒定、生物學(xué)特性及其對殺菌劑的敏感性研究[J]. 曾慧蘭,盧其能,曾鵬遠(yuǎn),李潤根.  園藝學(xué)報. 2018(12)
[8]貴州茶樹病害可持續(xù)控制技術(shù)措施的研究與應(yīng)用路徑探索[J]. 陳松,任亞峰,李冬雪,王勇,金林紅,談孝鳳,陳卓.  中國植保導(dǎo)刊. 2018(10)
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碩士論文
[1]小檗堿對水稻細(xì)菌性條斑病菌的抑菌機(jī)制分析[D]. 黎芳靖.廣西大學(xué) 2018
[2]茶葉重大病害病原鑒定及藥物篩選[D]. 趙曉珍.貴州大學(xué) 2017
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[4]皮寒藥對金黃色葡萄球菌的抑制作用及其抑菌機(jī)制研究[D]. 徐婷婷.西南大學(xué) 2017
[5]Lactobacillus paracasei FX-6產(chǎn)抗菌肽對金黃色葡萄球菌作用機(jī)制及其應(yīng)用研究[D]. 陳飛龍.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[6]肉桂醛靶向辣椒疫霉PVC1的抑菌機(jī)理研究[D]. 李麗娜.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[7]含苯氧基1,3,4-噁（噻）二唑砜類衍生物設(shè)計合成及生物活性[D]. 蘇士虎.貴州大學(xué) 2015
[8]五種Strobilurin類殺菌劑對黃瓜霜霉病菌生物活性及其抗性風(fēng)險[D]. 喬桂雙.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[9]茶樹品種對茶赤葉斑病和茶尺蠖抗性機(jī)制的初步研究[D]. 楊麗麗.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號：3381679