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雙氧木脂素A誘導(dǎo)白紋伊蚊的轉(zhuǎn)錄組差異分析

發(fā)布時(shí)間:2020-12-11 23:36
  雙氧木脂素A(haedoxan A,HA)是從多年生草本植物透骨草(Phryma leptostachya L.)中分離鑒定的一種二氧雙環(huán)辛烷木脂素類化合物,HA對(duì)多種害蟲有效,尤其對(duì)家蠅和蚊子幼蟲具有較高的殺蟲活性。前期的癥狀學(xué)觀察表明,供試?yán)ハx經(jīng)HA處理后肌肉松弛、蟲體不自主震顫、出現(xiàn)麻醉現(xiàn)象并最終死亡,根據(jù)處理昆蟲的中毒癥狀推測(cè)HA可能作用于昆蟲的神經(jīng)元或肌肉受體,但其具體的藥物作用機(jī)制和靶標(biāo)尚不清楚;诟咄哭D(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù),使得從生物體的轉(zhuǎn)錄層面篩選藥物及其相關(guān)作用機(jī)制成為可能。因此,本研究利用Illumina高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)HA亞致死劑量處理24 h后白紋伊蚊三齡幼蟲和未處理的照組進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,從生物信息學(xué)角度分析了HA誘導(dǎo)下白紋伊蚊的差異表達(dá)基因,并就HA顯著作用的神經(jīng)節(jié)鞘糖脂生物合成途徑進(jìn)行了分析和驗(yàn)證,為進(jìn)一步探索HA的作用機(jī)理提供了一定的參考依據(jù)。主要結(jié)果如下:1、雙氧木脂素A(HA)對(duì)白紋伊蚊3齡幼蟲的毒力測(cè)定表明,HA對(duì)白紋伊蚊殺蟲活性高,LC50為0.31μg/mL,從而選擇亞致死劑量誘導(dǎo)濃度LC30為0.2μg... 

【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:60 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 植物源農(nóng)藥及透骨草概述
        1.1.1 植物源農(nóng)藥的概述
        1.1.2 透骨草概述
        1.1.3 透骨草化學(xué)成分
        1.1.4 透骨草中化合物的殺蚊活性
        1.1.5 雙氧木脂素A作用機(jī)理研究進(jìn)展
    1.2 轉(zhuǎn)錄組概況
        1.2.1 轉(zhuǎn)錄組
        1.2.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序在毒理學(xué)中的應(yīng)用
    1.3 白紋伊蚊及其組學(xué)研究
        1.3.1 白紋伊蚊
        1.3.2 白紋伊蚊的組學(xué)研究
    1.4 論文的設(shè)計(jì)思路
第二章 材料和方法
    2.1 供試材料
        2.1.1 供試藥劑
        2.1.2 供試?yán)ハx
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 HA對(duì)三齡白紋伊蚊幼蟲的毒力測(cè)定
        2.2.2 轉(zhuǎn)錄組樣品制備
        2.2.3 試蟲RNA提取及質(zhì)量檢測(cè)
        2.2.4 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及文庫構(gòu)建
        2.2.5 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)分析
        2.2.6 β-半乳糖苷酶(GLB1)酶活性測(cè)定
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 亞致死劑量誘導(dǎo)濃度的確定
    3.2 白紋伊蚊總RNA質(zhì)量檢測(cè)
    3.3 測(cè)序數(shù)據(jù)的產(chǎn)出與組裝
    3.4 差異表達(dá)基因的篩選與功能注釋
        3.4.1 差異表達(dá)基因的篩選
        3.4.2 差異表達(dá)基因的GO注釋
        3.4.3 差異表達(dá)基因的KEGG注釋
    3.5 關(guān)鍵基因的差異表達(dá)分析
    3.6 β-半乳糖苷酶活性測(cè)定
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào):2911429

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