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短鏈硫酯酶缺失對大腸桿菌合成聚羥基丁酸乳酸酯的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-03-15 13:40
  聚羥基脂肪酸酯(PHAs)是一種由生物合成的聚合物,一般在微生物體內(nèi)以小顆粒的形式作為能量儲存物質(zhì)存在,其性質(zhì)與由石油衍生的化學(xué)塑料有一定的相似性,此外還具有獨(dú)特的可降解能力和良好的生物相容性,因此可以作為化學(xué)塑料的替代品,緩解目前危害較大的由塑料堆積引發(fā)的白色污染等問題。聚羥基丁酸乳酸酯[P(3HB-co-LA)]是屬于PHAs的一種共聚物,該聚合物融合了 P(3HB)和PLA共同的優(yōu)點(diǎn),具有更好的韌性和透明性。本研究以大腸桿菌E.coli MG1655作為背景菌株,通過表達(dá)聚羥基脂肪酸酯合成所需的β-酮硫解酶(phaA)和乙酰乙酰輔酶A還原酶(phaB),突變后的PHA合成酶(phaCm),用于共聚物前體LA-CoA合成所需的丙酸輔酶A轉(zhuǎn)移酶突變體(pctth),構(gòu)建重組大腸桿菌菌株MG1655-03一步合成聚羥基丁酸乳酸酯。為了提高共聚物中乳酸組分含量,在優(yōu)化后的木糖發(fā)酵中,敲除基因D-乳酸脫氫酶(dld)獲得的重組菌株WXJ01-03的乳酸含量從23.8 mol%增加至37.2 mol%。大腸桿菌內(nèi)源性硫酯酶可以降解脂肪酰輔酶A,通過搖瓶發(fā)酵篩選出對LA-CoA具有降解作用的硫... 

【文章來源】:華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

短鏈硫酯酶缺失對大腸桿菌合成聚羥基丁酸乳酸酯的影響


圖1.2不同乳酸含量下的P(3HB-co-LA)?l41l??Fig.?1.2?P(3HB?

短鏈硫酯酶缺失對大腸桿菌合成聚羥基丁酸乳酸酯的影響


圖1.4基因工程大腸桿菌合成P(3HB-co-LA)??Fig.?1.4?Biosynthesis?of?P(3HB-co-LA)?by?genetically?engineered?E?coli??

短鏈硫酯酶缺失對大腸桿菌合成聚羥基丁酸乳酸酯的影響


圖2.1帶有不同同源臂的卡那霉素片段電泳圖

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]弱化呼吸鏈水平對代謝工程大腸桿菌聚羥基丁酸乳酸酯合成的影響[J]. 陸靜嫻,李志敏,葉勤,吳輝.  生物工程學(xué)報(bào). 2019(01)
[2]聚羥基脂肪酸酯的合成和應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 朱博超,焦寧寧.  現(xiàn)代塑料加工應(yīng)用. 2003(05)



本文編號:3084273

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