活性氧物種（ROS）是細胞內(nèi)的重要的活性物質(zhì),在細胞的生理與病理活動中起著重要的作用。生物體內(nèi)活性氧物種的過量產(chǎn)生和積累會導致一系列的重大疾病。相較傳統(tǒng)的活性氧物種檢測技術(shù),熒光技術(shù)應(yīng)用于ROS的檢測與成像越來越多的引起人們的關(guān)注。然而常見的用于檢測ROS的熒光探針大多具有較短的吸收與發(fā)射波長會限制其組織穿透性以及較高的光毒性等,嚴重制約著探針的進一步的生物學應(yīng)用。因而亟待開發(fā)具有更好生物學性能的近紅外熒光探針。因此,本文從近紅外熒光染料出發(fā),基于反應(yīng)型熒光識別機理設(shè)計合成了兩例用于檢測生物體內(nèi)ROS的近紅外熒光探針:1、合成了一例以尼羅藍染料為母體,以對羥基苯硼酸頻哪醇酯為識別基團用于檢測H₂O₂的off-on型近紅外熒光探針Lyso-H₂O₂。探針Lyso-H₂O₂對H₂O₂具有高的選擇性,在測試條件下對其它RNS,ROS等物種沒有明顯的熒光響應(yīng);Lyso-H₂O₂... 

【文章來源】：大連理工大學遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 活性氧物種的產(chǎn)生
    1.2 活性氧熒光識別染料研究進展
        1.2.1 次氯酸熒光識別染料的研究進展
        1.2.2 羥基自由基熒光識別染料的研究進展
        1.2.3 單線態(tài)氧熒光識別染料的研究進展
        1.2.4 臭氧熒光識別染料的研究進展
        1.2.5 過氧化氫熒光識別染料的研究進展
        1.2.6 超氧陰離子熒光識別染料的研究進展
    1.3 選題背景
2O₂的近紅外熒光識別染料">2 用于檢測細胞溶酶體內(nèi)H₂O₂的近紅外熒光識別染料
2O₂的設(shè)計思想">    2.1 探針Lyso-H₂O₂的設(shè)計思想
2O₂的結(jié)構(gòu)以及識別機理">    2.2 探針Lyso-H₂O₂的結(jié)構(gòu)以及識別機理
    2.3 實驗部分
        2.3.1 實驗試劑與儀器
2O₂的合成路線">        2.3.2 探針Lyso-H₂O₂的合成路線
2O₂的合成方法">        2.3.3 探針Lyso-H₂O₂的合成方法
2O₂的光譜測試">        2.3.4 探針分子Lyso-H₂O₂的光譜測試
2O₂對H₂O₂最低檢測限的計算">        2.3.5 探針分子Lyso-H₂O₂對H₂O₂最低檢測限的計算
        2.3.6 表觀速率常數(shù)k’的計算
        2.3.7 生物實驗
    2.4 結(jié)果與討論
2O₂對H₂O₂的濃度滴定">        2.4.1 探針分子Lyso-H₂O₂對H₂O₂的濃度滴定
2O₂對H₂O₂的時間響應(yīng)">        2.4.2 探針分子Lyso-H₂O₂對H₂O₂的時間響應(yīng)
2O₂對常見干擾物的選擇性">        2.4.3 探針分子Lyso-H₂O₂對常見干擾物的選擇性
2O₂反應(yīng)性的影響">        2.4.4 pH對探針分子Lyso-H₂O₂反應(yīng)性的影響
2O₂在細胞內(nèi)對H₂O₂時間響應(yīng)">        2.4.5 探針分子Lyso-H₂O₂在細胞內(nèi)對H₂O₂時間響應(yīng)
2O₂對MCF-7細胞內(nèi)源性H₂O₂的成像">        2.4.6 探針分子Lyso-H₂O₂對MCF-7細胞內(nèi)源性H₂O₂的成像
2O₂的亞細胞器共定位成像">        2.4.7 探針分子Lyso-H₂O₂的亞細胞器共定位成像
2O₂的細胞毒性測試">        2.4.8 探針分子Lyso-H₂O₂的細胞毒性測試
2O₂水蚤對內(nèi)源性H₂O₂的成像">        2.4.9 探針Lyso-H₂O₂水蚤對內(nèi)源性H₂O₂的成像
2O₂在組織中與H₂O₂的反應(yīng)性實驗">        2.4.10 探針Lyso-H₂O₂在組織中與H₂O₂的反應(yīng)性實驗
2O₂對H₂O₂響應(yīng)機理的驗證">        2.4.11 探針Lyso-H₂O₂對H₂O₂響應(yīng)機理的驗證
    2.5 本章小結(jié)
3 用于細胞內(nèi)超氧陰離子識別的近紅外熒光染料
    3.1 探針BDOP的設(shè)計思想
    3.2 探針BDOP的結(jié)構(gòu)以及識別機理
    3.3 實驗部分
        3.3.1 實驗試劑與儀器
        3.3.2 探針BDOP的合成步驟
        3.3.3 探針BDOP的合成方法
        3.3.4 探針BDOP的光譜學測試方法
2·^?最低檢測限的計算">        3.3.5 探針BDOP對O₂·^?最低檢測限的計算
        3.3.6 生物學測試
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 探針BDOP的吸收與發(fā)射光譜
        3.4.2 探針BDOP光穩(wěn)定性測試
2·^?的濃度滴定">        3.4.3 探針BDOP對O₂·^?的濃度滴定
2·^?的選擇性測">        3.4.4 探針BDOP對O₂·^?的選擇性測
2·^?的時間相應(yīng)">        3.4.5 探針BDOP對O₂·^?的時間相應(yīng)
        3.4.6 探針BDOP對pH穩(wěn)定測試
        3.4.7 BDOP細胞毒性測試
2·^?熒光成像">        3.4.8 探針分子BDOP對Raw264.7細胞內(nèi)源性O(shè)₂·^?熒光成像
        3.4.9 探針分子BDOP應(yīng)用于流式細胞分析
        3.4.10 小鼠成像
2·^?響應(yīng)機理的驗證">        3.4.11 探針BDOP對O₂·^?響應(yīng)機理的驗證
    3.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
附錄A 部分化合物的結(jié)構(gòu)表征
致謝



本文編號：3072983