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利用稀禾定篩選高生長高油脂的寇氏隱甲藻突變株及轉(zhuǎn)錄分析

發(fā)布時(shí)間:2020-12-04 17:39
  寇氏隱甲藻(Crypthecodinium cohnii)是一種異養(yǎng)海洋微藻,其體內(nèi)DHA含量占油脂含量的30-50%,而體內(nèi)其他多不飽和脂肪酸含量占油脂含量的比例都達(dá)不到1%。由于這些優(yōu)勢,近些年來寇氏隱甲藻已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于DHA的工業(yè)化生產(chǎn)中。但是,到目前為止,寇氏隱甲藻的全基因組序列測序還沒有被完成,限制了基因工程在寇氏隱甲藻中應(yīng)用,人們無法通過基因改造的方式獲得性狀更為優(yōu)良的寇氏隱甲藻突變株。因此,誘變育種仍然是獲得高產(chǎn)寇氏隱甲藻突變株的主要方式。在本研究中,我們發(fā)現(xiàn)一定濃度的乙酰輔酶A羧化酶活性抑制劑稀禾定能夠顯著抑制寇氏隱甲藻的生長。因此,我們提出選用稀禾定作為一種突變株篩選劑,用于篩選乙酰輔酶A羧化酶活性增強(qiáng)同時(shí)生長和油脂含量有所提高的突變株。為了實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo),我們將常壓室溫等離子體(ARTP)誘變技術(shù)與基于稀禾定的突變株篩選方法相結(jié)合,并成功應(yīng)用于寇氏隱甲藻中,經(jīng)過兩輪誘變篩選,成功獲得了高產(chǎn)的寇氏隱甲藻突變株。我們得到的寇氏隱甲藻突變株M-1-2,與野生株WT相比,其干重和油脂分別提高了24.32%和7.05%,證明了基于稀禾定的篩選方法的有效性。與上述結(jié)果相一致的,... 

【文章來源】:天津大學(xué)天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:82 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

利用稀禾定篩選高生長高油脂的寇氏隱甲藻突變株及轉(zhuǎn)錄分析


DHA化學(xué)結(jié)構(gòu)式Figure1-1ChemicalstructureofDHA

結(jié)構(gòu)圖,乙酰輔酶A羧化酶,結(jié)構(gòu)圖,轉(zhuǎn)移酶


基載體蛋白(BCCP)、α-羥基轉(zhuǎn)移酶(α-CT)和 β-羥基轉(zhuǎn)移酶(一條多功能的長多肽鏈上,主要存在于植物液泡、動物、酵母、同質(zhì)型 ACCase 都由核基因編碼,其功能域上有高度保守的BC-BCCCT-COOH[71]。乙酰輔酶 A 羧化酶的結(jié)構(gòu)圖如圖 1-2 所示。

化學(xué)結(jié)構(gòu),羧化酶,化學(xué)名稱,環(huán)己烯


A 羧化酶抑制劑——稀禾定oxydim)又被稱為拿補(bǔ)凈,其化學(xué)名稱為 2基)丙基]-3-羥基-2-環(huán)己烯-1-酮,是一種草[77]。稀禾定結(jié)構(gòu)如圖 1-3 所示。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]采用常壓室溫等離子體誘變技術(shù)獲得一株高產(chǎn)雄甾-4-烯-3,17-二酮的突變菌株Mycobacterium neoaurum ZADF-4(英文)[J]. Chao LIU,Xian ZHANG,Zhi-ming RAO,Ming-long SHAO,Le-le ZHANG,Dan WU,Zheng-hong XU,Hui LI.  Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2015(04)
[2]鈍頂節(jié)旋藻高產(chǎn)藻株的誘變選育[J]. 劉奇,臧曉南,張學(xué)成.  中國海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(04)
[3]高產(chǎn)DHA寇氏隱甲藻突變株的篩選[J]. 佘雋,田華,陳濤,何東平.  食品科學(xué). 2013(17)
[4]精喹禾靈篩選高脂微藻的有效性研究[J]. 曲曉梅,宓文義,朱葆華,楊官品,李色東,潘克厚.  中國海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2013(06)
[5]高產(chǎn)二十二碳六烯酸隱甲藻的選育及其發(fā)酵條件研究[J]. 孫中貫,劉詠,姚建銘,李俊,朱素梅.  食品科學(xué). 2013(05)
[6]三種海洋微藻和三種淡水微藻脂肪酸組成特征的比較分析[J]. 董麗華,游江濤,林秋奇,胡韌,韓博平.  熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào). 2004(03)
[7]三種海洋微藻生長期脂肪酸組成研究[J]. 李文權(quán),廖啟斌,李芊,陳清花,王憲.  海洋環(huán)境科學(xué). 2002(02)
[8]環(huán)境條件對隱甲藻生長及DHA產(chǎn)量的影響[J]. 王菊芳,梁世中,陳峰.  海洋科學(xué). 2002(02)
[9]碳、氮源對隱甲藻油脂和DHA積累的影響[J]. 王永華,梁世中,楊博.  中國油脂. 2001(06)
[10]碳氮比對隱甲藻(Crypthecodinium cohnii)總脂及DHA含量的影響[J]. 王菊芳,梁世中,吳振強(qiáng),譚字榴,陳峰.  華南理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2000(10)

碩士論文
[1]萊茵衣藻高產(chǎn)油脂藻株的誘變篩選及其油脂代謝關(guān)鍵酶基因的轉(zhuǎn)錄分析[D]. 張曉舟.中國海洋大學(xué) 2013
[2]優(yōu)化海產(chǎn)微藻多不飽和脂肪酸生產(chǎn)條件的研究[D]. 蔣漢明.汕頭大學(xué) 2003



本文編號:2897988

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