癌癥作為二十一世紀(jì)危害人類健康安全的重要原因之一,其發(fā)病率與死亡率正在逐年上升�；瘜W(xué)治療是目前最有效的臨床治療手段之一,但其常常伴隨很強(qiáng)的副作用,嚴(yán)重限制了藥物療效的發(fā)揮,也影響病人的生存質(zhì)量。阿霉素（Dox）便是目前最常用的癌癥化療藥物之一,它通過抑制癌細(xì)胞的基因復(fù)制從而達(dá)到抗癌效果,具有廣譜抗癌作用,但是其卻擁有著較高的心臟毒性。如何在化療過程中提高Dox的療效同時(shí)降低其毒副作用是人們關(guān)心的問題。陽離子抗癌肽由于其獨(dú)特的細(xì)胞膜作用機(jī)理以及高效廣譜的抗癌療效,受到人們的日益關(guān)注。HPRP-A1是一種陽離子抗癌肽,它不僅可以通過改變細(xì)胞膜的通透性進(jìn)入細(xì)胞,還可以進(jìn)一步誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而達(dá)到抗癌效果。本課題以阿霉素Dox和抗癌肽HPRP-A1為對(duì)象,設(shè)計(jì)構(gòu)建一種酸敏感的藥物遞送系統(tǒng),即通過酸敏感的腙鍵將Dox與HPRP-A1偶聯(lián),形成一種新的化合物Dox-HPRP-A1,并對(duì)其抗癌活性及作用機(jī)制進(jìn)行研究。首先設(shè)計(jì)并優(yōu)化了Dox-HPRP-A1的合成、純化、定量實(shí)驗(yàn)體系,并通過反相高效液相色譜（RP-HPLC）、飛行時(shí)間質(zhì)譜儀對(duì)Dox-HPRP-A1進(jìn)行純化與鑒定。通過RP-HPLC對(duì)Dox-... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

HPRP-A1的飛行時(shí)間質(zhì)譜儀檢測(cè)結(jié)果圖

Dox-HPRP-A116造成Dox變性，因此Dox-HPRP-A1反應(yīng)混合液經(jīng)過RP-HPLC純化后所得液體必須立刻調(diào)整pH為5-7之間并立刻凍存。通過反相高效液相色譜的純化后，可得到Dox-HPRP-A1的純品（圖2.3，圖2.4）。本實(shí)驗(yàn)采用飛行時(shí)間質(zhì)譜儀（BrukerInc.,Germany）對(duì)Dox-HPRP-A1的分子量進(jìn)行檢測(cè)，如圖2.5，Dox-HPRP-A1的計(jì)算分子量為2655.4，飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的檢測(cè)分子量為2655.774，與計(jì)算分子量一致，證明本實(shí)驗(yàn)成功合成了Dox-HPRP-A1。圖2.3純化前的Dox-HPRP-A1的反相高效液相色譜檢測(cè)圖。圖2.4純化后的Dox-HPRP-A1的反相高效液相色譜檢測(cè)圖。圖2.5Dox-HPRP-A1的飛行時(shí)間質(zhì)譜儀檢測(cè)結(jié)果圖。0.02.55.07.510.012.515.017.520.022.5min0.00.51.01.5mV(x1,000)DetectorA:210nm1.8022.0882.9924.0919.10010.72411.49812.48013.17413.81014.17715.45415.72516.36916.87717.51619.75920.43320.95021.38321.99322.74724.2450.02.55.07.510.012.515.017.5min0.00.51.01.5mV(x100)DetectorA:210nm1.1521.7342.0972.3682.7193.0003.3923.6003.9584.0744.6004.8835.9506.39411.27715.24515.65216.59316.88917.22518.09818.678

Dox-HPRP-A1172.3.5Dox-HPRP-A1酸性水解研究以Dox-HPRP-A1的水解百分比為縱坐標(biāo)，時(shí)間為橫坐標(biāo)，得到Dox-HPRP-A1在不同pH條件下水解曲線。如圖2.6所示，可以看到Dox-HPRP-A1在pH=5.4環(huán)境時(shí)的水解速度顯著迅速于在pH=7.4環(huán)境中，2h即水解30%，并在8h內(nèi)水解完全。而在pH=7.4環(huán)境中，經(jīng)過24h也僅僅水解了50%，證明Dox-HPRP-A1具有顯著的酸性敏感性質(zhì)，由于腙鍵在偏酸性環(huán)境中較易斷裂，給予了Dox-HPRP-A1這個(gè)性質(zhì)。圖2.6Dox-HPRP-A1的水解曲線。2.4本章小結(jié)本實(shí)驗(yàn)首先通過Fmoc固相合成法成功正確地合成了抗癌肽HPRP-A1，并通過反相高效液相色譜進(jìn)行純化后，通過飛行時(shí)間質(zhì)譜儀檢測(cè)對(duì)合成結(jié)果進(jìn)行證明。其次，本實(shí)驗(yàn)確立了Dox-HPRP-A1的合成純化定量方案，成功正確地合成了Dox-HPRP-A1，并通過飛行時(shí)間質(zhì)譜儀進(jìn)行了檢測(cè)。在酸性敏感實(shí)驗(yàn)中，證明了Dox-HPRP-A1具有顯著的酸性敏感作用，在酸性環(huán)境下比在中性環(huán)境下更易水解。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Comparison on effect of hydrophobicity on the antibacterial and antifungal activities of α-helical antimicrobial peptides[J]. ZHAO LianJing,HUANG YiBing,GAO Song,CUI Yan,HE Dan,WANG Li,CHEN YuXin.  Science China（Chemistry）. 2013(09)



本文編號(hào)：3292650