竹葉蘭內(nèi)生菌的分離鑒定及生物活性研究
發(fā)布時間:2021-02-17 18:52
竹葉蘭(Arundina graminifolia(D.Don)Hochr.)是蘭科竹葉蘭屬植物,在傣族等少數(shù)民族中作為解毒中草藥被廣泛應(yīng)用,為國家Ⅱ級保護(hù)植物。內(nèi)生菌作為一類特殊的微生物資源,廣泛分布于植物中,經(jīng)過與宿主植物的長期協(xié)同進(jìn)化,不僅能夠產(chǎn)生與宿主植物相同或相似的藥理活性物質(zhì),還能夠產(chǎn)生新穎的代謝產(chǎn)物。鑒于此特點,本文以富含茋類化合物的竹葉蘭為對象,首次對其內(nèi)生菌進(jìn)行分離純化,并對部分內(nèi)生真菌的生物活性進(jìn)行了初步研究,獲得以下研究結(jié)果:1.從來源于云南西雙版納(批號:20160331)的新鮮竹葉蘭中分離得到5株內(nèi)生真菌。從來源于廣西南寧(批號:20170311)的新鮮竹葉蘭中分離得到33株內(nèi)生菌(真菌14株,細(xì)菌11株,放線菌8株),構(gòu)建了竹葉蘭內(nèi)生菌資源庫。竹葉蘭內(nèi)生菌的形態(tài)學(xué)觀察和分子生物學(xué)鑒定結(jié)果表明,19株內(nèi)生真菌分屬于11個種屬,其中刺盤孢屬和鐮孢菌屬為竹葉蘭內(nèi)生真菌優(yōu)勢菌群,鏈霉菌屬為竹葉蘭內(nèi)生放線菌優(yōu)勢菌群。2.對內(nèi)生真菌TJ-1、TJ-2、TJ-3發(fā)酵產(chǎn)物的抗氧化能力進(jìn)行測試。發(fā)現(xiàn)TJ-1菌液和TJ-2菌液對鐵離子有較強(qiáng)的還原能力,TJ-3菌液對羥基自由基有...
【文章來源】:華南理工大學(xué)廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
竹葉蘭內(nèi)生真菌的菌落形態(tài)和個體形態(tài)(1000x)(批號:20160331)
15(c)內(nèi)生放線菌(8 株)圖 2.2 竹葉蘭內(nèi)生菌的菌落形態(tài)和個體形態(tài)(1000x)(批號:20170311)Fig 2.2 The colony morphology and micromorphology(1000x)of endophytes isolated from Arundinagraminifolia(No.20170311)為了保證分離得到的是內(nèi)生菌,本試驗采用的消毒條件及表面消毒效果的評價標(biāo)準(zhǔn)較嚴(yán)格,對照平板上無菌落生長,所以分離到的內(nèi)生菌較少,且多是一些較易生長的內(nèi)生菌。未從批號為 20160331 的新鮮竹葉蘭根部分離純化出內(nèi)生真菌,可能是由于根部與土壤接觸較多,內(nèi)生菌種類豐富,同時實驗操作不嚴(yán)謹(jǐn),導(dǎo)致在本次分離純化實驗過程中,菌株相互交叉感染,從而未能獲得。通過對兩批號不同來源的竹葉蘭進(jìn)行內(nèi)生菌分離,發(fā)現(xiàn)植物內(nèi)生菌的種類繁多,資源較為豐富,未來可以從內(nèi)生菌的次級代謝產(chǎn)物中,
華南理工大學(xué)碩士學(xué)位論文葉蘭內(nèi)生菌活性菌株 TJ-3 的系統(tǒng)發(fā)育分析過第 3、4、5 章節(jié)對部分內(nèi)生菌的生物活性進(jìn)行測定,篩選出優(yōu)勢菌株序,將其序列在 NCBI Blast 數(shù)據(jù)庫中,進(jìn)行同源性比對,結(jié)合 ITS 序列比樹歸屬,對其進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定,結(jié)果表明其序列與層出鐮刀菌(Fatum)同源性≥99%,因此,鑒定其為層出鐮刀菌。其系統(tǒng)發(fā)育樹見圖育樹可進(jìn)一步確認(rèn) TJ-3 的鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]竹葉蘭提取物抗氧化與抗菌活性研究[J]. 閆雪孟,湯冰雪,劉美鳳. 時珍國醫(yī)國藥. 2017(12)
[2]野生稻內(nèi)生固氮菌多樣性研究進(jìn)展[J]. 劉麗輝,蔣慧敏,王佩旋,唐小鈺,彭桂香,譚志遠(yuǎn). 生物技術(shù)進(jìn)展. 2017(06)
[3]竹葉蘭內(nèi)生真菌的分離鑒定及其抗氧化活性研究[J]. 宋新月,湯冰雪,邱君志,劉美鳳. 現(xiàn)代食品科技. 2018(02)
[4]地衣內(nèi)生真菌Pestalotiopsis sp.次生代謝產(chǎn)物[J]. 元超,李剛,王海英,趙俊凌,郭玉華,丁剛. 菌物學(xué)報. 2018(02)
[5]傣藥百樣解的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 劉青青,戴榮繼,呂芳,林凡凱. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2017(04)
[6]平貝母內(nèi)生菌抑菌活性菌株篩選和鑒定[J]. 趙帥,王永宏,田義新,盛吉明,田新新. 時珍國醫(yī)國藥. 2016(07)
[7]苦參殺蟲活性菌株的篩選[J]. 李曉璐. 廣東化工. 2016(12)
[8]人參內(nèi)生拮抗細(xì)菌分離、鑒定及其對人參菌核病抑菌作用研究[J]. 盧占慧,周如軍,袁月,李自博,傅俊范. 中國植保導(dǎo)刊. 2016(03)
[9]一株高抗氧化活性內(nèi)生真菌的分子鑒定及產(chǎn)酚酸類物質(zhì)研究[J]. 高媛,雷旗,蔣維,孔玉珊,薛艷紅,劉士平. 微生物學(xué)通報. 2016(06)
[10]傣藥竹葉蘭中1個新苯丙素及其抗煙草花葉病毒活性[J]. 董偉,周堃,王月德,吉炳琨,周敏,高雪梅,胡秋芬,葉艷青. 中草藥. 2015(20)
碩士論文
[1]石杉屬植物內(nèi)生菌的多樣性及其次生代謝產(chǎn)物的乙酰膽堿酯酶抑制活性研究[D]. 徐海杰.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]醉馬草內(nèi)生菌殺蟲活性及其多樣性研究[D]. 張雪兵.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]抗菌活性植物內(nèi)生菌的分離、篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化[D]. 鄧雪萍.華南理工大學(xué) 2010
[4]澤漆內(nèi)生菌的分離鑒定及抗病毒活性篩選[D]. 李文華.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2009
本文編號:3038380
【文章來源】:華南理工大學(xué)廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
竹葉蘭內(nèi)生真菌的菌落形態(tài)和個體形態(tài)(1000x)(批號:20160331)
15(c)內(nèi)生放線菌(8 株)圖 2.2 竹葉蘭內(nèi)生菌的菌落形態(tài)和個體形態(tài)(1000x)(批號:20170311)Fig 2.2 The colony morphology and micromorphology(1000x)of endophytes isolated from Arundinagraminifolia(No.20170311)為了保證分離得到的是內(nèi)生菌,本試驗采用的消毒條件及表面消毒效果的評價標(biāo)準(zhǔn)較嚴(yán)格,對照平板上無菌落生長,所以分離到的內(nèi)生菌較少,且多是一些較易生長的內(nèi)生菌。未從批號為 20160331 的新鮮竹葉蘭根部分離純化出內(nèi)生真菌,可能是由于根部與土壤接觸較多,內(nèi)生菌種類豐富,同時實驗操作不嚴(yán)謹(jǐn),導(dǎo)致在本次分離純化實驗過程中,菌株相互交叉感染,從而未能獲得。通過對兩批號不同來源的竹葉蘭進(jìn)行內(nèi)生菌分離,發(fā)現(xiàn)植物內(nèi)生菌的種類繁多,資源較為豐富,未來可以從內(nèi)生菌的次級代謝產(chǎn)物中,
華南理工大學(xué)碩士學(xué)位論文葉蘭內(nèi)生菌活性菌株 TJ-3 的系統(tǒng)發(fā)育分析過第 3、4、5 章節(jié)對部分內(nèi)生菌的生物活性進(jìn)行測定,篩選出優(yōu)勢菌株序,將其序列在 NCBI Blast 數(shù)據(jù)庫中,進(jìn)行同源性比對,結(jié)合 ITS 序列比樹歸屬,對其進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定,結(jié)果表明其序列與層出鐮刀菌(Fatum)同源性≥99%,因此,鑒定其為層出鐮刀菌。其系統(tǒng)發(fā)育樹見圖育樹可進(jìn)一步確認(rèn) TJ-3 的鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]竹葉蘭提取物抗氧化與抗菌活性研究[J]. 閆雪孟,湯冰雪,劉美鳳. 時珍國醫(yī)國藥. 2017(12)
[2]野生稻內(nèi)生固氮菌多樣性研究進(jìn)展[J]. 劉麗輝,蔣慧敏,王佩旋,唐小鈺,彭桂香,譚志遠(yuǎn). 生物技術(shù)進(jìn)展. 2017(06)
[3]竹葉蘭內(nèi)生真菌的分離鑒定及其抗氧化活性研究[J]. 宋新月,湯冰雪,邱君志,劉美鳳. 現(xiàn)代食品科技. 2018(02)
[4]地衣內(nèi)生真菌Pestalotiopsis sp.次生代謝產(chǎn)物[J]. 元超,李剛,王海英,趙俊凌,郭玉華,丁剛. 菌物學(xué)報. 2018(02)
[5]傣藥百樣解的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 劉青青,戴榮繼,呂芳,林凡凱. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2017(04)
[6]平貝母內(nèi)生菌抑菌活性菌株篩選和鑒定[J]. 趙帥,王永宏,田義新,盛吉明,田新新. 時珍國醫(yī)國藥. 2016(07)
[7]苦參殺蟲活性菌株的篩選[J]. 李曉璐. 廣東化工. 2016(12)
[8]人參內(nèi)生拮抗細(xì)菌分離、鑒定及其對人參菌核病抑菌作用研究[J]. 盧占慧,周如軍,袁月,李自博,傅俊范. 中國植保導(dǎo)刊. 2016(03)
[9]一株高抗氧化活性內(nèi)生真菌的分子鑒定及產(chǎn)酚酸類物質(zhì)研究[J]. 高媛,雷旗,蔣維,孔玉珊,薛艷紅,劉士平. 微生物學(xué)通報. 2016(06)
[10]傣藥竹葉蘭中1個新苯丙素及其抗煙草花葉病毒活性[J]. 董偉,周堃,王月德,吉炳琨,周敏,高雪梅,胡秋芬,葉艷青. 中草藥. 2015(20)
碩士論文
[1]石杉屬植物內(nèi)生菌的多樣性及其次生代謝產(chǎn)物的乙酰膽堿酯酶抑制活性研究[D]. 徐海杰.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]醉馬草內(nèi)生菌殺蟲活性及其多樣性研究[D]. 張雪兵.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]抗菌活性植物內(nèi)生菌的分離、篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化[D]. 鄧雪萍.華南理工大學(xué) 2010
[4]澤漆內(nèi)生菌的分離鑒定及抗病毒活性篩選[D]. 李文華.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2009
本文編號:3038380
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