迷迭香(Rosmarinus officinalis L.)是唇形科迷迭香屬植物,原產(chǎn)于環(huán)地中海沿岸地區(qū),近年在我國云南、貴州、海南等地已被大面積引種栽培,多年來一直被用作香料,用于佐餐及腌制、熏制食品的調(diào)味,其成分主要包括黃酮類、萜類和精油等。然而,現(xiàn)有的報(bào)道大多是針對(duì)迷迭香中個(gè)別活性成分如迷迭香酸等單獨(dú)進(jìn)行研究,本文希望對(duì)迷迭香黃酮的成分及抗氧化活性等方面進(jìn)行系統(tǒng)的研究,進(jìn)而指導(dǎo)其作為天然抗氧化劑在食品中的應(yīng)用。本課題的研究包括五個(gè)部分:(1)通過單因素試驗(yàn)(包括乙醇體積分?jǐn)?shù)、液料比、微波溫度、微波起始功率和提取時(shí)間五個(gè)因素)和響應(yīng)面法優(yōu)化微波輔助提取迷迭香中黃酮類物質(zhì)的最佳工藝條件。結(jié)果表明,微波輔助法提取迷迭香黃酮的最佳條件是:乙醇體積分?jǐn)?shù)45%,液料比40:1(mL:g),微波溫度77℃,微波起始功率500 W,提取時(shí)間7 min,在此條件下,迷迭香黃酮提取率為7.88%。(2)采用D101大孔樹脂純化迷迭香黃酮,純化條件為:上樣液濃度1.0 mg/mL、上樣液pH=4、流速2 BV/h、解析液乙醇體積分?jǐn)?shù)50%。采用高效液相色譜法分析純化效果,在以上純化條件下,迷迭香黃酮純度由30%增加到70%,為純化前的2.3倍。(3)采用高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS/MS)對(duì)迷迭香黃酮成分進(jìn)行定性及定量分析。通過與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比相對(duì)分子質(zhì)量、保留時(shí)間以及二級(jí)質(zhì)譜碎片等信息,鑒定出沒食子兒茶素、梔子苷、二氫丁香苷、木犀草苷、木犀草素-7-O-?-D葡萄糖醛酸苷、橙皮苷、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸、芹菜素7-O葡萄糖苷、木犀草素-5-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素-3’-O-葡萄糖醛酸苷以及迷迭香酚12種成分。(4)采用兩種結(jié)合化學(xué)法的離線HPLC法,評(píng)價(jià)了迷迭香黃酮中各成分清除DPPH自由基和OH自由基的能力,結(jié)果表明,迷迭香酸對(duì)于DPPH自由基和OH自由基均具有最強(qiáng)的清除能力,清除率分別高達(dá)86.5%和83.9%,而其余成分對(duì)于兩種自由基的清除能力有所不同。同時(shí),利用細(xì)胞模型法初步評(píng)價(jià)了迷迭香黃酮的細(xì)胞內(nèi)抗氧化活性,結(jié)果顯示,濃度在1~100μg/mL范圍內(nèi),迷迭香黃酮對(duì)人宮頸癌細(xì)胞(Hela)的存活率幾乎無影響,且其清除活性氧(ROS)的能力大于迷迭香酚、小于迷迭香酸;但當(dāng)濃度達(dá)到1000μg/mL時(shí),迷迭香黃酮可殺死一定量的Hela,細(xì)胞存活率僅為62.3%。(5)制備了迷迭香黃酮(RF)的β-環(huán)糊精鉀金屬有機(jī)骨架材料(K-CD-MOF)包結(jié)物(RF-K-CD-MOF),RF-K-CD-MOF中黃酮的包結(jié)率為87.9%,結(jié)果表明RF-K-CD-MOF的熱穩(wěn)定性及耐酸堿性明顯優(yōu)于RF。此外,將RF及RF-K-CD-MOF添加到五花肉上,研究加工過程中脂質(zhì)氧化規(guī)律,結(jié)果表明,與不添加黃酮的對(duì)照組相比,添加RF及RF-K-CD-MOF各組均具有較低的過氧化值(POV)和丙二醛(MDA)含量,且添加RF-K-CD-MOF各組表現(xiàn)出更好的抑制脂質(zhì)氧化效果。
【學(xué)位單位】：天津商業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：TS251.6;TS264.3
【部分圖文】：

響應(yīng)值的影響。根據(jù)所得回歸方程，以273 nm處的吸光度值Y作為響應(yīng)值，分別將乙醇體積分?jǐn)?shù)、液料比、微波溫度定為0水平，繪制出三維響應(yīng)曲面圖及相應(yīng)等高線，如圖2-3。

第三章 迷迭香黃酮的純化101 大孔樹脂對(duì)迷迭香黃酮純化效果分析方法3.3.1.2對(duì)迷迭香總黃酮進(jìn)行純化，由公式(3-1)得其純化后純度。并按照方法3.3.1.3對(duì)其純化效果進(jìn)行檢測(cè)，圖3-1為經(jīng)D101大孔樹總黃酮樣品液在273 nm下的高效液相色譜圖。從圖3-1中可以看出D101大孔樹脂純化后的響應(yīng)值比同濃度下純化前的有明顯增大，純均明顯增大2.3倍左右，與純度計(jì)算結(jié)果相吻合，由此可知，D101黃酮類化合物能起到很好的純化作用。這將為后續(xù)的成分分析、抗定基礎(chǔ)。果與討論

圖 6-1 K-CD-MOF 材料的顯微鏡照片（×40）Fig.6-1 Microscope image of K-CD-MOF（×40）F-K-CD-MOF 的包結(jié)率方法6.3.1.2和6.3.1.3進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算得到不同芯壁比包結(jié)物的包結(jié)所示。由圖6-2可知，隨著壁材（K-CD-MOF）的增加，迷迭香黃酮大；當(dāng)芯壁比達(dá)到1:10時(shí)，包結(jié)率達(dá)到87.9%，而當(dāng)芯壁比達(dá)到1:12度變緩。因此，采用迷迭香黃酮與K-CD-MOF材料制備包結(jié)物的最0。

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本文編號(hào)：2824769