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γ-亞麻酸產(chǎn)生菌拉曼被孢霉培養(yǎng)基優(yōu)化及發(fā)酵動力學(xué)分析

發(fā)布時(shí)間:2020-08-22 10:32
【摘要】:γ-亞麻酸(Gamma Linolenic Acid,GLA)是一種人體必需的多不飽和脂肪酸,廣泛地被應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、保健品等行業(yè)。它具有定向殺死癌細(xì)胞、緩解骨質(zhì)疏松、過敏性鼻炎以及心臟病等生理活性及功效。同時(shí),它能夠控制體內(nèi)的代謝途徑降低膽固醇的水平。目前,市面上出現(xiàn)的GLA產(chǎn)品主要來源于植物油脂,大部分來自月見草種子,然而植物來源的GLA產(chǎn)品不能滿足市場需要。微生物發(fā)酵擁有一系列植物來源無法比擬的優(yōu)點(diǎn),具有很大的發(fā)展?jié)摿。本文以拉曼被孢?Mortierella ramanniana)HLY0902為生產(chǎn)菌株,以代謝調(diào)控的角度,通過外源添加其在代謝過程中重要的中間代謝物,研究這些物質(zhì)對GLA的合成影響。使用單因素實(shí)驗(yàn)方法,確定了對拉曼被孢霉產(chǎn)GLA有促進(jìn)作用的營養(yǎng)成分的最佳濃度,分別是:乙酸4 mg/L,丙酮酸6 mg/L,草酰乙酸10 mg/L,蘋果酸2 mg/L,谷氨酸2mg/L,琥珀酸2 mg/L,檸檬酸8 mg/L,維生素B1 2 mg/L,維生素B2 10 mg/L,維生素PP 4 mg/L,維生素B6 6 mg/L,維生素M 8 mg/L。其次,結(jié)合實(shí)驗(yàn)室的前期研究,利用Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對GLA積累有影響的16種營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行篩選,結(jié)果表明:葡萄糖、酵母膏、KH_2PO_4、檸檬酸為發(fā)酵過程中的顯著影響因素,接著以GLA產(chǎn)量為響應(yīng)值,通過Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析得到影響GLA產(chǎn)量的二階數(shù)學(xué)模型,優(yōu)化得到四個(gè)顯著因素的最佳水平。綜合得到改良培養(yǎng)基配方:葡萄糖96 g/L,酵母膏10 g/L;KH_2PO_4 5 g/L,NaNO_3 3 g/L,MgSO_4 1 g/L,CuSO_4 0.1 mg/L,檸檬酸7 mg/L,ZnSO_4 20 mg/L,MnSO_4 0.5 mg/L,FeSO_4 40 mg/L,維生素B1 0 mg/L,維生素B2 10 mg/L;維生素PP 4 mg/L,維生素B6 4 mg/L,維生素M 10 mg/L,乙酸8mg/L。在優(yōu)化條件下,GLA產(chǎn)量達(dá)到1323.6 mg/L,與優(yōu)化前(1050.0 mg/L)相比,提升了20.67%。最后,對拉曼被孢霉HLY0902進(jìn)行搖瓶發(fā)酵動力學(xué)研究,建立了菌體生長、油脂生成以及葡萄糖消耗的動力學(xué)模型。采用非線性擬合的方法結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果對模型進(jìn)行擬合。結(jié)果表明,模型擬合度較高,能夠較好地描述產(chǎn)GLA菌株拉曼被孢霉HLY0902發(fā)酵過程中的代謝變化。
【學(xué)位授予單位】:長春工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:TQ920.1
【圖文】:

亞麻酸,化學(xué)結(jié)構(gòu)式,功能性油脂


第1章 緒 論念的提出,人們開始追求健康的飲食生理功能,對人體一些營養(yǎng)素缺乏癥和極防治作用,成為人們關(guān)注的焦點(diǎn),(Polyunsaturated Fatty Acids, PUFAs)的智力及視網(wǎng)膜發(fā)育、成年人心腦血管傳統(tǒng)基于動物組織或植物的提取法限足人們?nèi)找嬖鲩L的巨大需要[3],因此亟類功能性油脂;再|(zhì) Linolenic Acid, GLA),化學(xué)學(xué)名為:18:3Δ6,9,12,分子式為 C18H30O2,分子量,其分子結(jié)構(gòu)如圖 1-1 所示。

路徑圖,路徑,脫氫酶,碳鏈


第 1 章 緒 論催化下,歷經(jīng) 7 次合成循環(huán)后,延伸生成 16 個(gè)碳原子的軟脂酰-ACP,并進(jìn)一步生成軟脂酸(PalmiticAcid,PA,16:0),緊接著在酶的作用下經(jīng)還原、脫水、再還原使碳鏈延長兩個(gè)單位生成硬脂酸(Stearic Acid, SA, 18:0)。這兩種脂肪酸均為飽和脂肪酸(Saturated FattyAcid, SFA),在 Δ9 脂肪脫氫酶的作用下,催化形成雙鍵,生成油酸(OleicAcid,OA,18:1Δ9),通過這樣的去飽和作用,這些前體物質(zhì)結(jié)合特定催化位置的脫氫酶,生成不同系列的 PUFAs。GLA 是由 LA 在 Δ6 脫氫酶的去飽和作用下生成的,根據(jù)微生物細(xì)胞內(nèi)存在的其它脂肪酶的種類及活性,GLA 會進(jìn)一步進(jìn)行轉(zhuǎn)化。需要注意的是,在脂肪酸碳鏈的延長及去飽和的過程中,延伸系統(tǒng)使用的載體多以 CoA 結(jié)合或者 ACP(Acylcarrierportein, ACP)結(jié)合的形式進(jìn)行轉(zhuǎn)化的[72,73]。

乙酸


一l乙酸對DCW、TL、TL心CW以及GLA的影響

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉勝男;王亞洲;石林霞;李市場;古紹彬;;γ-亞麻酸產(chǎn)生菌的低能離子束誘變選育[J];河南科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2015年03期

2 黎志勇;叢蕾蕾;聶志奎;彭超;鄧中濤;紀(jì)曉俊;;拉曼被孢霉產(chǎn)γ-亞麻酸的發(fā)酵條件優(yōu)化[J];生物加工過程;2013年04期

3 王軍喜;趙

本文編號:2800583


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