發(fā)布時(shí)間：2021-05-18 08:53

　　目前,石化能源的過度利用給自然環(huán)境帶來了嚴(yán)重的破壞,比如酸雨、霧霾等氣候?yàn)?zāi)害越來越嚴(yán)重。同時(shí),石化能源作為一類不可再生的資源,隨著大規(guī)模的開采和應(yīng)用,其存量也日益減少。因此,尋找和利用一種環(huán)境友好的可再生能源作為石化原料的替代型能源變的尤其重要。生物質(zhì)是已知規(guī)模最為豐富的可再生資源,其來源特別廣泛,包括農(nóng)作物秸稈、林業(yè)廢棄物、農(nóng)業(yè)廢棄物等。在生物質(zhì)的復(fù)雜結(jié)構(gòu)組成中,木質(zhì)纖維素是其最主要的成分,可占到生物質(zhì)干重的60%以上。當(dāng)前,以木質(zhì)纖維素為原料的生物煉制技術(shù)取得了較為快速的發(fā)展,并延伸生產(chǎn)出了較多種類的大宗化學(xué)品,如燃料乙醇、丁醇等。在這些可大規(guī)模獲取的生物質(zhì)資源中,牛糞是養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中最主要的廢棄物,也是生物煉制產(chǎn)業(yè)中一種纖維素含量比較豐富的重要原料。目前,牛糞主要的應(yīng)用還主要集中于沼氣的厭氧發(fā)酵生產(chǎn),以及有機(jī)肥的簡(jiǎn)單利用。牛糞的這些簡(jiǎn)單應(yīng)用過程并沒有充分體現(xiàn)其應(yīng)有的應(yīng)用價(jià)值。本論文結(jié)合當(dāng)前對(duì)生物能源的重大需求,著重研究了牛糞在纖維素酶的誘導(dǎo)和木質(zhì)纖維素乙醇生產(chǎn)上的應(yīng)用潛力。由于在木質(zhì)纖維素乙醇生產(chǎn)的過程中,纖維素酶解是將木質(zhì)纖維素原料降解為可發(fā)酵糖最為關(guān)鍵的一步。因此,纖維素酶的高效... 

【文章來源】：齊魯工業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 木質(zhì)纖維素乙醇概述
        1.1.1 木質(zhì)纖維素乙醇簡(jiǎn)介
        1.1.2 燃料乙醇原料
        1.1.3 牛糞的研究進(jìn)展
    1.2 木質(zhì)纖維素酶解
        1.2.1 木質(zhì)纖維素降解真菌
        1.2.2 木質(zhì)纖維素降解酶系
        1.2.3 真菌纖維素酶轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子
        1.2.4 終止子研究進(jìn)展
    1.3 木質(zhì)纖維素乙醇的生產(chǎn)
        1.3.1 生物質(zhì)預(yù)處理
        1.3.2 半同步糖化發(fā)酵
    1.4 本文研究目的和意義
第2章 牛糞對(duì)草酸青霉纖維素酶表達(dá)的誘導(dǎo)及在乙醇發(fā)酵中的應(yīng)用
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 菌株,樣品收集
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 酸堿預(yù)處理生物質(zhì)
        2.2.2 生物質(zhì)成分分析方法
        2.2.3 牛糞誘導(dǎo)草酸青霉114-2、RE-8、RE-10、RBB1-10表達(dá)木質(zhì)纖維素酶
        2.2.4 商業(yè)纖維素酶SN-1溶液、草酸青霉RBB1-10纖維素酶酶活測(cè)定
        2.2.5 SaccharomycescerevisiaeLF1生物量標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定及菌株活化方法
        2.2.6 同步糖化發(fā)酵方法
        2.2.7 分批糖化同步發(fā)酵方法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 酸堿預(yù)處理前后生物質(zhì)的組分分析
        2.3.2 牛糞誘導(dǎo)草酸青霉114-2、RE-8、RE-10、RBB1-10菌株纖維素酶的表達(dá)
        2.3.3 商業(yè)酶SN-1溶液、草酸青霉RBB1-10酶酶活測(cè)定結(jié)果
        2.3.4 釀酒酵母LF1生物量標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.3.5 單批水解同步糖化發(fā)酵
        2.3.6 分批水解糖化發(fā)酵
    2.4 本章小結(jié)
第3章 不同終止子對(duì)草酸青霉纖維素酶轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子ClrB、XlnR功能的影響
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 菌株及引物
        3.1.2 試劑
        3.1.3 培養(yǎng)基
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 終止子篩選方法
        3.2.2 終止子區(qū)、潮霉素基因（hph）、啟動(dòng)子置換表達(dá)盒片段的克隆及構(gòu)建
        3.2.3 草酸青霉原生質(zhì)體制備及轉(zhuǎn)化
        3.2.4 草酸青霉分純及驗(yàn)證方法
        3.2.5 草酸青霉發(fā)酵及纖維素酶酶活測(cè)定方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 終止子篩選結(jié)果
        3.3.2 終止子、潮霉素、同源臂基因的獲得及表達(dá)盒構(gòu)建結(jié)果
        3.3.3 轉(zhuǎn)化子驗(yàn)證結(jié)果
        3.3.4 重組114-2菌株纖維素酶活測(cè)定結(jié)果
        3.3.5 重組G-75菌株纖維素酶活測(cè)定結(jié)果
    3.4 本章小結(jié)
第4章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間主要科研成果
    一、發(fā)表學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]國(guó)外生物乙醇燃料生產(chǎn)現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢(shì)分析[J]. 翁凌云.  世界農(nóng)業(yè). 2010(05)



本文編號(hào)：3193510