高通量篩選是指基于一系列高通量設(shè)備和技術(shù),自動(dòng)化處理微小體積液體同時(shí)匹配先進(jìn)的信號(hào)檢測(cè)以及準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)分析,以從數(shù)量級(jí)巨大文庫(kù)中篩選出目標(biāo)化合物、基因、酶以至活細(xì)胞菌株。高通量篩選裝置發(fā)展趨勢(shì)是微型化、自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化以及機(jī)器人系統(tǒng)。對(duì)于工業(yè)微生物的優(yōu)化,高通量篩選是關(guān)鍵技術(shù)。課題圍繞著活細(xì)胞篩選技術(shù)展開了技術(shù)拓展與縱深并行的創(chuàng)新研究。課題先后探索了基于微孔板的高通量篩選技術(shù)及基于微流控芯片的超高通量篩選技術(shù)。首先,以生產(chǎn)糖化酶（Glucoamylase）的黑曲霉為研究對(duì)象,進(jìn)行了基于孔板的高通量篩選平臺(tái)技術(shù)及應(yīng)用研究。實(shí)驗(yàn)探索并總結(jié)了包括孔內(nèi)剪切力,孔內(nèi)供氧（kLa）和種子自身特性三大類共六種因素對(duì)于深孔板微孔培養(yǎng)物培養(yǎng)狀態(tài)的影響,并最終實(shí)現(xiàn)了黑曲霉48深孔板微培養(yǎng)過程的優(yōu)化。優(yōu)化后,對(duì)于相同培養(yǎng)對(duì)象,各孔間糖化酶酶活的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）降低至3.19%。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果為微生物,特別是菌絲體茂盛微生物,孔板微培養(yǎng)體系的優(yōu)化提供了完整方案。之后,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了產(chǎn)糖化酶的黑曲霉發(fā)酵過程發(fā)酵液糖化酶酶活與pH之間的負(fù)相關(guān)關(guān)系,并建立了一個(gè)基于pH指示劑的高效的酶活定性分析方法。與經(jīng)典的p-NPG法... 

【文章來源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：146 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１微流控技術(shù)覆蓋的尺寸區(qū)間ｌ２ｌ??Ｆｉｇ?１．１?Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ?ｒａｎｇｅ?ｏｆ?ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ＾２】??，芯

同時(shí)在尺寸設(shè)計(jì)上，陷阱設(shè)計(jì)也通常僅允許容納單個(gè)細(xì)胞，且這一陷：駢被單個(gè)細(xì)??胞山―■己對(duì)其他細(xì)胞呈現(xiàn)“排斥性”。作流體內(nèi)流動(dòng)的細(xì)胞遇到這ｍ寺殊設(shè)汁的“陷阱”??時(shí)，便能夠被成功捕獲。目前常見的空間位阻捕獲列舉于圖１．３，其分別對(duì)應(yīng)的參考文獻(xiàn)??為（Ａ）＂７！、Ｂ｜ｌ＊ｌ、Ｃ＂４１、Ｄ＿、屈川、Ｆ，２２！、Ｇ⑶。??＿＿??＿＿：＿?＿??＇ｉｑ．?■．?｜?ｑ?＾?ｉｆｆＳＴ?ｎｈＵｖＵｋｙｊ、’：??Ｍ?Ｍ?Ｍ?Ｍ?；！?■?１１?＇１?、廠一ｔ?、??／?ｃ，??ｔ?．＇Ｓ?Ｉ：屈．＾Ｎ＞ｆ｜?ｒ?了?一二———ｒ——??＼?？＿?Ｔ?—－??４?■，??—???—?＿?＂?■?■?ｕ?．?■?？??圖１．３空間位阻捕獲芯片實(shí)例Ｉ１７－２３！??Ｆｉｇ?１．３?Ｓｐａｔｉａｌ?ｃａｐｔｕｒｅ?ｃｈｉｐｓ?＂卜２”??

川流體實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的控制或操作，例如，ＭｄｉｋｈａｎＴａｎｙｅｒｉ等人構(gòu)讓廣－個(gè)以｜？字交義為主??體的微通道，利用整合在芯八內(nèi)的微閥實(shí)現(xiàn)對(duì)流體的動(dòng)態(tài)控制，／Ｉ：孔道交義位置形成ｆ?一??個(gè)滯留位點(diǎn)，成功實(shí)現(xiàn)對(duì)微小顆粒的非接觸式精確限制，如圖１．４?１２６１。??３（ｂ）??ｏｕｔｌｅｔ?ｂｕｆｆｅｒ?？〇ｎａｓ??ｉｎｌｅｔ?ｖ?ｙ??－１００?Ｍｍ?Ｗ?＾??Ｍ??，丨ｅ?ｒｔ?ｔ／??＼?（Ｃ）?Ｔｒａｐｐｍｇ?｜?｜??Ｊ?＾ｎｅｊ?＼??Ｉ－?＾?ｗ??ｒ￣ｌ?Ｆｌｕｉｄｉｃ?Ｌａｙｅｒ?１３３?Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｌａｙｅｒ??圖１．４流體力學(xué)捕獲芯片ｌ？ｌ??Ｆｉｇ?１．４?Ｆｌｕｉｄ?ｍｅｃｈａｎｉｃｓ?ｃａｐｔｕｒｅ?ｏｎ?ｃｈｉｐ１２６＇??１．４．２．３介電力捕獲??當(dāng)一個(gè)中心離子在非均一電場(chǎng)內(nèi)被極化時(shí)，該粒子就會(huì)受到介電力的作用而發(fā)生遷??移，即介電電泳［２７１。?？般而言，細(xì)胞中含有大量的有機(jī)分子和無機(jī)鹽離子，在非均勻電??場(chǎng)的作用下，有機(jī)分子很容易被極化，無機(jī)鹽離子會(huì)ｍ新分布，整個(gè)細(xì)胞很容易被極??化。不同的細(xì)胞具有不ｍ的極化特性。將介電力與微流控芯片結(jié)合，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)微流控??芯片內(nèi)的顆粒的分離，捕獲，裝運(yùn)等操作［２７１。值得注意地是，介電電泳與電泳是不同??的


本文編號(hào)：2917440