細(xì)胞壁是真菌有別于動物細(xì)胞的顯著特征之一,但迄今為止真菌細(xì)胞壁的合成和組裝機(jī)理尚不清楚。包括細(xì)胞壁的合成和組裝在內(nèi)的很多生物過程在真菌中高度保守。因此,本研究中以釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）為模式生物對真核生物細(xì)胞壁的合成及組裝過程進(jìn)行了探索。釀酒酵母細(xì)胞常態(tài)下為營養(yǎng)細(xì)胞。營養(yǎng)細(xì)胞壁主要由從內(nèi)到外的葡聚糖層和甘露聚糖層組成。在饑餓條件下,二倍體營養(yǎng)細(xì)胞形成單倍體孢子。孢子壁從內(nèi)到外分別是甘露糖層,葡聚糖層,殼聚糖層和二酪氨酸層。外孢子壁蛋白2（Outer Spore Wall 2,Osw2）僅在釀酒酵母的產(chǎn)孢細(xì)胞中表達(dá),是葡聚糖層和/或甘露聚糖層在孢子壁中正確組裝所必需的。Osw2的N端可能有一個2-脫酮泛解酸2-還原酶結(jié)構(gòu)域,在苯乙烯基染料液泡定位蛋白3（Styryl Dye Vacuolar Localization3,Svl3）和蛋白磷酸酶2A（Protein Phosphatase 2A,PP2A）的多拷貝抑制劑蛋白1（Pp2A Multicopy Suppressor,Pam1）的N端也存在該區(qū)域。Svl3和Pam1是釀酒酵母中的功能同源蛋白,... 

【文章來源】：江南大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 釀酒酵母概述
        1.1.1 釀酒酵母的細(xì)胞壁
        1.1.2 釀酒酵母的孢子壁
    1.2 光滑念珠菌概述
        1.2.1 光滑念珠菌的細(xì)胞壁
    1.3 OSW2,PAM1,SVL3 基因概述
        1.3.1 參與釀酒酵母孢子壁合成與組裝的蛋白
        1.3.2 Osw2,Pam1和Svl3 的關(guān)系
    1.4 本研究的立題意義和研究內(nèi)容
        1.3.1 本研究的立題意義
        1.3.2 本研究的主要內(nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 質(zhì)粒
        2.1.3 引物
        2.1.4 酶與試劑
        2.1.5 主要儀器設(shè)備
        2.1.6 培養(yǎng)基及主要溶液的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 感受態(tài)的制備
        2.2.2 質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.2.3 熒光檢測方法
        2.2.4 CFW敏感性和溫度敏感性測試
        2.2.5 光滑念珠菌的生長曲線測量方法
        2.2.6 光滑念珠菌的基因敲除方法
        2.2.7 釀酒酵母質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化方法
        2.2.8 蛋白質(zhì)免疫印跡
第三章 結(jié)果與討論
    3.1 Svl3 及其同源蛋白Pam1 的理化屬性分析
        3.1.1 svl3Δpam1Δ的細(xì)胞壁缺陷分析
        3.1.2 Svl3和Pam1 的定位
        3.1.3 Svl3蛋白的可溶性分析
    3.2 Svl3蛋白的功能分析
        3.2.1 Svl3的C端的功能
        3.2.2 Svl3的N端的功能
        3.2.3 Svl3中O-甘露糖基化修飾的功能
    3.3 光滑念珠菌中Svl3和Pam1 的同源蛋白的功能探索
        3.3.1 在釀酒酵母中表達(dá)光滑念珠菌中Svl3和Pam1 的同源蛋白
        3.3.2 光滑念珠菌Cgsvl3ΔCgpam1Δ雙缺突變株的表型
主要結(jié)論與展望
    主要結(jié)論
    展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄:作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章



本文編號：3199682