本研究屬于長春市科技計劃項目-《玉米胚芽粕資源綜合利用開發(fā)系列食品的生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)研究》（14NK005）的一部分。本論文以玉米胚芽粕為研究對象,通過酶解、超濾和G-25凝膠色譜分離技術(shù)得到多個組分,以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和抗氧化能力指數(shù)（ORAC-FL）為指標(biāo)評價各組分的抗氧化活性從而得到活性最優(yōu)組分。利用MS/MS技術(shù)確定最優(yōu)組分的氨基酸序列,采用固相合成技術(shù)對其進行化學(xué)合成。隨后以細胞內(nèi)抗氧化活性（CAA）、細胞氧化損傷模型、細胞內(nèi)氧自由基ROS水平和羥基自由基清除率為指標(biāo)評價化學(xué)合成肽的抗氧化活性。最后通過體外模擬胃腸液消化和建立Caco-2細胞吸收模型探究其胃腸液穩(wěn)定性以及吸收轉(zhuǎn)運特性,為其綜合利用提供理論依據(jù)。本研究所獲成果如下:（1）在玉米胚芽抗氧化肽的分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定中,玉米胚芽粕首先經(jīng)過酶解、超濾得到五種組分:CGMH-1（大于30 kDa）,CGMH-2（10-30 kDa）,CGMH-3（3-10 kDa）,CGMH-4（1-3 kDa）和CGMH-5（小于1 kDa）。以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和ORAC-FL為指標(biāo)評估這... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫表
第1章 緒論
    1.1 玉米胚芽粕的研究進展
        1.1.1 玉米胚芽粕的營養(yǎng)價值
        1.1.2 玉米胚芽粕的研究現(xiàn)狀
    1.2 食源性抗氧化肽的研究進展
        1.2.1 食源性抗氧化肽的來源與制備
        1.2.2 抗氧化活性的評價方法
    1.3 體外模擬消化的研究進展
        1.3.1 體外模擬消化的概述
        1.3.2 體外模擬消化的研究現(xiàn)狀
    1.4 體外吸收模型的研究進展
        1.4.1 體外吸收模型方法的研究現(xiàn)狀
        1.4.2 體外吸收機制的研究進展
    1.5 論文研究內(nèi)容
        1.5.1 研究意義
        1.5.2 研究內(nèi)容
        1.5.3 研究路線
第2章 玉米胚芽抗氧化肽的分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定
    2.1 材料與設(shè)備
        2.1.1 材料與試劑
        2.1.2 儀器與設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 玉米胚芽抗氧化肽的酶解
        2.2.2 玉米胚芽蛋白酶解液的超濾
        2.2.3 DPPH自由基清除率的測定
        2.2.4 ABTS自由基清除率的測定
        2.2.5 抗氧化能力指數(shù)法（ORAC-FL）的測定
        2.2.6 玉米胚芽抗氧化肽的Sephadex G-25 凝膠色譜分離
        2.2.7 玉米胚芽抗氧化肽的結(jié)構(gòu)鑒定
        2.2.8 玉米胚芽抗氧化肽的化學(xué)合成
        2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 玉米胚芽粕酶解液超濾后各組分的抗氧化活性評價
        2.3.2 CGMH-5 的凝膠層析圖譜
        2.3.3 Sephadex gel-25 凝膠色譜分離后各組分的抗氧化活性評價結(jié)果
        2.3.4 玉米胚芽抗氧化肽氨基酸序列鑒定結(jié)果
        2.3.5 玉米胚芽抗氧化肽合成及檢測結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第3章 玉米胚芽抗氧化肽的活性評價
    3.1 材料與設(shè)備
        3.1.1 材料與試劑
        3.1.2 儀器與設(shè)備
    3.2 實驗方法
        3.2.1 HepG2 細胞的培養(yǎng)
        3.2.2 MTT法細胞毒性檢測
        3.2.3 細胞內(nèi)抗氧化活性（CAA）的測定
        3.2.4 過氧化氫損傷模型的構(gòu)建
        3.2.5 抗氧化肽對過氧化氫損傷模型的影響
        3.2.6 細胞內(nèi)活性氧自由基ROS的檢測
        3.2.7 清除羥基自由基活性的測定
        3.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 抗氧化肽對HepG2 細胞活力的影響
        3.3.2 細胞內(nèi)抗氧化活性（CAA）的實驗結(jié)果
        3.3.3 過氧化氫損傷模型的實驗結(jié)果
        3.3.4 抗氧化肽對過氧化氫損傷模型的影響
        3.3.5 細胞內(nèi)活性氧自由基ROS的檢測結(jié)果
        3.3.6 清除羥基自由基活性的實驗結(jié)果
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
第4章 MGGN和 MNN的體外模擬消化和吸收的研究
    4.1 材料與設(shè)備
        4.1.1 材料與試劑
        4.1.2 儀器與設(shè)備
    4.2 實驗方法
        4.2.1 模擬胃液消化實驗
        4.2.2 模擬腸液消化實驗
        4.2.3 Caco-2 細胞的培養(yǎng)
        4.2.4 Caco-2 細胞單層膜的培養(yǎng)
        4.2.5 Caco-2 細胞單層膜評價
        4.2.6 MGGN和MNN對Caco-2細胞毒性實驗
        4.2.7 Caco-2細胞膜的吸收實驗
        4.2.8 Caco-2 細胞膜的吸收機制研究
        4.2.9 RP-HPLC檢測方法
        4.2.10 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 消化過程中MGGN和 MNN含量變化的結(jié)果
        4.3.2 Caco-2 細胞膜跨膜電阻值的變化
        4.3.3 Caco-2 細胞膜的分化極性
        4.3.4 Caco-2 細胞膜的通透性
        4.3.5 Caco-2 細胞膜的激光掃描共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果
        4.3.6 MGGN和 MNN對 Caco-2 細胞的毒性實驗結(jié)果
        4.3.7 MGGN和 MNN的吸收轉(zhuǎn)運實驗結(jié)果
        4.3.8 MNN的吸收轉(zhuǎn)運機制實驗結(jié)果
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論
    5.1 全文結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點
    5.3 展望
參考文獻
導(dǎo)師簡介
作者簡介
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]鮑魚內(nèi)臟蛋白的提取及水解肽的抗氧化活性研究[J]. 梁杰,趙曉旭,汪秀妹,楊志強,汪少蕓.  食品工業(yè)科技. 2019(08)
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博士論文
[1]基于HepG2細胞實驗方法解析PEF技術(shù)改變抗氧化肽活性的機理研究[D]. 梁榮.吉林大學(xué) 2018

碩士論文
[1]玉米抗氧化肽的分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定及其完整吸收研究[D]. 姜源.吉林大學(xué) 2018
[2]白藜蘆醇W/O/W運載體系的構(gòu)建及其吸收轉(zhuǎn)運機制研究[D]. 王珺.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2018
[3]星油藤蛋白肽的制備及其抗氧化活性研究[D]. 李林芽.河南工業(yè)大學(xué) 2016
[4]蛋清源ACE抑制肽的結(jié)構(gòu)與完整吸收關(guān)系研究[D]. 丁龍.吉林大學(xué) 2015
[5]玉米胚芽抗氧化肽的制備及其安全性評價研究[D]. 趙會燕.吉林大學(xué) 2015



本文編號：3055905