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別藻藍(lán)蛋白的提取純化工藝研究及光譜分析

發(fā)布時(shí)間:2021-01-17 19:43
  本論文以新鮮巢湖水華藍(lán)藻和鈍頂螺旋藻為對(duì)比研究對(duì)象,以別藻藍(lán)蛋白(APC)的純度和回收率為指標(biāo),研究對(duì)比了不同鹽析方式對(duì)兩種藻中別藻藍(lán)蛋白的提純效果和最優(yōu)條件,試驗(yàn)探索了羥基磷灰石(HA)柱層析法提純別藻藍(lán)蛋白的條件,探索了常見因素對(duì)別藻藍(lán)蛋白穩(wěn)定性的影響,并運(yùn)用紫外-可見吸收光譜法,分析了試劑級(jí)別藻藍(lán)蛋白提取純化工藝組合的純化機(jī)理。具體研究內(nèi)容與結(jié)果有:(1)粗提純條件的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)。分別研究單步高濃度鹽析、分段兩步鹽析對(duì)巢湖藍(lán)藻、鈍頂螺旋藻中別藻藍(lán)蛋白的純化效果,探索不同硫酸銨濃度對(duì)提取純化別藻藍(lán)蛋白的影響。結(jié)果表明:分段兩步鹽析比單步高濃度鹽析的純化效果更好,螺旋藻的最佳硫酸銨濃度為1.6 mol/L、2.2 mol/L,純度由0.34提升至1.24,巢湖藍(lán)藻的最佳硫酸銨濃度為1.4 mol/L、2.0 mol/L,純度由0.15上升至0.85。(2)柱層析條件的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)。通過純度比較及光譜分析,研究羥基磷灰石柱層析在不同淋洗梯度條件對(duì)別藻藍(lán)蛋白洗脫效果的影響,并采用優(yōu)選出的最佳方案應(yīng)用于螺旋藻和巢湖藍(lán)藻中別藻藍(lán)蛋白的分離提純。結(jié)果表明:選擇50、100、200 mmol/L的濃度梯... 

【文章來源】:合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:64 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 研究背景
        1.1.1 螺旋藻概述
        1.1.2 巢湖藍(lán)藻概述
        1.1.3 別藻藍(lán)蛋白的性質(zhì)作用
        1.1.4 別藻藍(lán)蛋白的純化方法
        1.1.5 別藻藍(lán)蛋白的光譜分析
        1.1.6 別藻藍(lán)蛋白的穩(wěn)定性
    1.2 研究進(jìn)展
        1.2.1 藍(lán)藻資源化利用現(xiàn)狀
        1.2.2 別藻藍(lán)蛋白的純化研究現(xiàn)狀
        1.2.3 別藻藍(lán)蛋白穩(wěn)定性研究現(xiàn)狀
    1.3 課題的提出
        1.3.1 選題依據(jù)
        1.3.2 研究意義
        1.3.3 研究路線與研究內(nèi)容
第二章 別藻藍(lán)蛋白粗提純條件的優(yōu)化
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 試劑與儀器
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.3 分析方法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 單步高濃度鹽析單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.3.2 分段兩步鹽析單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.3.3 螺旋藻與巢湖藍(lán)藻粗提純實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比與分析
    2.4 小結(jié)
第三章 別藻藍(lán)蛋白柱層析條件的優(yōu)化
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 試劑與儀器
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.3 分析方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 HA柱層析淋洗液梯度的選擇結(jié)果與分析
        3.3.2 兩步鹽析結(jié)合一步HA柱層析的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
    3.4 小結(jié)
第四章 試劑級(jí)別藻藍(lán)蛋白純化過程中的光譜分析
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 試劑與儀器
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.3 分析方法
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 單步高濃度鹽析的光譜分析
        4.3.2 分段兩步鹽析的光譜分析
        4.3.3 經(jīng)HA柱層析純化后的光譜分析
        4.3.4 不同工藝階段后APC的光譜圖比較
    4.4 小結(jié)
第五章 別藻藍(lán)蛋白的穩(wěn)定性研究
    5.1 前言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 試劑與儀器
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    5.3 分析方法
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 光照和時(shí)間對(duì)別藻藍(lán)蛋白穩(wěn)定性的影響
        5.4.2 溫度對(duì)別藻藍(lán)蛋白穩(wěn)定性的影響
        5.4.3 酸堿度對(duì)別藻藍(lán)蛋白穩(wěn)定性的影響
    5.5 小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 研究特色
    6.3 展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]巢湖水體富營養(yǎng)化成因分析及治理對(duì)策[J]. 朱慶春.  安徽農(nóng)學(xué)通報(bào). 2017(09)
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[3]巢湖富營養(yǎng)化的歷程、空間分布與治理策略(1984-2013年)[J]. 張民,孔繁翔.  湖泊科學(xué). 2015(05)
[4]pH對(duì)腐熟藍(lán)藻微生物燃料電池產(chǎn)電性能的影響[J]. 陳桂頂,朱光燦,周越.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(07)
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[6]冬季巢湖西半湖的富營養(yǎng)化及污染狀況研究——基于浮游藻類的多樣性分析[J]. 李夢(mèng),劉桂建,吳蕾,劉榮瓊,汪家權(quán).  中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(02)
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[10]螺旋藻營養(yǎng)保健價(jià)值及開發(fā)應(yīng)用進(jìn)展[J]. 張文,吳清平,吳軍林.  食品與發(fā)酵科技. 2013(03)

博士論文
[1]試劑級(jí)藻藍(lán)蛋白提取純化工藝研究及光譜分析[D]. 張發(fā)宇.合肥工業(yè)大學(xué) 2017

碩士論文
[1]高效提純巢湖藍(lán)藻藻藍(lán)蛋白工藝研究[D]. 盛晶夢(mèng).合肥工業(yè)大學(xué) 2016
[2]巢湖水華藍(lán)藻藻藍(lán)蛋白提取純化研究[D]. 趙冰冰.合肥工業(yè)大學(xué) 2015
[3]鈍頂螺旋藻中藻藍(lán)蛋白提取純化及穩(wěn)定性研究[D]. 徐蕾然.天津科技大學(xué) 2013
[4]巢湖富營養(yǎng)化連續(xù)在線監(jiān)測(cè)與藍(lán)藻水華預(yù)警[D]. 肖永輝.揚(yáng)州大學(xué) 2011
[5]太湖藍(lán)藻厭氧發(fā)酵產(chǎn)揮發(fā)性脂肪酸的研究[D]. 李玉祥.江南大學(xué) 2009



本文編號(hào):2983479

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