【摘要】：半纖維素是纖維質(zhì)原料中含量?jī)H次于纖維素的一種重要物質(zhì),占植物干重的15%~35%。在目前能源緊缺的情況下,充分利用纖維質(zhì)原料生產(chǎn)燃料乙醇成為解決能源問(wèn)題的重要途徑。在半纖維素利用過(guò)程中木聚糖酶起著至關(guān)重要的作用,通過(guò)提高木聚糖酶活力來(lái)降低半纖維素被利用的成本,進(jìn)而起到降低整個(gè)纖維乙醇的生產(chǎn)成本,成為一種必要的手段。課題研究以綠色木霉經(jīng)誘變保存于實(shí)驗(yàn)室的100株誘變株為出發(fā)菌株,通過(guò)篩選、產(chǎn)酶發(fā)酵條件優(yōu)化、酶解實(shí)驗(yàn)等方法手段,對(duì)綠色木霉誘變效果及其產(chǎn)酶特性等進(jìn)行了研究,研究結(jié)果如下:1.通過(guò)復(fù)篩得到了10株酶活高于原始菌株酶活10%的誘變菌株;對(duì)10株誘變株進(jìn)行再?gòu)?fù)篩,每個(gè)誘變株均做三組平行,最終得到了了A24和A75兩株酶活平行性良好的菌株;對(duì)A75和A24進(jìn)行遺傳穩(wěn)定性檢測(cè)表明,A75的遺傳穩(wěn)定性比A24更具優(yōu)勢(shì),將A75作為后續(xù)研究的實(shí)驗(yàn)菌株。2.通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)A75的搖瓶發(fā)酵產(chǎn)酶條件作了研究。結(jié)果表明:A75的培養(yǎng)配方為乳糖4.0%、MgSO_4·7H_2O 1%、(NH4)_2SO_4 1%、KH_2PO_4 0.1%,CaCl_2 0.05%、微量元素液0.1%、吐溫80 0.04%;培養(yǎng)條件為pH5.0、30℃、150 rpm、144~168 h,所產(chǎn)木聚糖酶酶活達(dá)到7715.64 IU/mL,比優(yōu)化前提高了約28%。3.A75的50 L中試發(fā)酵產(chǎn)酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:以乳糖為誘導(dǎo)物補(bǔ)料量15%~18%,還原糖濃度降至0.6%時(shí)開(kāi)始補(bǔ)料,發(fā)酵罐溶氧值控制在20%~30%之間,罐壓設(shè)定為0.04 kpa,轉(zhuǎn)速不超過(guò)400 rpm。該條件下,最終木聚糖酶活達(dá)到了40216 IU/mL,比原始菌株產(chǎn)酶量高18%。4.A75產(chǎn)木聚糖酶的酶特性研究結(jié)果表明:A75所產(chǎn)酶類主要是木聚糖酶,還含有一定量的纖維素酶,β-葡萄糖苷酶幾乎不含。該木聚糖酶屬于酸性木聚糖酶,耐熱性較差,最適作用溫度為50°C,最適作用pH為5.0。5.利用汽爆玉米秸稈為酶解原料,配合使用纖維素酶和β-葡萄糖苷酶,對(duì)A75所產(chǎn)酶的酶解效果進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明:當(dāng)添加量分別為每克絕干物料25 IU/mL、1200 IU/mL、20 IU/mL時(shí),酶解作用效果最好。
【學(xué)位授予單位】：南陽(yáng)師范學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：TQ925
【圖文】：

線制作稱量皿中置于烘箱82～85℃烘5 h以上，配制成0.45、0.50、0.55、0.60 mg/mL 的木糖梯度溶液 3 支比色管做三個(gè)平行，每個(gè)梯度的三支樣品溶液、0.5 mL（pH 4.8）0.05 mol/L 檸檬酸緩沖液色管加入相同的檸檬酸緩沖液和 DNS，作為空空白管煮沸 5 min，迅速取出用冷水冷卻至室溫容至 10 mL，在分光光度計(jì) 560 nm 下測(cè)定各樣糖含量(mg)為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)數(shù)在 0.999 以上方可使用。 木糖標(biāo)準(zhǔn)曲線及公

吸入反應(yīng)液的體積（mL)。含量測(cè)定準(zhǔn)曲線制作在 105℃高溫下烘干（至無(wú)質(zhì)量差為止），配制成濃度 040、0.45 、0.50、0.55、0.60mg/mL 的葡萄糖梯度溶液；取 3 支比色管做三個(gè)平行，每個(gè)梯度的三支樣品管均依次萄糖溶液、1.5 mL（pH 4.8）0.05 mol/L 檸檬酸緩沖液、2.0 比色管加入相同的檸檬酸緩沖液和 DNS，作為空白對(duì)照和空白管煮沸 5 min，迅速取出用冷水冷卻至室溫；定容至 10 mL，在 540 nm 下測(cè)定各樣品吸光值（用空白g）為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制曲線，并擬合回歸方程99 以上方可使用。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線及葡萄糖含量計(jì)算公式

表 3-1 正交試驗(yàn)因素與水平表Table 3-1 Orthogonal test factors and level tables因素乳糖(%)A玉米漿(%)BKH2PO4(%)CM1 3 3 0.10 2 4 2 0.15 3 5 1 0.20 與分析源對(duì) A75 發(fā)酵產(chǎn)酶的影響碳源對(duì) A75 發(fā)酵產(chǎn)酶影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖 3-1 所示。在確上，將乳糖添加量設(shè)置不同的梯度進(jìn)行研究，結(jié)果如圖 3-

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本文編號(hào)：2781852