發(fā)布時(shí)間：2021-02-28 13:16

　　本研究屬于長(zhǎng)春市科技計(jì)劃項(xiàng)目-《玉米胚芽粕資源綜合利用開(kāi)發(fā)系列食品的生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)研究》（14NK005）的一部分。本論文以玉米胚芽粕為研究對(duì)象,通過(guò)酶解、超濾和G-25凝膠色譜分離技術(shù)得到多個(gè)組分,以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和抗氧化能力指數(shù)（ORAC-FL）為指標(biāo)評(píng)價(jià)各組分的抗氧化活性從而得到活性最優(yōu)組分。利用MS/MS技術(shù)確定最優(yōu)組分的氨基酸序列,采用固相合成技術(shù)對(duì)其進(jìn)行化學(xué)合成。隨后以細(xì)胞內(nèi)抗氧化活性（CAA）、細(xì)胞氧化損傷模型、細(xì)胞內(nèi)氧自由基ROS水平和羥基自由基清除率為指標(biāo)評(píng)價(jià)化學(xué)合成肽的抗氧化活性。最后通過(guò)體外模擬胃腸液消化和建立Caco-2細(xì)胞吸收模型探究其胃腸液穩(wěn)定性以及吸收轉(zhuǎn)運(yùn)特性,為其綜合利用提供理論依據(jù)。本研究所獲成果如下:（1）在玉米胚芽抗氧化肽的分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定中,玉米胚芽粕首先經(jīng)過(guò)酶解、超濾得到五種組分:CGMH-1（大于30 kDa）,CGMH-2（10-30 kDa）,CGMH-3（3-10 kDa）,CGMH-4（1-3 kDa）和CGMH-5（小于1 kDa）。以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和ORAC-FL為指標(biāo)評(píng)估這... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：102 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫(xiě)表
第1章 緒論
    1.1 玉米胚芽粕的研究進(jìn)展
        1.1.1 玉米胚芽粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值
        1.1.2 玉米胚芽粕的研究現(xiàn)狀
    1.2 食源性抗氧化肽的研究進(jìn)展
        1.2.1 食源性抗氧化肽的來(lái)源與制備
        1.2.2 抗氧化活性的評(píng)價(jià)方法
    1.3 體外模擬消化的研究進(jìn)展
        1.3.1 體外模擬消化的概述
        1.3.2 體外模擬消化的研究現(xiàn)狀
    1.4 體外吸收模型的研究進(jìn)展
        1.4.1 體外吸收模型方法的研究現(xiàn)狀
        1.4.2 體外吸收機(jī)制的研究進(jìn)展
    1.5 論文研究?jī)?nèi)容
        1.5.1 研究意義
        1.5.2 研究?jī)?nèi)容
        1.5.3 研究路線(xiàn)
第2章 玉米胚芽抗氧化肽的分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定
    2.1 材料與設(shè)備
        2.1.1 材料與試劑
        2.1.2 儀器與設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 玉米胚芽抗氧化肽的酶解
        2.2.2 玉米胚芽蛋白酶解液的超濾
        2.2.3 DPPH自由基清除率的測(cè)定
        2.2.4 ABTS自由基清除率的測(cè)定
        2.2.5 抗氧化能力指數(shù)法（ORAC-FL）的測(cè)定
        2.2.6 玉米胚芽抗氧化肽的Sephadex G-25 凝膠色譜分離
        2.2.7 玉米胚芽抗氧化肽的結(jié)構(gòu)鑒定
        2.2.8 玉米胚芽抗氧化肽的化學(xué)合成
        2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 玉米胚芽粕酶解液超濾后各組分的抗氧化活性評(píng)價(jià)
        2.3.2 CGMH-5 的凝膠層析圖譜
        2.3.3 Sephadex gel-25 凝膠色譜分離后各組分的抗氧化活性評(píng)價(jià)結(jié)果
        2.3.4 玉米胚芽抗氧化肽氨基酸序列鑒定結(jié)果
        2.3.5 玉米胚芽抗氧化肽合成及檢測(cè)結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第3章 玉米胚芽抗氧化肽的活性評(píng)價(jià)
    3.1 材料與設(shè)備
        3.1.1 材料與試劑
        3.1.2 儀器與設(shè)備
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        3.2.2 MTT法細(xì)胞毒性檢測(cè)
        3.2.3 細(xì)胞內(nèi)抗氧化活性（CAA）的測(cè)定
        3.2.4 過(guò)氧化氫損傷模型的構(gòu)建
        3.2.5 抗氧化肽對(duì)過(guò)氧化氫損傷模型的影響
        3.2.6 細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基ROS的檢測(cè)
        3.2.7 清除羥基自由基活性的測(cè)定
        3.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 抗氧化肽對(duì)HepG2 細(xì)胞活力的影響
        3.3.2 細(xì)胞內(nèi)抗氧化活性（CAA）的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.3 過(guò)氧化氫損傷模型的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.4 抗氧化肽對(duì)過(guò)氧化氫損傷模型的影響
        3.3.5 細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基ROS的檢測(cè)結(jié)果
        3.3.6 清除羥基自由基活性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
第4章 MGGN和 MNN的體外模擬消化和吸收的研究
    4.1 材料與設(shè)備
        4.1.1 材料與試劑
        4.1.2 儀器與設(shè)備
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 模擬胃液消化實(shí)驗(yàn)
        4.2.2 模擬腸液消化實(shí)驗(yàn)
        4.2.3 Caco-2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        4.2.4 Caco-2 細(xì)胞單層膜的培養(yǎng)
        4.2.5 Caco-2 細(xì)胞單層膜評(píng)價(jià)
        4.2.6 MGGN和MNN對(duì)Caco-2細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        4.2.7 Caco-2細(xì)胞膜的吸收實(shí)驗(yàn)
        4.2.8 Caco-2 細(xì)胞膜的吸收機(jī)制研究
        4.2.9 RP-HPLC檢測(cè)方法
        4.2.10 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 消化過(guò)程中MGGN和 MNN含量變化的結(jié)果
        4.3.2 Caco-2 細(xì)胞膜跨膜電阻值的變化
        4.3.3 Caco-2 細(xì)胞膜的分化極性
        4.3.4 Caco-2 細(xì)胞膜的通透性
        4.3.5 Caco-2 細(xì)胞膜的激光掃描共聚焦顯微鏡觀(guān)察結(jié)果
        4.3.6 MGGN和 MNN對(duì) Caco-2 細(xì)胞的毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.7 MGGN和 MNN的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.8 MNN的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論
    5.1 全文結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 展望
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同烹飪方式及體外模擬消化對(duì)凡納濱對(duì)蝦主要過(guò)敏原原肌球蛋白免疫活性的影響[J]. 黃天嬌,王夢(mèng)夢(mèng),高永艷,盧瑛.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2019(11)
[2]3種不同來(lái)源蛋白質(zhì)的氨基酸組成及體外動(dòng)態(tài)消化研究[J]. 陳智仙,張海波,張雙慶,張彥.  河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019(02)
[3]鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白的提取及水解肽的抗氧化活性研究[J]. 梁杰,趙曉旭,汪秀妹,楊志強(qiáng),汪少蕓.  食品工業(yè)科技. 2019(08)
[4]松仁清蛋白抗氧化肽的分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定[J]. 盧紅妍,楊行,方麗,劉詩(shī)夢(mèng),閔偉紅.  食品科學(xué). 2019(24)
[5]天然牛黃、體外培育牛黃和人工牛黃中膽汁酸類(lèi)成分及其在人腸源Caco-2細(xì)胞模型中吸收轉(zhuǎn)運(yùn)的對(duì)比研究（英文）[J]. 陳穎,胡曉茹,程顯隆,馬雙成,冉慶森,楊慶,強(qiáng)偉杰,戴忠,朱曉新.  Digital Chinese Medicine. 2018(04)
[6]玉米胚芽粕清蛋白酶解產(chǎn)物的制備及其抗氧化活性和護(hù)肝作用[J]. 于亞莉,宋雪梅,王瑩,劉靜波.  中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2018(06)
[7]基于大鼠離體外翻腸囊模型考察杜仲提取物在正常和自發(fā)性高血壓狀態(tài)下的腸吸收特性差異[J]. 吳林霖,李梅,鞏仔鵬,陳亭亭,鮑紅松,陳艷,胡賀佳,李月婷,李春,王愛(ài)民,李勇軍,王永林.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2018(09)
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博士論文
[1]基于HepG2細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法解析PEF技術(shù)改變抗氧化肽活性的機(jī)理研究[D]. 梁榮.吉林大學(xué) 2018

碩士論文
[1]玉米抗氧化肽的分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定及其完整吸收研究[D]. 姜源.吉林大學(xué) 2018
[2]白藜蘆醇W/O/W運(yùn)載體系的構(gòu)建及其吸收轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制研究[D]. 王珺.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2018
[3]星油藤蛋白肽的制備及其抗氧化活性研究[D]. 李林芽.河南工業(yè)大學(xué) 2016
[4]蛋清源ACE抑制肽的結(jié)構(gòu)與完整吸收關(guān)系研究[D]. 丁龍.吉林大學(xué) 2015
[5]玉米胚芽抗氧化肽的制備及其安全性評(píng)價(jià)研究[D]. 趙會(huì)燕.吉林大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3055905