殼聚糖,幾丁質(zhì)的脫乙酰基產(chǎn)物,具有比幾丁質(zhì)更好的溶解性、可降解性和生物相容性。殼聚糖有抑菌、保濕、調(diào)節(jié)血脂等優(yōu)良性能,因而在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域有很大的開發(fā)和應(yīng)用潛力。幾丁質(zhì)脫乙酰酶（CDA）,是酶法制備殼聚糖的關(guān)鍵酶。該方法制備殼聚糖反應(yīng)條件溫和、能耗值低、環(huán)境友好,是行業(yè)未來的發(fā)展趨勢。本研究以海口紅樹林土壤中篩選出的一株產(chǎn)CDA絲狀真菌PenicilliumjanthinellumUV-OS為出發(fā)菌株,采用多級紫外誘變方法進行誘變育種,針對篩選獲得的高產(chǎn)誘變菌株的培養(yǎng)基配方和發(fā)酵條件進行了優(yōu)化,最后對胞外CDA粗酶的酶學(xué)性質(zhì)進行了研究,主要內(nèi)容和結(jié)果如下:1.紫外線誘變育種以Penicillium janthinellum UV-OS為出發(fā)菌株,對其孢子液進行紫外線誘變處理,經(jīng)多級紫外誘變后獲得一株高產(chǎn)CDA誘變菌株UV-3S。UV-3S的胞外CDA酶活值為11.05 U/mL,是原始株UV-OS的2.13倍。2.誘變菌株UV-3S與野生菌株UV-OS的發(fā)酵產(chǎn)酶特性誘變菌株UV-3S與野生菌株UV-0S培養(yǎng)24 h后,每12 h分別測定它們的胞外CDA酶活、胞內(nèi)CDA酶活、殘?zhí)橇�、�?.. 

【文章來源】：海南大學(xué)海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３誘變菌株ＵＶ－３Ｓ菌絲體Ｕ），產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)（ｂ）?（ｃ）及孢子的顯微圖（ｄ）??Ｆｉｇ．３?Ｍｉｃｒｏｇｒａｐｈ?ｏｆ?ｍｙｃｅｌｉｕｍ?（ａ），?ｓｐｏｒｏｇｅｎｏｕｓ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?（ｂ）?（ｃ）?ａｎｄ?ｓｐｏｒｅｓ?（ｄ）?ｏｆ?ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ??ＵＶ－３Ｓ??（ｉ）分子生物學(xué)鑒定結(jié)?

海南大學(xué)碩士學(xué)位論文??３結(jié)果與分析??１高產(chǎn)ＣＤＡ突變菌株的選育??１．１菌種鑒定??）形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果??圖２－ａ為ＵＶ－３Ｓ菌落在篩選培養(yǎng)基的表型特征圖，圖２－ｂ為ＵＶ－３Ｓ菌株在面培養(yǎng)基的表型特征圖。由圖２－ａ可知，菌落為乳白色、圓形、不透明、表面潤、全緣、中間隆起、有光澤；繼續(xù)培養(yǎng)，菌絲體產(chǎn)ＣＤＡ酶，將篩選培養(yǎng)基中硝基乙酰苯胺的乙�；撊�，生成黃色的對硝基苯胺，使菌落周圍呈現(xiàn)黃色透明一步培養(yǎng)黃色透明圈變大。菌株在ＰＤＡ斜面培養(yǎng)基的表型與在篩選培養(yǎng)基的同，在生長初期，菌絲體呈白色，氣生菌絲生長旺盛，呈絲絨狀，培養(yǎng)２－３天產(chǎn)灰綠色孢子。?????

圖６?ＵＶ－ＯＳ?（ａ）與誘變菌株ＵＶ－３Ｓ?（ｂ）細胞壁幾丁質(zhì)的紅外光譜??Ｆｉｇ．６?ＦＴ－ＩＲ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ｃｅｌｌ?ｗａｌｌ?ｃｈｉｔｉｎ?ｆｒｏｍ?Ｐｅｍｃｉｌｌｉｕｍ?ｊａｎｔｈｉｔｉｅｌｌｕｍ?ＵＶ－ＯＳ?（ａ）?ａｎｄ??ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ?ＵＶ－３Ｓ?（ｂ?

【參考文獻】：
期刊論文
[1]一株產(chǎn)幾丁質(zhì)脫乙酰酶絲狀真菌的發(fā)酵條件優(yōu)化研究[J]. 應(yīng)聰萍,王瑤,李永成.  食品工業(yè)科技. 2016(01)
[2]羧甲基殼聚糖的性能及應(yīng)用概況[J]. 王美娜,李苑新,蔡興.  中國實驗方劑學(xué)雜志. 2015(01)
[3]高產(chǎn)幾丁質(zhì)酶巴倫葛茲類芽孢桿菌的篩選和發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 付星,閆巧娟,江正強,楊鑫斌,劉竹青,楊紹青.  微生物學(xué)通報. 2015(04)
[4]表面活性劑輔助酶法提取黃芪黃酮的工藝優(yōu)化[J]. 王超,杜冰,謝藍華,張嘉怡,林鳳英,楊公明.  食品工業(yè)科技. 2014(23)
[5]幾丁質(zhì)脫乙酰酶(CDA)的研究進展[J]. 閔婷,倪孟祥.  藥物生物技術(shù). 2011(01)
[6]紫外誘變選育殼聚糖酶高產(chǎn)菌株的初步研究[J]. 屠潔,劉冠卉,徐桂娥,李前龍.  中國釀造. 2010(11)
[7]甲殼素/殼聚糖生物抗菌敷料在皮膚組織工程中的應(yīng)用[J]. 何玲,于波,王慧麗,李青,呂品.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(38)
[8]高產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的枯草芽孢桿菌誘變育種及發(fā)酵條件研究[J]. 張敏,胡曉,萬津瑜,雷欣雨,趙丹萍.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2010(11)
[9]紫外光誘導(dǎo)苧麻疫霉抗甲霜靈突變及對苧麻疫霉生物學(xué)特性的影響[J]. 吳向輝,高智謀,陳方新,潘月敏,陸保君.  菌物學(xué)報. 2010(01)
[10]殼聚糖接枝水楊酸對草莓的保鮮作用[J]. 侯懷恩,侯益民,李雪菊.  河南科學(xué). 2009(12)

博士論文
[1]紫外線損傷微生物機理及增強活性污泥降解特性應(yīng)用研究[D]. 江映翔.昆明理工大學(xué) 2003

碩士論文
[1]產(chǎn)幾丁質(zhì)酶渤海絲狀真菌（Alternaria tenuissima）的篩選、鑒定及產(chǎn)酶研究[D]. 劉丹.天津師范大學(xué) 2012
[2]幾丁質(zhì)脫乙酰酶菌株的選育[D]. 張菁菁.陜西科技大學(xué) 2012
[3]幾丁質(zhì)脫乙酰酶產(chǎn)生菌的誘變篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化[D]. 劉麗.山東師范大學(xué) 2011
[4]甘藍夜蛾中兩種不同類型幾丁質(zhì)脫乙酰基酶基因的克隆與表達研究[D]. 姚磊.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]Rhodococcus sp. Y104產(chǎn)幾丁質(zhì)脫乙酰酶的分離純化[D]. 岳洪霞.山東輕工業(yè)學(xué)院 2010
[6]海洋微生物幾丁質(zhì)酶菌株篩選及培養(yǎng)條件[D]. 辛雪嬌.大連工業(yè)大學(xué) 2010
[7]產(chǎn)幾丁質(zhì)酶菌株的篩選與鑒定及幾丁質(zhì)酶酶學(xué)性質(zhì)研究[D]. 熊晶.中南大學(xué) 2009
[8]幾丁質(zhì)脫乙酰酶產(chǎn)生菌的篩選[D]. 劉麗萍. 2007



本文編號：2942536