菜籽油是世界上主要的消費食用植物油之一,與其他植物油相比,水酶法菜籽油（Enzyme-Assisted-Aqueous Extracted Rapeseed Oil,EAO）中酚類化合物,尤其是酚酸類物質(zhì)的含量很高,且具有明顯的抗氧化活性。雖然已經(jīng)有研究從藥理學(xué)角度報道了菜籽及其產(chǎn)品中多酚類物質(zhì)的抗炎、抗氧化、抗腫瘤和抗凋亡等功效,但與黃酮等酚類物質(zhì)相比,菜籽油中有關(guān)酚酸活性的研究仍相對較少較晚。大量研究表明一些酚酸能明顯改善肝臟脂毒性,但作為食用油中重要的膳食多酚來源,菜籽油中的酚酸類物質(zhì)對肝臟脂毒性的影響尚未見報道。因此,本文通過超高效液相色譜-串聯(lián)四級桿質(zhì)譜（Ultra Performance Liquid Chromatography-tandem Quadrupole Mass Spectrometry,UPLC-MS/MS）方法對菜籽油的酚酸進(jìn)行定量鑒定;在建立油酸誘導(dǎo)HepG2脂性凋亡模型的基礎(chǔ)上,探討菜籽油中酚酸類物質(zhì)對HepG2脂性凋亡的調(diào)控作用,以期為其生物活性的研究提供理論依據(jù)。（1）對水酶法菜籽油中的酚類物質(zhì)進(jìn)行提取,利用Folin-Ciocalteu比色法對其... 

【文章來源】：江南大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮寫詞對照表
1 緒論
    1.1 菜籽油酚酸研究簡介
        1.1.1 酚酸的結(jié)構(gòu)與分類
        1.1.2 菜籽油產(chǎn)量及其中的酚酸種類
        1.1.3 菜籽油酚酸的存在形式及含量
        1.1.4 菜籽酚酸的測定方法
        1.1.5 菜籽油酚酸的生理功能
    1.2 氧化應(yīng)激與線粒體脂毒性凋亡的概述
    1.3 多酚對肝臟脂毒性的抑制概述
    1.4 立題依據(jù)及意義
    1.5 主要研究內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 實驗材料與儀器
        2.1.1 主要材料
        2.1.2 實驗儀器與設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 水酶法菜籽油的制備
        2.2.2 水酶法菜籽油中菜籽酚酸的提取
        2.2.3 水酶法菜籽油酚酸含量的測定
        2.2.4 UPLC-MS/MS MRM模式對水酶法菜籽油中菜籽酚酸的鑒定和定量
        2.2.5 水酶法菜籽油中菜籽酚酸的體外抗氧化能力測定
        2.2.6 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.7 CCK-8細(xì)胞增殖實驗
        2.2.8 LDH細(xì)胞毒性實驗
        2.2.9 油紅O細(xì)胞脂質(zhì)染色
        2.2.10 細(xì)胞蛋白含量的測定
        2.2.11 細(xì)胞中甘油三酯含量的測定
        2.2.12 細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平的測定
        2.2.13 細(xì)胞內(nèi)活性氧ROS的測定
        2.2.14 細(xì)胞周期測定
        2.2.15 Hoechst33342染色
        2.2.16 Annexin-V/PI細(xì)胞凋亡率檢測
        2.2.17 基因相對表達(dá)量測定
    2.3 數(shù)據(jù)處理與分析
3 結(jié)果與討論
    3.1 水酶法菜籽油中總酚含量測定及酚酸的定量檢測
        3.1.1 水酶法菜籽油總酚含量的測定
        3.1.2 水酶法菜籽油中酚酸的定量鑒定
    3.2 主要酚酸標(biāo)準(zhǔn)品的DPPH自由基清除能力測定
    3.3 油酸誘導(dǎo)HepG2肝細(xì)胞脂毒性凋亡模型的建立
        3.3.1 油酸對HepG2細(xì)胞活力的影響
        3.3.2 油酸對HepG2細(xì)胞LDH毒性的影響
        3.3.3 油酸對HepG2細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的影響
        3.3.4 油酸對HepG2細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的影響
        3.3.5 油酸對HepG2細(xì)胞周期的影響
        3.3.6 油酸對HepG2細(xì)胞凋亡的影響
    3.4 兩種酚酸對油酸誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞脂毒性凋亡的作用研究
        3.4.1 兩種酚酸對HepG2細(xì)胞毒性的影響
        3.4.2 兩種酚酸對油酸誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞毒性的影響
        3.4.3 兩種酚酸對OA誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)代謝的影響
        3.4.4 兩種酚酸對OA誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的影響
        3.4.5 兩種酚酸對OA誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞周期的影響
        3.4.6 兩種酚酸對OA誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞凋亡的影響
主要結(jié)論與展望
    主要結(jié)論
    展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄：作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]芥子酸拮抗同型半胱氨酸誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡及焦亡[J]. 裴星,韓勇,丘紅,樊一鋼,耿杰,田紅燕.  山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2017(11)
[2]制油工藝對菜籽油微量成分和氧化穩(wěn)定性的影響[J]. 張亮,李世剛,曹培讓,蔣將,李進(jìn)偉,劉元法.  中國油脂. 2017(02)
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[4]橘皮中酚酸的研究進(jìn)展[J]. 朱豪,梁彬霞,趙文紅,錢敏,白衛(wèi)東.  中國食品添加劑. 2012(02)
[5]菜籽多酚抑菌作用研究[J]. 嚴(yán)奉偉,郝晶晶.  食品工業(yè). 2011(02)
[6]兩種細(xì)胞系用于建立體外脂肪肝模型的比較[J]. 潘雪豐,溫彩霞,許建華.  廣東藥學(xué)院學(xué)報. 2010(01)
[7]阿魏酸體外抗氧化作用研究[J]. 趙文紅,鄧澤元,范亞葦,李靜,阮征.  食品科學(xué). 2010(01)
[8]大黃素、小檗堿對胰島素抵抗HepG2細(xì)胞的影響[J]. 尹春梅,王慧蓮,王琦.  中藥藥理與臨床. 2009(02)
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博士論文
[1]尼羅羅非魚過氧化物體增殖激活受體（PPARα）激活及其降脂機制研究[D]. 寧麗軍.華東師范大學(xué) 2016

碩士論文
[1]紫蘇籽油及原花青素的提取工藝研究[D]. 夏瑤瑤.中北大學(xué) 2017
[2]三羥異黃酮對脂質(zhì)代謝調(diào)控的研究[D]. 韋唯.合肥工業(yè)大學(xué) 2017
[3]茶葉籽油酚類化合物鑒定分析及存在形態(tài)研究[D]. 盧鶴.華僑大學(xué) 2016
[4]不同加工工藝的菜籽油品質(zhì)及其生物學(xué)評價[D]. 張亮.江南大學(xué) 2016
[5]紫蘇籽油的提取工藝及理化特性研究[D]. 許萬樂.中北大學(xué) 2014
[6]油菜籽中多酚類化合物及其分布的研究[D]. 吳梨.南京財經(jīng)大學(xué) 2011



本文編號：3306725