蛹蟲草CM-1菌株篩選及菌絲體發(fā)酵工藝研究
發(fā)布時間:2021-05-25 11:35
蟲草具有很高的藥用價值和經(jīng)濟價值,近年來,蛹蟲草的人工培養(yǎng)生產(chǎn)已實現(xiàn)了產(chǎn)業(yè)化,但是蛹蟲草菌株性狀和產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊,在“健康中國”的戰(zhàn)略背景下,越來越多的企業(yè)關注蛹蟲草菌株的應用價值及其生產(chǎn)蟲草素含量的工藝,故急需對蛹蟲草菌株及其菌絲體培養(yǎng)工藝進行系統(tǒng)深入的研究。本試驗以野生蛹蟲草為供試材料,利用平板分離技術(shù),分離蟲草菌株;通過測定不同菌株子實體長勢與干重及菌絲體干重與蟲草素含量,篩選并獲得高產(chǎn)菌株;采用單因素實驗結(jié)合正交實驗方法,測定菌絲體干重及蟲草素含量變化,研究培養(yǎng)基中營養(yǎng)因子及物理條件變化對高產(chǎn)菌株生產(chǎn)能力的影響;利用反應器對實驗室優(yōu)化結(jié)果進行放大實驗,并進一步優(yōu)化工業(yè)化生產(chǎn)條件。1、平板分離出16株菌株,通過拮抗實驗證明16個菌株具有不親和性,進行菌株鑒定后。以子實體干重、培養(yǎng)周期以及子實體形態(tài)為指標進行初篩,以菌絲體生長速度、菌絲體干重和菌落大小為指標進行復篩。篩選出來優(yōu)良菌株,命名為CM-1,經(jīng)分子鑒定、連續(xù)20代菌絲體培養(yǎng)遺傳穩(wěn)定性考察,證明其為傳代穩(wěn)定的蛹蟲草菌,且此菌株菌絲體培養(yǎng)不易受菌株代次影響,適用于工業(yè)化生產(chǎn)。2、以CM-1為出發(fā)菌株研究碳源、氮源、無機鹽3個...
【文章來源】:黑龍江八一農(nóng)墾大學黑龍江省
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 文獻綜述
1.1 蛹蟲草簡介
1.2 蛹蟲草生產(chǎn)用菌株
1.3 蛹蟲草人工培養(yǎng)
1.4 蛹蟲草應用前景
1.5 研究目的及意義
2 材料與方法
2.1 試驗材料
2.1.1 供試材料
2.1.2 藥品和試劑
2.1.3 儀器設備
2.2 培養(yǎng)基
2.2.1 培養(yǎng)基種類
2.2.2 培養(yǎng)基配制與滅菌
2.3 實驗方法
2.3.1 菌株篩選與鑒定
2.3.2 菌絲體培養(yǎng)營養(yǎng)條件優(yōu)化
2.3.3 菌絲體培養(yǎng)物理條件優(yōu)化
2.3.4 20 L氣升式反應器培養(yǎng)優(yōu)化
2.3.5 不同培養(yǎng)時間菌絲體生長代謝變化
2.4 檢測方法
2.4.1 菌株檢測
2.4.2 理化指標檢測
2.4.3 蟲草素含量檢測
2.5 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
3.1 菌株篩選及鑒定
3.1.1 菌株分離
3.1.2 不同菌株間拮抗能力檢測
3.1.3 菌株初篩
3.1.4 菌株復篩
3.1.5 菌株鑒定
3.1.6 不同代次菌株對傳代培養(yǎng)方法響應
3.2 菌絲體培養(yǎng)營養(yǎng)條件優(yōu)化
3.2.2 不同氮源對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.2.3 不同無機鹽對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.2.4 蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)基正交實驗
3.2.5 培養(yǎng)基優(yōu)化前后蛹蟲草CM-1 菌株生長及產(chǎn)蟲草素情況
3.3 菌絲體培養(yǎng)物理條件優(yōu)化
3.3.1 種子液保藏期對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.2 培養(yǎng)基初始pH對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.3 培養(yǎng)溫度對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.4 培養(yǎng)基接種量對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.5 培養(yǎng)基裝量對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.6 搖床轉(zhuǎn)速對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.7 最適培養(yǎng)物理條件優(yōu)化
3.4 20 L氣升式反應器培養(yǎng)優(yōu)化
3.4.1 罐壓對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.4.2 通氣量對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.4.3 消泡劑對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.4.4 20 L反應器擴大培養(yǎng)驗證試驗
3.4.5 食品級原料對生產(chǎn)的影響
3.5 不同培養(yǎng)時間菌絲體生長代謝變化
3.5.1 不同培養(yǎng)時間生長量變化
3.5.2 不同培養(yǎng)時間蟲草素變化
3.5.3 不同培養(yǎng)時間糖含量變化
3.5.4 不同培養(yǎng)時間pH值變化
4 討論
4.1 蛹蟲草菌株篩選與分離
4.2 影響蛹蟲草菌絲體生長及蟲草素形成因素探討
4.3 蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的生長變化
4.4 降低蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)生產(chǎn)成本
5 結(jié)論
附錄
參考文獻
致謝
個人簡歷
【參考文獻】:
期刊論文
[1]蛹蟲草的化學成分及藥理作用[J]. 呂金朋,張曄,姚夢杰,張輝,孫佳明. 吉林中醫(yī)藥. 2018(03)
[2]食用菌菌種退化機制及預防措施的最新研究進展[J]. 李亞嬌,孫國琴,郭九峰,王海燕,龐杰. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學. 2018(02)
[3]蛹蟲草固體培養(yǎng)產(chǎn)子實體條件的優(yōu)化及其蟲草素含量測定[J]. 刁朝強,文庭池,廖勇,康冀川,周建云,謝紅艷. 山地農(nóng)業(yè)生物學報. 2017(06)
[4]不同培養(yǎng)介質(zhì)對蛹蟲草子實體生長及產(chǎn)量的影響[J]. 馬麥艷,馬琴,陳方圓,焦子偉. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2017(23)
[5]蟲草素的中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用及毒性研究進展[J]. 顧欣霞,葛曉群. 國際藥學研究雜志. 2017(09)
[6]遼寧蛹蟲草產(chǎn)業(yè)的研究進展[J]. 肖千明. 新農(nóng)業(yè). 2017(18)
[7]蝙蝠蛾擬青霉及蛹蟲草與野生冬蟲夏草活性比較[J]. 姜雪,王春月,李蘭洲,王雪,滕利榮,周毓麟. 長春中醫(yī)藥大學學報. 2017(04)
[8]蛹蟲草小分子功能肽制備及抗衰活性評價[J]. 李若溪,王園園,薛芳馨,岳可心,文懷振,郝博,王杉,王升厚. 河南農(nóng)業(yè). 2017(05)
[9]蛹蟲草抗氧化肽的發(fā)酵制備及對小鼠輻射氧化損傷的防護作用[J]. 楊淑芳,張春楊,錢琨,孫繼紅,張德軍,李晶濤. 蠶業(yè)科學. 2017(03)
[10]北蟲草人工栽培關鍵技術(shù)集成[J]. 許慶國. 食用菌. 2017(03)
碩士論文
[1]蛹蟲草生長營養(yǎng)特性及胞外酶活性的研究[D]. 宋好倩.河南科技學院 2017
[2]蛹蟲草生長發(fā)育條件研究[D]. 杜軍國.陜西科技大學 2013
[3]蛹蟲草液體發(fā)酵高產(chǎn)蟲草素工藝研究[D]. 方婷婷.合肥工業(yè)大學 2012
[4]蟲草素液態(tài)深層發(fā)酵與純化的研究[D]. 陳濤.江南大學 2012
[5]蟲草素降低HepG2細胞內(nèi)甘油三酯的機制探討[D]. 申大偉.延邊大學 2008
本文編號:3205268
【文章來源】:黑龍江八一農(nóng)墾大學黑龍江省
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 文獻綜述
1.1 蛹蟲草簡介
1.2 蛹蟲草生產(chǎn)用菌株
1.3 蛹蟲草人工培養(yǎng)
1.4 蛹蟲草應用前景
1.5 研究目的及意義
2 材料與方法
2.1 試驗材料
2.1.1 供試材料
2.1.2 藥品和試劑
2.1.3 儀器設備
2.2 培養(yǎng)基
2.2.1 培養(yǎng)基種類
2.2.2 培養(yǎng)基配制與滅菌
2.3 實驗方法
2.3.1 菌株篩選與鑒定
2.3.2 菌絲體培養(yǎng)營養(yǎng)條件優(yōu)化
2.3.3 菌絲體培養(yǎng)物理條件優(yōu)化
2.3.4 20 L氣升式反應器培養(yǎng)優(yōu)化
2.3.5 不同培養(yǎng)時間菌絲體生長代謝變化
2.4 檢測方法
2.4.1 菌株檢測
2.4.2 理化指標檢測
2.4.3 蟲草素含量檢測
2.5 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
3.1 菌株篩選及鑒定
3.1.1 菌株分離
3.1.2 不同菌株間拮抗能力檢測
3.1.3 菌株初篩
3.1.4 菌株復篩
3.1.5 菌株鑒定
3.1.6 不同代次菌株對傳代培養(yǎng)方法響應
3.2 菌絲體培養(yǎng)營養(yǎng)條件優(yōu)化
3.2.2 不同氮源對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.2.3 不同無機鹽對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.2.4 蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)基正交實驗
3.2.5 培養(yǎng)基優(yōu)化前后蛹蟲草CM-1 菌株生長及產(chǎn)蟲草素情況
3.3 菌絲體培養(yǎng)物理條件優(yōu)化
3.3.1 種子液保藏期對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.2 培養(yǎng)基初始pH對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.3 培養(yǎng)溫度對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.4 培養(yǎng)基接種量對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.5 培養(yǎng)基裝量對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.6 搖床轉(zhuǎn)速對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.3.7 最適培養(yǎng)物理條件優(yōu)化
3.4 20 L氣升式反應器培養(yǎng)優(yōu)化
3.4.1 罐壓對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.4.2 通氣量對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.4.3 消泡劑對蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的影響
3.4.4 20 L反應器擴大培養(yǎng)驗證試驗
3.4.5 食品級原料對生產(chǎn)的影響
3.5 不同培養(yǎng)時間菌絲體生長代謝變化
3.5.1 不同培養(yǎng)時間生長量變化
3.5.2 不同培養(yǎng)時間蟲草素變化
3.5.3 不同培養(yǎng)時間糖含量變化
3.5.4 不同培養(yǎng)時間pH值變化
4 討論
4.1 蛹蟲草菌株篩選與分離
4.2 影響蛹蟲草菌絲體生長及蟲草素形成因素探討
4.3 蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)的生長變化
4.4 降低蛹蟲草菌絲體培養(yǎng)生產(chǎn)成本
5 結(jié)論
附錄
參考文獻
致謝
個人簡歷
【參考文獻】:
期刊論文
[1]蛹蟲草的化學成分及藥理作用[J]. 呂金朋,張曄,姚夢杰,張輝,孫佳明. 吉林中醫(yī)藥. 2018(03)
[2]食用菌菌種退化機制及預防措施的最新研究進展[J]. 李亞嬌,孫國琴,郭九峰,王海燕,龐杰. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學. 2018(02)
[3]蛹蟲草固體培養(yǎng)產(chǎn)子實體條件的優(yōu)化及其蟲草素含量測定[J]. 刁朝強,文庭池,廖勇,康冀川,周建云,謝紅艷. 山地農(nóng)業(yè)生物學報. 2017(06)
[4]不同培養(yǎng)介質(zhì)對蛹蟲草子實體生長及產(chǎn)量的影響[J]. 馬麥艷,馬琴,陳方圓,焦子偉. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2017(23)
[5]蟲草素的中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用及毒性研究進展[J]. 顧欣霞,葛曉群. 國際藥學研究雜志. 2017(09)
[6]遼寧蛹蟲草產(chǎn)業(yè)的研究進展[J]. 肖千明. 新農(nóng)業(yè). 2017(18)
[7]蝙蝠蛾擬青霉及蛹蟲草與野生冬蟲夏草活性比較[J]. 姜雪,王春月,李蘭洲,王雪,滕利榮,周毓麟. 長春中醫(yī)藥大學學報. 2017(04)
[8]蛹蟲草小分子功能肽制備及抗衰活性評價[J]. 李若溪,王園園,薛芳馨,岳可心,文懷振,郝博,王杉,王升厚. 河南農(nóng)業(yè). 2017(05)
[9]蛹蟲草抗氧化肽的發(fā)酵制備及對小鼠輻射氧化損傷的防護作用[J]. 楊淑芳,張春楊,錢琨,孫繼紅,張德軍,李晶濤. 蠶業(yè)科學. 2017(03)
[10]北蟲草人工栽培關鍵技術(shù)集成[J]. 許慶國. 食用菌. 2017(03)
碩士論文
[1]蛹蟲草生長營養(yǎng)特性及胞外酶活性的研究[D]. 宋好倩.河南科技學院 2017
[2]蛹蟲草生長發(fā)育條件研究[D]. 杜軍國.陜西科技大學 2013
[3]蛹蟲草液體發(fā)酵高產(chǎn)蟲草素工藝研究[D]. 方婷婷.合肥工業(yè)大學 2012
[4]蟲草素液態(tài)深層發(fā)酵與純化的研究[D]. 陳濤.江南大學 2012
[5]蟲草素降低HepG2細胞內(nèi)甘油三酯的機制探討[D]. 申大偉.延邊大學 2008
本文編號:3205268
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