發(fā)布時間：2021-03-03 09:36

　　γ-谷氨酰肽是由谷氨酰胺或谷氨酸的γ-羧基和氨基酸或肽分子的α-氨基發(fā)生脫水縮合反應所得的一類小分子肽,廣泛存在于自然界的動植物和微生物中。γ-谷氨酰肽可從天然物質(zhì)中提取得到,也可通過化學合成法制備得到,但酶法合成法是應用更為廣泛的制備γ-谷氨酰肽的方法,γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-glutamyl transpeptidase,γ-GGT）是最為常用、研究最為深入的一種酶制劑。已有研究證明,部分微生物來源的谷氨酰胺酶也能催化γ-谷氨�；D(zhuǎn)移反應,但關于將其應用于合成γ-谷氨酰肽的研究則是近年來才有所進展,對谷氨酰胺酶合成γ-谷氨酰肽的研究可擴大谷氨酰胺酶的應用范圍,同時也可為合成γ-谷氨酰肽提供新的酶制劑來源,在實際的生產(chǎn)應用中具有重要意義。在此基礎上,本論文利用解淀粉芽孢桿菌來源的谷氨酰胺酶,分別以半胱氨酸和色氨酸為γ-谷氨�；荏w,谷氨酰胺為γ-谷氨�；w,合成γ-谷氨酰肽并對合成條件進行了優(yōu)化,探究了γ-谷氨酰肽的抗氧化活性。本論文首先探究了兩種商用的解淀粉芽孢桿菌來源谷氨酰胺酶的酶學特性。結(jié)果表明,酶A和酶B均能催化水解和轉(zhuǎn)肽反應,在pH 10.0、溫度37℃的條件下,其水解酶活... 

【文章來源】：華南理工大學廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 谷氨酰胺酶的概述
    1.2 γ-谷氨酰肽的概述
    1.3 天然的γ-谷氨酰肽
    1.4 γ-谷氨酰肽的分析檢測
    1.5 γ-谷氨酰肽的生理活性
        1.5.1 γ-谷氨酰肽與病理學指標
        1.5.2 γ-谷氨酰肽與神經(jīng)系統(tǒng)
        1.5.3 γ-谷氨酰肽與炎癥反應
        1.5.4 γ-谷氨酰肽與肝腎功能
        1.5.5 γ-谷氨酰肽與鈣離子敏感受體的變構(gòu)調(diào)節(jié)作用
        1.5.6 其他生理活性
    1.6 γ-谷氨酰肽的制備方法
        1.6.1 自然提取法
        1.6.2 化學合成法
        1.6.3 微生物發(fā)酵法
        1.6.4 酶合成法
    1.7 氧化應激與抗氧化肽
        1.7.1 活性氧簇的概述
        1.7.2 氧化應激與疾病
        1.7.3 抗氧化肽的研究現(xiàn)狀
    1.8 本論文的立題依據(jù)和研究內(nèi)容
        1.8.1 本論文的立題依據(jù)
        1.8.2 本論文的研究內(nèi)容
第二章 兩種谷氨酰胺酶的酶學特性研究
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 試劑與儀器
        2.2.2 實驗方法
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 谷氨酰胺酶的水解及轉(zhuǎn)肽酶活力
        2.3.2 pH對谷氨酰胺酶催化活性的影響
        2.3.3 pH對谷氨酰胺酶穩(wěn)定性的影響
        2.3.4 溫度對谷氨酰胺酶催化活性的影響
        2.3.5 溫度對谷氨酰胺酶穩(wěn)定性的影響
        2.3.6 鹽含量對谷氨酰胺酶催化活性的影響
    2.4 本章小結(jié)
第三章 LX-1000EP環(huán)氧基樹脂固定化谷氨酰胺酶的研究
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 試劑與儀器
        3.2.2 實驗方法
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 溶劑pH對固定化效果的影響
        3.3.2 吸附時間對固定化效果的影響
        3.3.3 相對加酶量對固定化效果的影響
        3.3.4 響應面試驗結(jié)果與分析
    3.4 本章小結(jié)
第四章 谷氨酰胺酶合成γ-谷氨酰肽的研究
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 試劑與儀器
        4.2.2 實驗方法
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 γ-谷氨�；荏w的篩選結(jié)果
        4.3.2 UPLC-MS/MS分離鑒定反應液體系中的γ-谷氨酰肽
        4.3.3 HPLC檢測反應液體系中的γ-谷氨酰肽
        4.3.4 pH對產(chǎn)物種類及產(chǎn)率的影響
        4.3.5 溫度對產(chǎn)物種類及產(chǎn)率的影響
        4.3.6 酶添加量對產(chǎn)物種類及產(chǎn)率的影響
        4.3.7 反應時間對產(chǎn)物種類及產(chǎn)率的影響
        4.3.8 底物濃度對產(chǎn)物種類及產(chǎn)率的影響
        4.3.9 底物比例對產(chǎn)物種類及產(chǎn)率的影響
        4.3.10 降低產(chǎn)物濃度對γ-谷氨酰肽產(chǎn)率的影響
    4.4 本章小結(jié)
第五章 γ-谷氨酰肽及其酶促反應液的抗氧化性研究
    5.1 引言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 試劑與儀器
        5.2.2 實驗方法
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 γ-谷氨酰肽清除DPPH自由基的能力
        5.3.2 γ-谷氨酰肽的還原力
        5.3.3 γ-谷氨酰肽螯合Fe2+的能力
        5.3.4 γ-谷氨酰肽清除ABTS自由基的能力
        5.3.5 γ-谷氨酰肽清除超氧陰離子自由基（O2?-）的能力
        5.3.6 γ-谷氨�；瘜Π被峥寡趸钚缘挠绊�
    5.4 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
    一、結(jié)論
    二、創(chuàng)新點
    三、展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的研究成果
致謝
附件


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]利用重組鈍齒棒桿菌高效表達γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶及酶催化合成L-茶氨酸研究[D]. 和斐.江南大學 2016
[3]醬油鮮味肽的分離純化鑒定及呈味特性研究[D]. 莊明珠.華南理工大學 2015



本文編號：3061043