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新型氧雜多環(huán)熒光染料的合成及其在蛋白染色中的應用

發(fā)布時間:2021-05-12 10:53
  作為一種重要的翻譯后修飾,蛋白質(zhì)糖基化在微生物感染、細胞分化、腫瘤轉移、細胞癌變等生命活動中起著重要作用。凝集素芯片作為近年來新問世的,用于檢測糖蛋白的技術,由于其具有高通量,便捷,快速等優(yōu)點,得到了廣泛的關注。用于制作凝集素芯片的樣品多采用熒光標記,后用消散場熒光激活檢測技術進行信號檢測,F(xiàn)今常用于熒光標記的染料多為菁染料,但其常存在合成路線復雜,成本居高不下,水溶性較差,以及隨著甲川鏈增加而穩(wěn)定性逐漸下降等問題。因此,摒除必須由菁染料標記糖蛋白的刻板印象,合成修飾得到新型的熒光染料,彌補其缺陷,具有重大的意義。本文選擇修飾氧雜蒽結構,以得到具有標記蛋白能力的熒光染料為研究目的,設計,合成,并表征出兩類共六種氧雜多環(huán)結構的熒光染料,對其性能及其應用進行研究。主要包括以下兩部分:(1)合成了氧雜多環(huán)結構為主體的非剛性平面的兩種新型熒光染料YD-1和YD-2,剛性平面的四種新型熒光染料YN-1,YN-2,YH-1,和YH-2以及修飾羅丹明B得到的新型熒光染料YB。通過HRMS(ESI)、1H NMR、13C NMR和IR對這七種新化合物的結構進行了表征;對除YB之外的其余六種染料的光譜性... 

【文章來源】:西北大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:98 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 熒光染料的發(fā)展及其結構的修飾
        1.2.1 熒光染料的發(fā)展
        1.2.2 氧雜蒽環(huán)熒光染料及其結構修飾
        1.2.3 菁類熒光染料及其結構修飾
        1.2.4 香豆素熒光染料及其結構修飾
        1.2.5 BODIPY熒光染料及其結構修飾
    1.3 生物熒光標識技術的發(fā)展
        1.3.1 生物熒光標識方法的分類
        1.3.2 熒光標識劑的種類
        1.3.3 生物熒光標識劑在蛋白質(zhì)分析中的應用
    1.4 凝集素芯片在糖蛋白研究領域的應用
        1.4.1 糖蛋白的分類與作用
        1.4.2 研究糖蛋白的技術
        1.4.3 凝集素概述
        1.4.4 凝集素芯片及其發(fā)展前景
    1.5 本課題研究目的以及內(nèi)容
第二章 氧雜多環(huán)熒光染料YD與羅丹明熒光染料YB的合成表征以及YD系列染料的光學性質(zhì)與蛋白染色應用研究
    2.1 引言
        2.1.1 合成路線分析
        2.1.2 反應底物的篩選
    2.2 儀器與試劑
        2.2.1 儀器
        2.2.2 試劑
    2.3 熒光染料YB的合成與結構表征
    2.4 YD系列熒光染料的合成與結構表征
        2.4.1 中間體的合成
        2.4.2 熒光染料YD-1的合成及其結構表征
        2.4.3 熒光染料YD-2的合成及其結構表征
    2.5 YD系列熒光染料的光學性質(zhì)
        2.5.1 熒光染料及pH緩沖溶液的配制
        2.5.2 熒光染料光譜性質(zhì)的測定
        2.5.3 熒光量子產(chǎn)率的測定
        2.5.4 熒光染料YD-1的光學性質(zhì)研究
        2.5.5 熒光染料YD-2的光學性質(zhì)研究
        2.5.6 熒光染料YD系列光學性質(zhì)的對比研究
    2.6 YD系列熒光染料在蛋白染色中的應用研究
        2.6.1 熒光染料YD系列蛋白染色實驗及數(shù)據(jù)
        2.6.2 熒光染料YD系列與Cy3染色性能的對比
    2.7 本章小結
第三章 YN、YH系列氧雜多環(huán)熒光染料的合成、光學性質(zhì)及蛋白染色應用研究
    3.1 引言
        3.1.1 反應底物的篩選
    3.2 儀器與試劑
    3.3 YNYH系列熒光染料的合成與結構表征
        3.3.1 中間體的合成
        3.3.2 熒光染料YN系列的合成及其結構表征
        3.3.3 熒光染料YH系列的合成及其結構表征
    3.4 YNYH系列熒光染料的光學性質(zhì)
        3.4.1 熒光探針標準溶液的配制
        3.4.2 熒光染料光譜性質(zhì)的測定
        3.4.3 熒光量子產(chǎn)率的測定
        3.4.4 熒光染料YN-1,YN-2的光學性質(zhì)研究
        3.4.5 熒光染料YH-1,YH-2的光學性質(zhì)的研究
        3.4.6 熒光染料YN系列的光學性質(zhì)對比研究
        3.4.7 熒光染料YH系列的光學性質(zhì)對比研究
    3.5 YNYH系列熒光染料在蛋白染色中的應用研究
        3.5.1 熒光染料YN系列蛋白染色實驗及數(shù)據(jù)
        3.5.2 熒光染料YN系列與Cy3的對比
        3.5.3 熒光染料YH系列蛋白染色實驗及數(shù)據(jù)
        3.5.4 熒光染料YH系列與Cy3的對比
    3.6 本章小結
參考文獻
結論
致謝
攻讀碩士學位期間取得的研究成果
附錄


【參考文獻】:
期刊論文
[1]近紅外熒光探針及其在生物分析中的應用進展[J]. 傅妮娜,王紅,張華山.  分析科學學報. 2008(02)
[2]雙向凝膠電泳中三種蛋白質(zhì)檢測方法的比較[J]. 馬增春,高月,呂俊萍,王升啟.  中國生物化學與分子生物學報. 2004(04)
[3]用羅丹明B作標準物測定二氯熒光素的熒光量子產(chǎn)率[J]. 楊洗,潘祖亭,馬勇.  分析科學學報. 2003(06)
[4]熒光標記染料[J]. 楊祥宇,宋健,馮榮秀.  化學通報. 2003(09)
[5]6-或7-(取代苯乙烯基)香豆素類化合物的合成及其抗癌活性的研究[J]. 徐嵩,徐世平,李蘭敏.  藥學學報. 2000(02)
[6]菁染料光穩(wěn)定性研究進展[J]. 楊松杰,田禾.  感光科學與光化學. 1999(03)
[7]一種近紅外花菁染料的合成及其應用于生物大分子的測定[J]. 鄭洪,李東輝,陳秋影,許金鉤.  應用化學. 1999(03)
[8]N-羥基琥珀酰亞胺-3-吲哚乙酸酯柱前衍生高效液相色譜分離及熒光測定肽及其水解物[J]. 劉勛,徐國良,張華山,程介克.  高等學;瘜W學報. 1997(06)



本文編號:3183281

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