禾草內(nèi)生真菌抑菌抗蟲活性和發(fā)酵條件的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-27 11:58
微生物農(nóng)藥具有化學(xué)農(nóng)藥不可替代的作用,其資源豐富,但是已被開發(fā)利用的資源種類少,難以滿足農(nóng)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需求。穩(wěn)定互惠共生的禾草內(nèi)生真菌共生體產(chǎn)生的次生代謝物不僅可顯著提高宿主禾草生物與非生物脅迫的抗性,而且可導(dǎo)致草食家畜中毒。因此,具有開發(fā)為微生物農(nóng)藥的潛力。本研究以Epichlo?禾草內(nèi)生真菌菌株為試驗(yàn)材料,通過搖瓶發(fā)酵獲得發(fā)酵液,對(duì)多年生黑麥草(Lolium perenne)種子進(jìn)行浸種,測定生物堿含量,篩選抑菌抗蟲活性菌株,并采用正交法優(yōu)化菌株發(fā)酵條件,旨在提高菌株活性物質(zhì)的代謝產(chǎn)率,以期為菌株生物堿的規(guī);a(chǎn)和研發(fā)為新型微生物農(nóng)藥菌劑奠定基礎(chǔ)。獲得的主要研究結(jié)果如下:1.通過紙上發(fā)芽法(TP)測定4株分離自醉馬草(Achnatherum inebrians)、中華羊茅(Festuca sinensis)、野大麥(Hordeum brevisubulatum)和披堿草(Elymus dahuricus)的Epichlo?內(nèi)生真菌菌株Epichlo?gansuensis,E.sinensis,E.bromicola(Hb),E.bromicola(Ed)發(fā)酵液浸種下多年生黑麥草種...
【文章來源】:蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:79 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 禾草內(nèi)生真菌
1.1.1 內(nèi)生真菌對(duì)禾草的抗旱性
1.1.2 內(nèi)生真菌對(duì)禾草的抗病性
1.1.3 內(nèi)生真菌對(duì)禾草的抗蟲性
1.2 禾草內(nèi)生真菌作為生防因子
1.3 內(nèi)生真菌發(fā)酵
第二章 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)黑麥草種子霉變和萌發(fā)的影響
2.1 試驗(yàn)材料
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 發(fā)酵液的制備
2.2.2 種子處理
2.2.3 聚乙二醇(PEG-6000)脅迫液配制
2.2.4 發(fā)芽的基本條件
2.3 數(shù)據(jù)處理方法
2.4 結(jié)果與分析
2.4.1 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)干旱脅迫下種子霉變的影響
2.4.2 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)干旱脅迫下種子萌發(fā)的影響
2.4.3 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)干旱脅迫下胚芽含水量的影響
2.4.4 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)干旱脅迫下胚芽長和胚根長的影響
2.5 討論
第三章 禾草內(nèi)生真菌抑菌活性菌株的篩選
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 菌株
3.1.2 培養(yǎng)基
3.2 試驗(yàn)方法
3.2.1 發(fā)酵液的制備
3.2.2 病原真菌對(duì)峙試驗(yàn)
3.2.3 病原真菌孢子萌發(fā)試驗(yàn)
3.3 生物堿的體外檢測
3.3.1 麥角堿的提取和檢測
3.3.2 震顫素的提取和檢測
3.3.3 波胺的提取和檢測
3.4 數(shù)據(jù)處理方法
3.5 結(jié)果與分析
3.5.1 8 株禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液生物堿的含量
3.5.2 8 株禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液對(duì)供試病原真菌菌落影響
3.5.3 8 株禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液對(duì)供試病原真菌孢子萌發(fā)的影響
3.6 討論
第四章 禾草內(nèi)生真菌抗蟲活性菌株的篩選
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 菌株
4.1.2 禾草
4.1.3 害蟲
4.1.4 培養(yǎng)基
4.2 試驗(yàn)方法
4.2.1 發(fā)酵液制備
4.2.2 內(nèi)生真菌抗蟲活性的測定
4.3 數(shù)據(jù)處理
4.4 結(jié)果分析
4.5 討論
第五章 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵條件的優(yōu)化
5.1 材料
5.1.1 菌株
5.1.2 培養(yǎng)基
5.2 方法
5.2.1 種子發(fā)酵液的制備
5.2.2 菌絲體生物量的測定
5.2.3 生物堿的體外檢測
5.3 單因素發(fā)酵篩選
5.3.1 初始值
5.3.2 裝液量
5.3.3 接種量
5.3.4 接種時(shí)間
5.3.5 搖床轉(zhuǎn)速
5.3.6 發(fā)酵溫度
5.4 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
5.5 數(shù)據(jù)分析
5.6 結(jié)果分析
5.6.1 pH對(duì) JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.6.2 裝液量對(duì)JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.6.3 接種量對(duì)JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.6.4 接種時(shí)間對(duì)JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.6.5 轉(zhuǎn)速對(duì)JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.6.6 溫度對(duì)JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.7 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)發(fā)酵優(yōu)化
5.7.1 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
5.7.2 顯著性分析
5.7.3 最優(yōu)組合
5.7.4 優(yōu)化結(jié)果驗(yàn)證
5.8 討論
第六章 結(jié)論
6.1 主要結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
6.3 研究展望
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間的研究成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]紅豆杉內(nèi)生真菌產(chǎn)紫杉醇的發(fā)酵條件優(yōu)化研究[J]. 張歡,趙赟鑫,李昭瑩,田露,鄧百萬. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(21)
[2]內(nèi)生菌發(fā)酵工藝的研究進(jìn)展[J]. 史毅,陳文彬,張博文,鄭紅梅,柴華文,葉耀輝. 江西中醫(yī)藥. 2018(09)
[3]生物農(nóng)藥的發(fā)展現(xiàn)狀與趨勢(shì)分析[J]. 張震. 農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備. 2018(07)
[4]基于Web of Sciences數(shù)據(jù)庫的我國禾草內(nèi)生真菌學(xué)研究論文計(jì)量分析[J]. 師茜,田沛,南志標(biāo). 草業(yè)學(xué)報(bào). 2018(07)
[5]一株野生艾草產(chǎn)紅色素內(nèi)生真菌發(fā)酵條件的研究[J]. 鄭青波,廖月姣,王福彬,馬海宜,柳玉瑛,何亞濤,劉俊林. 西北民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(02)
[6]內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)干旱脅迫下黑麥草種子萌發(fā)的影響[J]. 劉靜,周景樂,陳振江,魏學(xué)凱,李濤,李春杰. 草業(yè)科學(xué). 2018(04)
[7]低溫處理下外源水楊酸和脫落酸與內(nèi)生真菌互作對(duì)醉馬草共生體的影響[J]. 劉靜,陳振江,李秀璋,周景樂,柳莉,李春杰. 草業(yè)學(xué)報(bào). 2018(01)
[8]光照強(qiáng)度和光周期對(duì)醉馬草內(nèi)生真菌共生體幼苗生長和生物堿積累的影響[J]. 劉靜,萬志文,陳振江,李秀璋,曹瑩,李春杰. 西北植物學(xué)報(bào). 2017(11)
[9]產(chǎn)紅色素真菌Monascus sanguineus的液態(tài)發(fā)酵條件研究[J]. 何亞濤,劉俊林,鄭青波,柳玉瑛,羅琨映,高丹丹. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2018(03)
[10]不同pH磚紅壤浸提液和內(nèi)生真菌對(duì)黑麥草幼苗生長生理的影響[J]. 陳振江,劉靜,魏學(xué)凱,田沛,曹瑩,周景樂,李春杰. 西北植物學(xué)報(bào). 2017(07)
博士論文
[1]多殺菌素高產(chǎn)菌株的選育及發(fā)酵過程多參數(shù)、多尺度優(yōu)化[D]. 郭偉群.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]銀杏內(nèi)生真菌的分離鑒定及代謝產(chǎn)物抑菌活性研究[D]. 柏鈺.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]海洋中稻瘟病拮抗菌的分離、發(fā)酵優(yōu)化及其活性成分分析[D]. 靳西彪.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[4]多年生黑麥草、內(nèi)生真菌與數(shù)種植物病原真菌的互作[D]. 田沛.蘭州大學(xué) 2009
碩士論文
[1]半夏內(nèi)生菌的分離及其內(nèi)生真菌對(duì)宿主生長影響的研究[D]. 王維.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[2]內(nèi)生真菌對(duì)醉馬草抗蟲性影響的研究[D]. 張興旭.蘭州大學(xué) 2008
[3]內(nèi)生真菌對(duì)醉馬草抗旱性影響的研究[D]. 李飛.蘭州大學(xué) 2007
[4]Neotyphodium gansuense離體麥角堿的檢測和N.lolii麥角堿基因的測序[D]. 高嘉卉.蘭州大學(xué) 2006
[5]長線孢擬莖點(diǎn)等六株東北紅豆杉內(nèi)生真菌及其代謝產(chǎn)物的研究[D]. 劉君.沈陽藥科大學(xué) 2004
本文編號(hào):3207523
【文章來源】:蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:79 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 禾草內(nèi)生真菌
1.1.1 內(nèi)生真菌對(duì)禾草的抗旱性
1.1.2 內(nèi)生真菌對(duì)禾草的抗病性
1.1.3 內(nèi)生真菌對(duì)禾草的抗蟲性
1.2 禾草內(nèi)生真菌作為生防因子
1.3 內(nèi)生真菌發(fā)酵
第二章 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)黑麥草種子霉變和萌發(fā)的影響
2.1 試驗(yàn)材料
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 發(fā)酵液的制備
2.2.2 種子處理
2.2.3 聚乙二醇(PEG-6000)脅迫液配制
2.2.4 發(fā)芽的基本條件
2.3 數(shù)據(jù)處理方法
2.4 結(jié)果與分析
2.4.1 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)干旱脅迫下種子霉變的影響
2.4.2 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)干旱脅迫下種子萌發(fā)的影響
2.4.3 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)干旱脅迫下胚芽含水量的影響
2.4.4 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)干旱脅迫下胚芽長和胚根長的影響
2.5 討論
第三章 禾草內(nèi)生真菌抑菌活性菌株的篩選
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 菌株
3.1.2 培養(yǎng)基
3.2 試驗(yàn)方法
3.2.1 發(fā)酵液的制備
3.2.2 病原真菌對(duì)峙試驗(yàn)
3.2.3 病原真菌孢子萌發(fā)試驗(yàn)
3.3 生物堿的體外檢測
3.3.1 麥角堿的提取和檢測
3.3.2 震顫素的提取和檢測
3.3.3 波胺的提取和檢測
3.4 數(shù)據(jù)處理方法
3.5 結(jié)果與分析
3.5.1 8 株禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液生物堿的含量
3.5.2 8 株禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液對(duì)供試病原真菌菌落影響
3.5.3 8 株禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵液對(duì)供試病原真菌孢子萌發(fā)的影響
3.6 討論
第四章 禾草內(nèi)生真菌抗蟲活性菌株的篩選
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 菌株
4.1.2 禾草
4.1.3 害蟲
4.1.4 培養(yǎng)基
4.2 試驗(yàn)方法
4.2.1 發(fā)酵液制備
4.2.2 內(nèi)生真菌抗蟲活性的測定
4.3 數(shù)據(jù)處理
4.4 結(jié)果分析
4.5 討論
第五章 禾草內(nèi)生真菌發(fā)酵條件的優(yōu)化
5.1 材料
5.1.1 菌株
5.1.2 培養(yǎng)基
5.2 方法
5.2.1 種子發(fā)酵液的制備
5.2.2 菌絲體生物量的測定
5.2.3 生物堿的體外檢測
5.3 單因素發(fā)酵篩選
5.3.1 初始值
5.3.2 裝液量
5.3.3 接種量
5.3.4 接種時(shí)間
5.3.5 搖床轉(zhuǎn)速
5.3.6 發(fā)酵溫度
5.4 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
5.5 數(shù)據(jù)分析
5.6 結(jié)果分析
5.6.1 pH對(duì) JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.6.2 裝液量對(duì)JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.6.3 接種量對(duì)JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.6.4 接種時(shí)間對(duì)JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.6.5 轉(zhuǎn)速對(duì)JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.6.6 溫度對(duì)JZ和 PA菌株生物堿含量和菌絲體生物量的影響
5.7 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)發(fā)酵優(yōu)化
5.7.1 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
5.7.2 顯著性分析
5.7.3 最優(yōu)組合
5.7.4 優(yōu)化結(jié)果驗(yàn)證
5.8 討論
第六章 結(jié)論
6.1 主要結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
6.3 研究展望
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間的研究成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]紅豆杉內(nèi)生真菌產(chǎn)紫杉醇的發(fā)酵條件優(yōu)化研究[J]. 張歡,趙赟鑫,李昭瑩,田露,鄧百萬. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(21)
[2]內(nèi)生菌發(fā)酵工藝的研究進(jìn)展[J]. 史毅,陳文彬,張博文,鄭紅梅,柴華文,葉耀輝. 江西中醫(yī)藥. 2018(09)
[3]生物農(nóng)藥的發(fā)展現(xiàn)狀與趨勢(shì)分析[J]. 張震. 農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備. 2018(07)
[4]基于Web of Sciences數(shù)據(jù)庫的我國禾草內(nèi)生真菌學(xué)研究論文計(jì)量分析[J]. 師茜,田沛,南志標(biāo). 草業(yè)學(xué)報(bào). 2018(07)
[5]一株野生艾草產(chǎn)紅色素內(nèi)生真菌發(fā)酵條件的研究[J]. 鄭青波,廖月姣,王福彬,馬海宜,柳玉瑛,何亞濤,劉俊林. 西北民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(02)
[6]內(nèi)生真菌發(fā)酵液浸種對(duì)干旱脅迫下黑麥草種子萌發(fā)的影響[J]. 劉靜,周景樂,陳振江,魏學(xué)凱,李濤,李春杰. 草業(yè)科學(xué). 2018(04)
[7]低溫處理下外源水楊酸和脫落酸與內(nèi)生真菌互作對(duì)醉馬草共生體的影響[J]. 劉靜,陳振江,李秀璋,周景樂,柳莉,李春杰. 草業(yè)學(xué)報(bào). 2018(01)
[8]光照強(qiáng)度和光周期對(duì)醉馬草內(nèi)生真菌共生體幼苗生長和生物堿積累的影響[J]. 劉靜,萬志文,陳振江,李秀璋,曹瑩,李春杰. 西北植物學(xué)報(bào). 2017(11)
[9]產(chǎn)紅色素真菌Monascus sanguineus的液態(tài)發(fā)酵條件研究[J]. 何亞濤,劉俊林,鄭青波,柳玉瑛,羅琨映,高丹丹. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2018(03)
[10]不同pH磚紅壤浸提液和內(nèi)生真菌對(duì)黑麥草幼苗生長生理的影響[J]. 陳振江,劉靜,魏學(xué)凱,田沛,曹瑩,周景樂,李春杰. 西北植物學(xué)報(bào). 2017(07)
博士論文
[1]多殺菌素高產(chǎn)菌株的選育及發(fā)酵過程多參數(shù)、多尺度優(yōu)化[D]. 郭偉群.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]銀杏內(nèi)生真菌的分離鑒定及代謝產(chǎn)物抑菌活性研究[D]. 柏鈺.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]海洋中稻瘟病拮抗菌的分離、發(fā)酵優(yōu)化及其活性成分分析[D]. 靳西彪.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[4]多年生黑麥草、內(nèi)生真菌與數(shù)種植物病原真菌的互作[D]. 田沛.蘭州大學(xué) 2009
碩士論文
[1]半夏內(nèi)生菌的分離及其內(nèi)生真菌對(duì)宿主生長影響的研究[D]. 王維.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[2]內(nèi)生真菌對(duì)醉馬草抗蟲性影響的研究[D]. 張興旭.蘭州大學(xué) 2008
[3]內(nèi)生真菌對(duì)醉馬草抗旱性影響的研究[D]. 李飛.蘭州大學(xué) 2007
[4]Neotyphodium gansuense離體麥角堿的檢測和N.lolii麥角堿基因的測序[D]. 高嘉卉.蘭州大學(xué) 2006
[5]長線孢擬莖點(diǎn)等六株東北紅豆杉內(nèi)生真菌及其代謝產(chǎn)物的研究[D]. 劉君.沈陽藥科大學(xué) 2004
本文編號(hào):3207523
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