【摘要】：為了提高農(nóng)作物產(chǎn)量,國(guó)內(nèi)外均使用大量高效農(nóng)藥防治病蟲(chóng)害。但是,隨之而來(lái)的是環(huán)境污染、生態(tài)失衡、食品安全等問(wèn)題,在長(zhǎng)期大量使用農(nóng)藥過(guò)程中,很多農(nóng)業(yè)病蟲(chóng)害逐漸產(chǎn)生不同程度的耐藥性與抗藥性。以天然產(chǎn)物為先導(dǎo)化合物開(kāi)發(fā)的環(huán)境友好型農(nóng)藥具有容易降解、選擇性高、對(duì)環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn),逐漸成為新型綠色農(nóng)藥研發(fā)的主要途徑之一。新資源海洋真菌代謝產(chǎn)物的研究對(duì)具有新穎結(jié)構(gòu)和環(huán)境友好型農(nóng)用抑菌活性物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)具有重要意義。根據(jù)菌株生長(zhǎng)形貌、次級(jí)代謝產(chǎn)物的質(zhì)量、豐富度以及抑菌活性等方面對(duì)4株菌株進(jìn)行優(yōu)化培養(yǎng),結(jié)果發(fā)現(xiàn):在生長(zhǎng)形貌方面,菌株CCH-1為“奇特”菌株;在次級(jí)代謝生產(chǎn)力方面,除了CCH-1以外,其它3株菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物量都比較大,尤其是RICE固體培養(yǎng)基;菌株CCH-1相同發(fā)酵時(shí)間的不同培養(yǎng)基中以RICE固體培養(yǎng)基的次級(jí)代謝產(chǎn)物量較大,MH1次之。在次級(jí)代謝產(chǎn)物豐富度方面,通過(guò)TLC檢測(cè),發(fā)現(xiàn)菌株CCH-1、CCH-2和27-A次級(jí)代謝產(chǎn)物均較豐富,但是CCH-1的MH1培養(yǎng)基的粗提物有特征顯色斑點(diǎn),生長(zhǎng)形貌奇特。在抑菌活性篩選中,發(fā)現(xiàn)菌株CCH-1對(duì)SA的抑菌活性最好,最大抑菌圈為23mm(陽(yáng)性對(duì)照為23mm);CCH-2和24-A菌株對(duì)BS有較好的抑菌活性,最大抑菌圈分別為22mm和26mm(陽(yáng)性對(duì)照為24mm);27-A菌株對(duì)BT有較好的抑菌活性,最大抑菌圈分別為24mm(陽(yáng)性對(duì)照為22mm)。最終確定CCH-1作為研究對(duì)象,采取4w的靜置發(fā)酵。對(duì)菌株CCH-1的MH1培養(yǎng)基進(jìn)行了3次規(guī)模發(fā)酵,同時(shí),為了考察同源微生物之間的相互作用,對(duì)來(lái)自粗枝軟骨藻的CCH-1和CCH-3進(jìn)行了混合規(guī)模發(fā)酵。所得浸膏分別進(jìn)行VLC梯度洗脫,并進(jìn)行活性跟蹤,發(fā)現(xiàn)從石油醚:乙酸乙酯體積比為10:1到二氯甲烷:甲醇體積比為5:1極性段活性較強(qiáng)、產(chǎn)物較豐富,對(duì)此組分使用重結(jié)晶和各種柱層析,例如硅膠柱、凝膠柱、反相柱以及制備板薄層層析等進(jìn)行分離純化,最終得到了20余個(gè)化合物,通過(guò)現(xiàn)代波譜技術(shù)NMR(核磁共振波譜)和文獻(xiàn)比對(duì),鑒定了5個(gè)化合物結(jié)構(gòu)。從單體化合物的抑菌結(jié)果發(fā)現(xiàn),單體化合物FT-32、FT-33對(duì)BS有很強(qiáng)的抑菌活性,抑菌圈直徑分別為40mm和44mm(陽(yáng)性對(duì)照為32mm)。
【學(xué)位授予單位】：青島理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：TQ560.1;Q936
【圖文】：

圖 2.1.1.2 鼠尾藻及分離純化的 24-A圖 2.1.1.3 海螺及分離純化的 27-A菌的分離與純化實(shí)驗(yàn)方法種分離培養(yǎng)基 培養(yǎng)基：馬鈴薯 200g/L，葡萄糖 20g/L，瓊脂 20g/L，80%陳容至 1L，pH 自然，121℃條件下滅菌 20min。為抑制細(xì)菌生L 氯霉素抑制劑（4mg/mL）于培養(yǎng)基均勻涂布。

品的來(lái)源 12 月 6 日，采自青島嶗山海域的粗枝軟骨藻、鼠尾藻、海螺。圖 2.1.1.1 粗枝軟骨藻及分離純化的菌株 CCH-1（上）、CCH-2（下）圖 2.1.1.2 鼠尾藻及分離純化的 24-A

圖 2.1.1.1 粗枝軟骨藻及分離純化的菌株 CCH-1（上）、CCH-2（下）圖 2.1.1.2 鼠尾藻及分離純化的 24-A圖 2.1.1.3 海螺及分離純化的 27-A菌的分離與純化實(shí)驗(yàn)方法

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本文編號(hào)：2804142